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双抗体夹心ELISA与免疫组化法在兔产气荚膜梭菌病诊断中的应用研究

中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第13-23页
    1.1 产气荚膜梭菌概述第13-17页
    1.2 产气荚膜梭菌病流行情况第17-18页
    1.3 α毒素研究进展第18-19页
    1.4 产气荚膜梭菌病的诊断方法第19-21页
    1.5 研究目的及意义第21-23页
2 材料和方法第23-31页
    2.1 材料第23-25页
        2.1.1 菌株和实验动物第23页
        2.1.2 培养基第23-24页
        2.1.3 主要试剂和材料第24-25页
        2.1.4 主要实验仪器第25页
    2.2 毒素的提取纯化及含量测定第25-26页
        2.2.1 产气荚膜梭菌α毒素的制备第25-26页
        2.2.2 过饱和硫酸铵盐析第26页
        2.2.3 精提第26页
        2.2.4 分离纯化第26页
        2.2.5 浓缩第26页
    2.3 剖检与组织病理学检查第26-27页
    2.4 细菌分离培养第27页
    2.5 多重PCR鉴定第27-28页
    2.6 DAS-ELISA方法的研究及应用第28-30页
        2.6.1 最佳稀释条件的确定第28页
        2.6.2 基本步骤第28-29页
        2.6.3 DAS-ELISA方法的判定标准第29页
        2.6.4 特异性实验第29页
        2.6.5 重复性试验第29页
        2.6.6 灵敏性试验第29-30页
        2.6.7 标准曲线的建立第30页
        2.6.8 临床应用第30页
    2.7 免疫组化法第30-31页
        2.7.1 样品的采集第30页
        2.7.2 免疫组化基本步骤第30-31页
3 结果与分析第31-42页
    3.1 病兔临床病症及剖检结果第31-32页
    3.2 病兔的组织病理学检查结果第32-33页
    3.3 镜检结果第33-34页
    3.4 多重PCR检测结果第34页
    3.5 DAS-ELISA方法结果第34-38页
        3.5.1 毒素蛋白浓度确定第34-35页
        3.5.2 DAS-ELISA方法最佳条件的确定第35页
        3.5.3 结果判定第35页
        3.5.4 DAS-ELISA方法的特异性结果第35页
        3.5.5 重复性试验结果第35-36页
        3.5.6 灵敏性试验结果第36页
        3.5.7 标准曲线的建立第36-37页
        3.5.8 临床应用第37-38页
    3.6 免疫组化结果第38-41页
        3.6.1 免疫组化诊断结果第38-40页
        3.6.2 免疫组化检测α毒素分布结果第40-41页
    3.7 三种主要方法检测α毒素结果第41-42页
4 讨论第42-45页
    4.1 细菌分离鉴定对产气荚膜梭菌的检测第42页
    4.2 DAS-ELISA方法的研究和应用第42-43页
    4.3 免疫组化法检测产气荚膜梭菌α毒素在病兔组织中的分布第43-44页
    4.4 几种方法对疑似产气荚膜梭菌病兔的诊断第44-45页
5 结论第45-46页
6 参考文献第46-52页
7 附录第52-58页
8 致谢第58-59页
9 攻读学位期间发表论文情况第59页

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