| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1. 前言 | 第15-30页 |
| 1.1 百合体细胞胚发生的研究进展 | 第15-22页 |
| 1.1.1 影响百合体细胞胚发生的因素 | 第15-16页 |
| 1.1.2 百合体细胞胚的组织形态学鉴定 | 第16-18页 |
| 1.1.3 百合体细胞胚的应用 | 第18-19页 |
| 1.1.4 百合体细胞胚发生的研究难点 | 第19-22页 |
| 1.2 观赏植物miRNA研究进展 | 第22-24页 |
| 1.3 植物体细胞胚发生相关miRNA研究进展 | 第24-28页 |
| 1.3.1 体细胞胚发生相关miRNA的特点 | 第24-26页 |
| 1.3.2 miRNA与靶基因复杂的对应关系 | 第26-27页 |
| 1.3.3 用于体细胞胚发生miRNA荧光定量检测的内参基因 | 第27-28页 |
| 1.4 研究思路与技术路线 | 第28-30页 |
| 1.4.1 研究思路 | 第28页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第28-30页 |
| 2. 细叶百合和兰州百合体细胞胚发生 | 第30-47页 |
| 2.1 材料与方法 | 第30-31页 |
| 2.1.1 材料 | 第30页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第30页 |
| 2.1.3 试验方法 | 第30-31页 |
| 2.2 结果与分析 | 第31-44页 |
| 2.2.1 BA和NAA对细叶百合体细胞胚诱导的影响 | 第31-33页 |
| 2.2.2 Picloram和NAA对细叶百合体细胞胚诱导的影响 | 第33-34页 |
| 2.2.3 2,4-D、NAA和BA对兰州百合体细胞胚发生的影响 | 第34页 |
| 2.2.4 Picloram和NAA对兰州百合体细胞胚诱导的影响 | 第34-37页 |
| 2.2.5 百合体细胞胚发生的组织形态学鉴定 | 第37-42页 |
| 2.2.6 百合体细胞胚发生中淀粉含量动态变化 | 第42页 |
| 2.2.7 百合体细胞胚发生中可溶性糖含量动态变化 | 第42-43页 |
| 2.2.8 百合体细胞胚发生中可溶性蛋白质含量动态变化 | 第43-44页 |
| 2.3 讨论 | 第44-47页 |
| 2.3.1 生长素对百合体细胞胚发生效率的影响 | 第44页 |
| 2.3.2 百合体细胞胚的起源方式 | 第44-45页 |
| 2.3.3 百合体细胞胚的表皮原 | 第45页 |
| 2.3.4 百合体细胞胚发生中碳水化合物含量变化 | 第45-47页 |
| 3. 百合体细胞胚小RNA及转录组学研究 | 第47-75页 |
| 3.1 材料与方法 | 第47-49页 |
| 3.1.1 材料 | 第47页 |
| 3.1.2 总RNA提取 | 第47页 |
| 3.1.3 cDNA库构建和转录组测序 | 第47页 |
| 3.1.4 小RNA库构建及小RNA测序 | 第47页 |
| 3.1.5 转录组测序序列组装和基因注释 | 第47-48页 |
| 3.1.6 小RNA测序数据的生物信息学分析 | 第48-49页 |
| 3.2 结果与分析 | 第49-71页 |
| 3.2.1 百合体细胞胚转录组测序结果分析 | 第49-55页 |
| 3.2.2 百合体细胞胚小RNA测序结果分析 | 第55-71页 |
| 3.3 讨论 | 第71-75页 |
| 3.3.1 百合miRNA家族成员和数量 | 第71-73页 |
| 3.3.2 百合miRNA保守性 | 第73-75页 |
| 4. 百合体细胞胚发生中miRNA荧光定量内参基因的筛选 | 第75-89页 |
| 4.1 材料与方法 | 第75-76页 |
| 4.1.1 材料 | 第75页 |
| 4.1.2 试剂 | 第75页 |
| 4.1.3 RNA提取 | 第75页 |
| 4.1.4 候选内参的选择及引物设计 | 第75页 |
| 4.1.5 候选内参基因的反转录 | 第75-76页 |
| 4.1.6 候选内参的荧光定量及扩增效率检测 | 第76页 |
| 4.1.7 候选内参基因表达稳定性评价 | 第76页 |
| 4.1.8 内参基因的验证 | 第76页 |
| 4.2 试验结果与分析 | 第76-86页 |
| 4.2.1 候选内参基因引物特异性和PCR效率分析 | 第77-79页 |
| 4.2.2 候选内参基因表达水平的稳定性评价 | 第79-80页 |
| 4.2.3 geNorm结果分析 | 第80-81页 |
| 4.2.4 NormFinder结果分析 | 第81-82页 |
| 4.2.5 BestKeeper结果分析 | 第82页 |
| 4.2.6 RefFinder结果分析 | 第82-83页 |
| 4.2.7 候选内参基因的验证 | 第83-86页 |
| 4.3 讨论 | 第86-89页 |
| 4.3.1 百合体细胞胚发生中miRNA定量检测常用内参的稳定性 | 第86-87页 |
| 4.3.2 miRNA作为荧光定量内参基因的潜力 | 第87页 |
| 4.3.3 百合体细胞胚发生的最适内参基因 | 第87-89页 |
| 5. 百合体细胞胚发生中miRNA和靶基因的表达分析 | 第89-105页 |
| 5.1 材料与方法 | 第89-90页 |
| 5.1.1 材料 | 第89页 |
| 5.1.2 试剂 | 第89页 |
| 5.1.3 候选差异miRNA筛选 | 第89页 |
| 5.1.4 差异miRNA对应靶基因功能注释 | 第89页 |
| 5.1.5 差异表达miRNA和对应靶基因表达水平的qRT-PCR验证 | 第89-90页 |
| 5.2 结果与分析 | 第90-96页 |
| 5.2.1 差异表达miRNA的筛选 | 第90-91页 |
| 5.2.2 差异表达miRNA对应靶基因预测 | 第91-93页 |
| 5.2.3 细叶百合差异表达miRNA和对应靶基因的表达模式分析 | 第93-95页 |
| 5.2.4 兰州百合差异表达miRNA和对应靶基因的表达模式分析 | 第95-96页 |
| 5.3 讨论 | 第96-105页 |
| 5.3.1 百合体细胞胚发生中发育相关miRNA及其靶基因 | 第96-99页 |
| 5.3.2 百合体细胞胚发生中激素相关miRNA及其靶基因 | 第99-100页 |
| 5.3.3 百合体细胞胚发生中细胞壁相关miRNA及其靶基因 | 第100-101页 |
| 5.3.4 百合体细胞胚发生中其他相关差异miRNA及其靶基因 | 第101-102页 |
| 5.3.5 百合体细胞胚发生相关差异miRNA的研究潜力 | 第102-105页 |
| 全文结论 | 第105-106页 |
| 主要创新点 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-122页 |
| 附录 | 第122-127页 |
| 致谢 | 第127-128页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第128-129页 |
