| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| 1.1 种子活力及其形成、保持和丧失 | 第11-12页 |
| 1.2 影响种子活力的因素 | 第12-15页 |
| 1.2.1 水分对种子活力的影响 | 第12-13页 |
| 1.2.2 贮藏物质对种子活力的影响 | 第13-14页 |
| 1.2.2.1 淀粉对种子活力的影响 | 第13页 |
| 1.2.2.2 蛋白质对种子活力的影响 | 第13-14页 |
| 1.2.3 激素对种子活力的影响 | 第14页 |
| 1.2.4 植物不同生长条件对种子活力的影响 | 第14-15页 |
| 1.3 种子活力在不同部位上的差异 | 第15页 |
| 1.4 蛋白质磷酸化修饰在植物中的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.4.1 植物蛋白质磷酸化修饰的作用机理 | 第15-16页 |
| 1.4.2 蛋白质磷酸化修饰在植物的不同组织器官、不同个体发育、不同生理状态中存在差异 | 第16页 |
| 1.4.3 种子萌发过程中的蛋白磷酸化 | 第16-17页 |
| 1.4.4 蛋白磷酸化检测技术 | 第17-18页 |
| 1.4.4.1 Western blot | 第17页 |
| 1.4.4.2 荧光染色法 | 第17-18页 |
| 1.4.4.3 流式细胞技术 | 第18页 |
| 1.4.4.4 质谱分析法 | 第18页 |
| 1.5 目的意义 | 第18-19页 |
| 2 试验材料与方法 | 第19-31页 |
| 2.1 试验材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 化学试剂及试剂盒 | 第19页 |
| 2.1.3 常用溶液、试剂配制方法 | 第19-20页 |
| 2.1.4 PCR引物 | 第20-21页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第21页 |
| 2.2 试验方法 | 第21-31页 |
| 2.2.1 玉米果穗上、中部位种子总蛋白磷酸化水平检测 | 第21-26页 |
| 2.2.1.1 总蛋白的提取及含量测定 | 第21-22页 |
| 2.2.1.2 蛋白SDS-PAGE单向电泳 | 第22-23页 |
| 2.2.1.3 蛋白酪氨酸磷酸化的Western blot | 第23-24页 |
| 2.2.1.4 蛋白质组学分析 | 第24-26页 |
| 2.2.2 玉米酪氨酸蛋白激酶基因GRMZM2G076423的生物信息学分析 | 第26-27页 |
| 2.2.3 玉米酪氨酸蛋白激酶基因GRMZM2G076423表达模式分析 | 第27-30页 |
| 2.2.3.1 郑58玉米自交系种子处理 | 第27页 |
| 2.2.3.2 郑58玉米自交系幼苗的培养及非生物胁迫 | 第27页 |
| 2.2.3.3 RNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.2.3.4 RNA浓度、纯度及完整性检测 | 第28页 |
| 2.2.3.5 反转录合成cDNA第一链 | 第28-29页 |
| 2.2.3.6 荧光定量PCR反应 | 第29-30页 |
| 2.2.4 野生型和GRMZM2G076423基因 5，端的Mu转座子插入突变体的活力测定 | 第30-31页 |
| 2.2.4.1 突变体的筛选 | 第30-31页 |
| 2.2.4.2 野生型和突变体种子中GRMZM2G076423的表达量比较 | 第31页 |
| 2.2.4.3 野生型和突变体种子磷酸化蛋白表达量分析 | 第31页 |
| 2.2.4.4 野生型和突变体种子活力的比较 | 第31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-41页 |
| 3.1 玉米果穗上、中部位种子总蛋白酪氨酸磷酸化水平检测 | 第31-32页 |
| 3.1.1 蛋白酪氨酸磷酸化的Western blot分析 | 第31页 |
| 3.1.2 酪氨酸磷酸化蛋白表达量差异的质谱分析 | 第31-32页 |
| 3.2 玉米酪氨酸蛋白激酶基因GRMZM2G076423的生物信息学分析 | 第32-35页 |
| 3.2.1 启动子序列分析和顺式作用元件预测 | 第32-33页 |
| 3.2.2 玉米酪氨酸蛋白激酶基因GRMZM2G076423一级结构预测 | 第33-35页 |
| 3.2.3 系统进化树分析 | 第35页 |
| 3.3 玉米酪氨酸蛋白激酶基因GRMZM2G076423的表达模式分析 | 第35-39页 |
| 3.3.1 引物特异性检测 | 第35-36页 |
| 3.3.2 玉米酪氨酸蛋白激酶基因GRMZM2G076423的表达模式 | 第36-39页 |
| 3.3.2.1 GRMZM2G076423在玉米果穗不同部位的表达情况 | 第38页 |
| 3.3.2.2 GRMZM2G076423在不同组织的表达情况 | 第38页 |
| 3.3.2.3 GRMZM2G076423在不同发育时期种子的表达情况 | 第38页 |
| 3.3.2.4 GRMZM2G076423在种子吸胀不同时间的表达情况 | 第38页 |
| 3.3.2.5 GRMZM2G076423在盐处理下的表达情况 | 第38页 |
| 3.3.2.6 GRMZM2G076423在干旱处理下的表达情况 | 第38-39页 |
| 3.4 野生型和GRMZM2G076423基因 5，端的Mu转座子插入突变体的比较 | 第39-41页 |
| 3.4.1 突变体的筛选 | 第39页 |
| 3.4.2 野生型和突变体种子活力的测定 | 第39-40页 |
| 3.4.3 野生型和突变体中GRMZM2G076423的表达情况分析 | 第40页 |
| 3.4.4 野生型和突变体蛋白酪氨酸磷酸化水平检测 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 4.1 玉米酪氨酸蛋白激酶基因GRMZM2G076423的功能研究 | 第41-42页 |
| 4.2 种子萌发中的蛋白磷酸化 | 第42-43页 |
| 4.3 葡萄糖磷酸变位酶在种子萌发早期的作用 | 第43页 |
| 5 结论 | 第43-45页 |
| 5.1 蛋白酪氨酸磷酸化的Western blot分析 | 第43-44页 |
| 5.2 磷酸化蛋白表达量差异分析 | 第44页 |
| 5.3 玉米酪氨酸蛋白激酶基因GRMZM2G076423的生物信息学分析 | 第44页 |
| 5.4 野生型和突变体种子活力的比较 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
