摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 文献综述 | 第8-17页 |
1.1 前言 | 第8页 |
1.2 水稻病毒病及发病特点 | 第8-10页 |
1.3 水稻黑条矮缩病 | 第10-13页 |
1.3.1 水稻黑条矮缩病症状 | 第10页 |
1.3.2 水稻黑条矮缩病病原及其基因组结构 | 第10-11页 |
1.3.3 病毒传播介体及侵染循环特征 | 第11-12页 |
1.3.4 病害流行因素及防治方法 | 第12-13页 |
1.4 水稻黑条矮缩病抗性遗传研究 | 第13-14页 |
1.4.1 水稻黑条矮缩病抗性鉴定 | 第13页 |
1.4.2 品种抗性分析 | 第13页 |
1.4.3 品种抗性遗传 | 第13-14页 |
1.5 RNA干扰技术 | 第14-17页 |
1.5.1 RNA干扰技术原理 | 第14-15页 |
1.5.2 RNA干扰技术特点 | 第15页 |
1.5.3 RNA干扰技术优势 | 第15-16页 |
1.5.4 RNA干涉水稻病毒基因研究 | 第16-17页 |
第二章 材料与方法 | 第17-25页 |
2.1 实验材料 | 第17页 |
2.1.1 转基因受体材料 | 第17页 |
2.1.2 菌种和质粒载体 | 第17页 |
2.1.3 主要试剂 | 第17页 |
2.2 实验方法 | 第17-25页 |
2.2.1 PMF-US6双T-DNA表达载体的构建 | 第17-18页 |
2.2.2 质粒DNA的提取及纯化 | 第18-19页 |
2.2.3 植株RNA的提取 | 第19页 |
2.2.4 水稻基因组总DNA的提取和PCR检测 | 第19-20页 |
2.2.5 Southern杂交 | 第20-22页 |
2.2.6 Northern杂交 | 第22-23页 |
2.2.7 外源基因插入点侧翼序列分离 | 第23页 |
2.2.8 抗黑条矮缩病自然鉴定 | 第23-24页 |
2.2.9 抗黑条矮缩病人工鉴定 | 第24-25页 |
第三章 结果与分析 | 第25-42页 |
3.1 双T-DNA植物表达载体的构建及转基因苗的获得 | 第25-27页 |
3.2 转基因株系中外源基因插入拷贝数分析 | 第27-29页 |
3.2.1 靶基因S6RNAi插入拷贝数分析 | 第27-28页 |
3.2.2 筛选标记基因HPT拷贝数分析 | 第28-29页 |
3.3 部分转基因株系中的小RNA表达分析 | 第29-30页 |
3.4 转基因株系的抗病性分析 | 第30-36页 |
3.4.1 2015年T_2代转基因混合系抗性鉴定 | 第31-32页 |
3.4.2 2016年转基因系抗性鉴定 | 第32-36页 |
3.5 转基因株系主要农艺表型分析 | 第36-39页 |
3.6 部分转基因株系的外源基因插入位置分析 | 第39-42页 |
第四章 讨论 | 第42-45页 |
4.1 无标记抗黑条矮缩病转基因植株的获得 | 第42-43页 |
4.2 抗黑条矮缩病转基育种新材料的创制 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-49页 |
致谢 | 第49-50页 |