| 致谢 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 常用缩略词 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-23页 |
| 1 PRRSV的分子生物学特征 | 第12-16页 |
| 1.1 PRRSV的分类地位和基本理化特性 | 第12页 |
| 1.2 PRRSV的基因组结构 | 第12-13页 |
| 1.3 PRRSV的病毒蛋白和功能 | 第13-16页 |
| 2 PRRSV的致病机制研究进展 | 第16-19页 |
| 2.1 PRRSV对巨噬细胞的亲嗜性 | 第16页 |
| 2.2 持续性感染 | 第16-17页 |
| 2.3 免疫逃逸 | 第17-18页 |
| 2.4 抗体依赖性增强作用(ADE) | 第18-19页 |
| 3 PRRSV感染诱导的特异性免疫反应 | 第19-21页 |
| 3.1 体液免疫 | 第19-20页 |
| 3.2 细胞免疫 | 第20-21页 |
| 4 GP5蛋白诱导的体液免疫 | 第21-22页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 试验一 PRRSV GP5结构蛋白的截短原核表达 | 第23-43页 |
| 1 材料 | 第23-27页 |
| 1.1 细胞、菌株、血清与质粒载体 | 第23页 |
| 1.2 主要仪器 | 第23-24页 |
| 1.3 主要试剂及配制 | 第24-27页 |
| 2 方法 | 第27-36页 |
| 2.1 Marc-145 细胞的培养 | 第27页 |
| 2.2 PRRSV病毒的增殖 | 第27页 |
| 2.3 PRRSV ORF5基因的扩增、克隆与鉴定 | 第27-31页 |
| 2.4 重组原核表达载体的构建和鉴定 | 第31-35页 |
| 2.5 重组蛋白的诱导表达、纯化及鉴定 | 第35-36页 |
| 3 结果 | 第36-41页 |
| 3.1 PRRSV ORF5基因扩增结果 | 第36-37页 |
| 3.2 缺失跨膜区和信号肽的ORF5基因片段的扩增结果 | 第37页 |
| 3.3 重组原核表达质粒的酶切鉴定结果 | 第37-38页 |
| 3.4 重组蛋白的诱导表达、纯化及鉴定结果 | 第38-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 试验二 PRRSV GP5全长蛋白和截短蛋白的真核表达 | 第43-60页 |
| 1 材料 | 第43-44页 |
| 1.1 质粒和菌株 | 第43页 |
| 1.2 细胞和培养基 | 第43页 |
| 1.3 抗体 | 第43页 |
| 1.4 主要试剂和溶液的配制 | 第43-44页 |
| 2 方法 | 第44-52页 |
| 2.1 重组供体质粒的构建与鉴定 | 第44-47页 |
| 2.2 重组Bacmid穿梭质粒的构建与鉴定 | 第47-49页 |
| 2.3 重组杆状病毒的拯救与增殖 | 第49-51页 |
| 2.4 重组蛋白在SF9细胞中的表达及纯化 | 第51-52页 |
| 3 结果 | 第52-58页 |
| 3.1 目的基因的扩增结果 | 第52-53页 |
| 3.2 重组供体质粒的酶切鉴定结果 | 第53页 |
| 3.3 重组Bacmid穿梭质粒的PCR鉴定结果 | 第53-54页 |
| 3.4 重组杆状病毒的拯救结果 | 第54-55页 |
| 3.5 表达产物的SDS-PAGE和Western blot分析结果 | 第55-57页 |
| 3.6 重组蛋白的纯化结果 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 试验三 抗GP5蛋白抗体在PAM细胞上中和活性的分析 | 第60-70页 |
| 1 材料 | 第60-61页 |
| 1.1 细胞株、毒株与血清 | 第60页 |
| 1.2 试验动物 | 第60页 |
| 1.3 免疫原 | 第60页 |
| 1.4 主要试剂和溶液的配制 | 第60-61页 |
| 1.5 主要仪器 | 第61页 |
| 2 方法 | 第61-63页 |
| 2.1 重组蛋白抗血清的制备 | 第61-62页 |
| 2.2 PRRSV病毒的增殖与TCID50的测定 | 第62页 |
| 2.3 PAM细胞的制备 | 第62页 |
| 2.4 抗血清的中和活性检测 | 第62-63页 |
| 3 结果 | 第63-66页 |
| 3.1 抗GP5重组蛋白血清的ELISA效价测定结果 | 第63-65页 |
| 3.2 PRRSV病毒的TCID50测定结果 | 第65页 |
| 3.3 抗血清中和PRRSV活性的检测结果 | 第65-66页 |
| 4 讨论 | 第66-70页 |
| 全文总结 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-82页 |
| ABSTRACT | 第82-83页 |
