| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略词表 | 第8-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-18页 |
| 1.1 中药荜拔的用途和化学成分 | 第13页 |
| 1.2 荜拔酰胺的发现和药理活性机制 | 第13-16页 |
| 1.2.1 抗肿瘤活性及其机制 | 第14-15页 |
| 1.2.2 抗血小板形成 | 第15页 |
| 1.2.3 抑制糖尿症并发症的形成 | 第15页 |
| 1.2.4 抗焦虑、抑郁和镇痛活性 | 第15-16页 |
| 1.2.5 抗真菌活性 | 第16页 |
| 1.3 药物体外活性评价研究方法概述 | 第16页 |
| 1.4 药物作用机制研究方法概述 | 第16-17页 |
| 1.5 细胞死亡方式概述 | 第17页 |
| 1.6 课题研究及其意义 | 第17-18页 |
| 第二章 荜拔酰胺及其衍生物体外抗肿瘤活性评价 | 第18-23页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 化合物，细胞株及其来源 | 第18页 |
| 2.1.2 实验中常用试剂的配备 | 第18-19页 |
| 2.2 细胞培养 | 第19-20页 |
| 2.3 MTT法测细胞的半数抑制浓度 | 第20页 |
| 2.4 统计分析结果与讨论 | 第20-22页 |
| 2.5 小结 | 第22-23页 |
| 第三章 PL-C21对SK-N-SH细胞的增殖抑制的研究 | 第23-29页 |
| 3.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 3.1.1 化合物、细胞株 | 第23页 |
| 3.1.2 主要试剂的配制 | 第23-24页 |
| 3.2 实验方法 | 第24-26页 |
| 3.2.1 NAC预处理 | 第24页 |
| 3.2.2 DAPI染色 | 第24页 |
| 3.2.3 细胞培养 | 第24页 |
| 3.2.4 PL-C21对细胞增殖抑制时间浓度依赖试验 | 第24-25页 |
| 3.2.5 PL-C21及加入ROS抑制剂后对抑制率影响试验 | 第25页 |
| 3.2.6 DAPI染色试验 | 第25-26页 |
| 3.3 结果分析和讨论 | 第26-28页 |
| 3.3.1 MTT染色法检测PL-C21对细胞增殖抑制作用影响 | 第26页 |
| 3.3.2 ROS抑制剂阻断PL-C21对SK-N-SH的增殖抑制 | 第26-27页 |
| 3.3.3 DAPI染色检测PL-C21对细胞核形态的影响 | 第27-28页 |
| 3.4 小节 | 第28-29页 |
| 第四章 PL-C21对细胞周期、凋亡和线粒体膜电位的影响 | 第29-38页 |
| 4.1 实验材料和试剂 | 第29页 |
| 4.1.1 化合物、细胞株 | 第29页 |
| 4.1.2 主要试剂配制 | 第29页 |
| 4.2 实验方法 | 第29-32页 |
| 4.2.1 流式细胞术检测细胞内ROS实验 | 第29-30页 |
| 4.2.2 流式细胞术检测细胞凋亡实验 | 第30页 |
| 4.2.3 流式细胞术检测细胞周期实验 | 第30-31页 |
| 4.2.4 流式细胞术检测细胞线粒体膜电位实验 | 第31页 |
| 4.2.5 荧光显微镜检测细胞内ROS实验 | 第31-32页 |
| 4.3 实验结果分析与讨论 | 第32-37页 |
| 4.3.1 流式细胞术检测细胞内ROS实验结果 | 第32页 |
| 4.3.2 流式细胞术检测细胞凋亡实验结果 | 第32-33页 |
| 4.3.3 流式细胞术检测细胞周期实验结果 | 第33-34页 |
| 4.3.4 流式细胞术检测细胞线粒体膜电位水平实验结果 | 第34-36页 |
| 4.3.5 荧光显微镜检测细胞内ROS实验结果 | 第36-37页 |
| 4.4 小结 | 第37-38页 |
| 第五章 PL-C21对线粒体和MAPK信号通路的影响 | 第38-52页 |
| 5.1 实验材料和试剂 | 第38-39页 |
| 5.1.1 化合物及细胞株 | 第38页 |
| 5.1.2 实验中常用试剂的配备 | 第38-39页 |
| 5.2 实验方法 | 第39-41页 |
| 5.2.1 蛋白质免疫印迹实验（Western Blot） | 第39页 |
| 5.2.2 蛋白样品制备 | 第39页 |
| 5.2.3 BCA蛋白定量 | 第39-40页 |
| 5.2.4 蛋白变性 | 第40页 |
| 5.2.5 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第40页 |
| 5.2.6 转膜 | 第40-41页 |
| 5.2.7 丽春红染色实验 | 第41页 |
| 5.2.8 牛奶封闭 | 第41页 |
| 5.2.9 蛋白质免疫杂交 | 第41页 |
| 5.2.10 凝胶成像 | 第41页 |
| 5.3 统计结果分析与讨论 | 第41-50页 |
| 5.3.1 线粒体信号通路与细胞凋亡 | 第41-45页 |
| 5.3.2 MAPK信号通路与细胞凋亡 | 第45-48页 |
| 5.3.3 p38 MAPK信号通路与ROS的产生 | 第48-50页 |
| 5.4 小结 | 第50-52页 |
| 第六章 总结及展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 个人简历 | 第59-60页 |
| 附录A 化合物编号及其结构 | 第60-62页 |
| 附录B 活性氧与癌症治疗 | 第62-64页 |
| B.1 细胞内活性氧的来源及其作用 | 第62页 |
| B.1.1 线粒体与活性氧 | 第62页 |
| B.1.2 内质网与活性氧 | 第62页 |
| B.1.3 溶酶体与活性氧 | 第62页 |
| B.1.4 质膜与活性氧 | 第62页 |
| B.2 细胞内氧化还原调节 | 第62-63页 |
| B.3 癌细胞的氧化应激 | 第63页 |
| B.4 活性氧在癌症治疗中的作用 | 第63-64页 |
| 附录C 主要试剂及设备 | 第64-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
