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新城疫病毒感染树突状细胞及DF1细胞入胞途径研究

摘要第6-7页
abstract第7-8页
英文缩略表第12-13页
第一章 概述第13-20页
    1.1 新城疫病毒的概述第13-14页
    1.2 树突状细胞的内吞途径及其抗原递呈方式第14-15页
    1.3 细胞内吞方式的概述第15-18页
        1.3.1 网格蛋白介导的内吞途径(CME)第15-16页
        1.3.2 小窝蛋白介导的内吞途径(CavME)第16页
        1.3.3 巨胞饮(macropinocytosis)第16-17页
        1.3.4 调节巨胞饮途径的相关分子第17-18页
    1.4 巨胞饮体的闭合、运输和成熟第18-19页
    1.5 总结第19-20页
第二章 NDV通过网格蛋白介导的内吞途径感染细胞第20-33页
    2.1 实验材料第20-21页
        2.1.1 病毒和细胞第20页
        2.1.2 主要试剂第20-21页
        2.1.3 主要仪器第21页
    2.2 实验方法第21-23页
        2.2.1 骨髓源树突状细胞的制备及体外培养第21页
        2.2.2 NDV感染细胞实验第21页
        2.2.3 细胞样品的收集第21页
        2.2.4 蛋白免疫印迹(Western Blot)第21-22页
        2.2.5 间接免疫荧光(IFA)第22页
        2.2.6 siRNA的设计与合成第22页
        2.2.7 TCID50测定第22页
        2.2.8 药物细胞毒性的检测第22-23页
        2.2.9 CPZ、MβCD和Dynasore药物抑制实验第23页
        2.2.10 Tf和CTxB的入胞检测实验第23页
        2.2.11 siRNA干扰及功能验证第23页
    2.3 实验结果第23-31页
        2.3.1 NDV能够感染DF1细胞和DCs并进行复制第23-26页
        2.3.2 NDV通过网格蛋白介导的内吞途径感染细胞第26-28页
        2.3.3 NDV感染细胞是依赖dynamin而不依赖胆固醇第28-31页
    2.4 讨论第31-33页
第三章 NDV通过巨胞饮途径感染细胞第33-39页
    3.1 实验材料第33-34页
        3.1.1 病毒和细胞第33页
        3.1.2 主要试剂第33-34页
        3.1.3 主要仪器第34页
    3.2 实验方法第34页
        3.2.1 Jasplakinolide、Cyto D和EIPA药物抑制实验第34页
        3.2.2 Dextran的入胞检测实验第34页
        3.2.3 蛋白免疫印迹(Western Blot)第34页
        3.2.4 间接免疫荧光实验(IFA)第34页
    3.3 实验结果第34-38页
        3.3.1 NDV感染DF1细胞的过程中发生的actin的重排第34-36页
        3.3.2 NDV通过激活NHE产生巨胞饮作用第36-37页
        3.3.3 NDV利用巨胞饮途径进入DCs第37-38页
    3.4 讨论第38-39页
第四章 NDV感染细胞后激活PKC和RAC1-PAK信号通路第39-48页
    4.1 实验材料第39-40页
        4.1.1 病毒和细胞第39页
        4.1.2 主要试剂第39-40页
        4.1.3 主要仪器第40页
    4.2 实验方法第40-41页
        4.2.1 Rottlerin、PMA、wortmannin和Rac1 Inhibitor药物抑制实验第40页
        4.2.2 激活型Rac1的检测第40页
        4.2.3 蛋白免疫印迹(Western Blot)第40页
        4.2.4 间接免疫荧光(IFA)第40-41页
    4.3 实验结果第41-45页
        4.3.1 PKC和PI3K对NDV感染细胞的影响第41-43页
        4.3.2 NDV感染细胞后激活Rac1-Pak1信号通路第43-45页
    4.4 讨论第45-48页
第五章 巨胞饮体依赖RAB5A进行细胞内的运输第48-56页
    5.1 实验材料第48-49页
        5.1.1 病毒和细胞第48-49页
        5.1.2 主要试剂第49页
        5.1.3 主要仪器第49页
    5.2 实验方法第49-52页
        5.2.1 Rab5a、Rab7及其突变体的真核表达质粒的构建第49-51页
        5.2.2 Rab5a、Rab7及其突变体的真核表达质粒的转染及其转染效率的鉴定第51页
        5.2.3 NH4CL和Baf A1药物抑制实验第51页
        5.2.4 蛋白免疫印迹(Western Blot)第51页
        5.2.5 间接免疫荧光(IFA)第51-52页
    5.3 实验结果第52-54页
        5.3.1 NDV感染细胞是pH依赖性的途径第52-53页
        5.3.2 Rab5a、Rab7及其突变体的真核表达质粒的构建第53页
        5.3.3 NDV感染DF1细胞后巨胞饮体通过依赖Rab5a的方式进入早期内体第53-54页
    5.4 讨论第54-56页
第六章 全文结论第56-57页
参考文献第57-63页
附录第63-64页
致谢第64-65页
作者简历第65页

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