中文摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第13-31页 |
1.1 引言 | 第13页 |
1.2 纳米银的生物医学应用 | 第13-18页 |
1.2.1 纳米银用于光学成像 | 第13-14页 |
1.2.2 纳米银用于微生物感染 | 第14-17页 |
1.2.3 纳米银的抗肿瘤作用 | 第17-18页 |
1.3 纳米材料与自噬相关研究进展 | 第18-24页 |
1.3.1 自噬 | 第18-21页 |
1.3.2 自噬与肿瘤 | 第21-22页 |
1.3.3 纳米材料与自噬 | 第22-24页 |
1.4 金属纳米材料的放射增敏作用研究进展 | 第24-29页 |
1.4.1 金纳米材料的放射增敏作用 | 第25-27页 |
1.4.2 银纳米材料的放射增敏作用 | 第27-28页 |
1.4.3 其他金属纳米材料的放射增敏作用 | 第28-29页 |
1.5 本文的主要工作 | 第29-31页 |
第二章 纳米银的制备、表征及细胞毒性研究 | 第31-45页 |
2.1 引言 | 第31-32页 |
2.2 实验部分 | 第32-35页 |
2.2.1 主要实验材料及仪器 | 第32-33页 |
2.2.2 电化学法合成纳米银及表征 | 第33页 |
2.2.3 U251细胞的复苏、培养及冻存 | 第33-34页 |
2.2.4 透射电子显微镜(TEM)观察细胞中纳米银颗粒的定位 | 第34页 |
2.2.5 电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)检测U251细胞对纳米银的摄取 | 第34页 |
2.2.6 细胞活性测定 | 第34页 |
2.2.7 细胞内活性氧(ROS)水平测定 | 第34-35页 |
2.2.8 细胞线粒体膜电位(MMP)测定 | 第35页 |
2.2.9 数据分析 | 第35页 |
2.3 结果与讨论 | 第35-43页 |
2.3.1 纳米银的制备及表征 | 第35-38页 |
2.3.2 纳米银在细胞内的定位 | 第38-39页 |
2.3.3 U251细胞对纳米银摄取 | 第39-40页 |
2.3.4 纳米银对U251细胞活性的影响 | 第40页 |
2.3.5 纳米银导致U251中ROS水平升高 | 第40-41页 |
2.3.6 纳米银对U251细胞线粒体膜电位的影响 | 第41-42页 |
2.3.7 ROS与纳米银细胞毒性的关系 | 第42-43页 |
2.4 本章小结 | 第43-45页 |
第三章 纳米银诱导U251细胞自噬 | 第45-53页 |
3.1 引言 | 第45页 |
3.2 实验部分 | 第45-49页 |
3.2.1 主要实验材料及仪器 | 第45-47页 |
3.2.2 透射电镜观察自噬体 | 第47页 |
3.2.3 免疫印记实验检测LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转化及P62的降解 | 第47-48页 |
3.2.4 Cyto-ID细胞自噬检测试剂盒染色 | 第48页 |
3.2.5 流式检测U251细胞自噬水平 | 第48页 |
3.2.6 LysoTracker Red染色 | 第48-49页 |
3.3 结果与讨论 | 第49-52页 |
3.3.1 透射电镜观察自噬体 | 第49页 |
3.3.2 Cyto-ID染料检测自噬体形成 | 第49-50页 |
3.3.3 免疫印迹实验检测LC3的转化及P62的降解 | 第50-51页 |
3.3.4 流式检测自噬水平 | 第51页 |
3.3.5 自噬溶酶体的形成检测 | 第51-52页 |
3.4 本章小结 | 第52-53页 |
第四章 纳米银的放射增敏作用及相关机制研究 | 第53-67页 |
4.1 引言 | 第53页 |
4.2 实验部分 | 第53-57页 |
4.2.1 主要实验材料及仪器 | 第54-55页 |
4.2.2 X射线放射处理 | 第55页 |
4.2.3 X射线照射后平板克隆形成实验 | 第55-56页 |
4.2.4 激光共聚焦显微镜观察自噬 | 第56页 |
4.2.5 流式检测U251细胞自噬水平 | 第56页 |
4.2.6 细胞凋亡检测 | 第56页 |
4.2.7 免疫印迹实验检测自噬水平 | 第56-57页 |
4.2.8 细胞死亡检测 | 第57页 |
4.3 结果与讨论 | 第57-66页 |
4.3.1 纳米银的放射增敏作用 | 第57-58页 |
4.3.2 自噬在纳米银的放射增敏过程中起保护作用且依赖ERK、JNK信号通路 | 第58-62页 |
4.3.3 纳米银及放疗联合/单独作用引起U251细胞自噬与ROS生成有关 | 第62-64页 |
4.3.4 纳米银的放射增敏与ROS生成有关 | 第64-65页 |
4.3.5 抑制自噬提高纳米银放射增敏性的实质是增加ROS生成 | 第65-66页 |
4.4 本章小结 | 第66-67页 |
第五章 总结与展望 | 第67-69页 |
5.1 论文总结 | 第67-68页 |
5.2 论文展望 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-91页 |
攻读博士期间获得的学术成果 | 第91-93页 |
致谢 | 第93-94页 |