中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
第一部分 结核分枝杆菌持续感染致T细胞功能障碍的研究 | 第11-38页 |
前言 | 第11-13页 |
1.1 材料与仪器 | 第13-15页 |
1.1.1 研究对象 | 第13-14页 |
1.1.2 实验材料 | 第14页 |
1.1.3 实验仪器 | 第14-15页 |
1.2 实验方法 | 第15-24页 |
1.2.1 ESAT6蛋白的表达与纯化 | 第15-17页 |
1.2.2 CFP10的表达与纯化 | 第17页 |
1.2.3 HspX蛋白的表达与纯化 | 第17-18页 |
1.2.4 ESAT6、HspX、CFP10蛋白质SDS-PAGE电泳 | 第18-20页 |
1.2.5 ESAT6、HspX和CFP10蛋白质浓度测定 | 第20-21页 |
1.2.6 完全细胞培养基的配制 | 第21页 |
1.2.7 分泌IFN-γ的单核淋巴细胞细胞数的检测 | 第21-23页 |
1.2.8 ELISA技术检测IL-2的分泌水平 | 第23-24页 |
1.3 实验结果 | 第24-34页 |
1.3.1 单个抗原ESAT6的表达和纯化的结果 | 第24页 |
1.3.2 单个抗原HspX的表达和纯化结果 | 第24-25页 |
1.3.3 单个抗原CFP10的表达和纯化结果 | 第25-26页 |
1.3.4 不同人群T细胞分泌IFN-γ水平的检测 | 第26-28页 |
1.3.5 不同人群的T淋巴细胞表面分子的表达情况 | 第28-31页 |
1.3.6 不同人群之间特异性T淋巴细胞增殖能力的比较 | 第31-33页 |
1.3.7 不同人群T淋巴细胞分泌IL-2的水平 | 第33-34页 |
1.4 讨论 | 第34-37页 |
1.5 结论 | 第37-38页 |
第二部分 融合蛋白AEMD和LT70的构建 | 第38-57页 |
前言 | 第38-39页 |
2.1 材料与仪器 | 第39-40页 |
2.1.1 实验材料 | 第39-40页 |
2.1.2 实验仪器 | 第40页 |
2.2 试验方法 | 第40-48页 |
2.2.1 融合蛋白Ag85B-ESAT6-Mtb8.4-RpFD(AEMD)的构建 | 第40-43页 |
2.2.2 利用氯化钙法制造大肠杆菌E.coli DH5α的感受态细胞 | 第43-44页 |
2.2.3 向DH5α感受态细胞中转化连接产物 | 第44页 |
2.2.4 融合蛋白ESAT6-Ag85B-MPT64_(190-198)-Mtb8.4-Rv2626c(LT70)的优化 | 第44-45页 |
2.2.5 融合蛋白Ag85B-ESAT6-Mtb8.4-RpFD和ESAT6-Ag85B-MPT64_(190-198)-Mtb8.4-Rv2626c的表达 | 第45-46页 |
2.2.6 SDS-PAGE蛋白电泳的方法及其相关试剂的配制 | 第46-48页 |
2.3 结果 | 第48-54页 |
2.3.1 重组质粒Ag85B-ESAT6-Mtb8.4-RpFD-pET30a(+)的构建 | 第48-51页 |
2.3.2 融合蛋白Ag85B-ESAT6-Mtb8.4-RpFD的表达 | 第51-52页 |
2.3.3 重组质粒ESAT6-Ag85B-MPT64_(190-198)-Mtb8.4-Rv2626c-pET30a(+)的优化 | 第52-53页 |
2.3.4 融合蛋白ESAT6-Ag85B-MPT64_(190-198)-Mtb8.4-Rv2626c的表达 | 第53-54页 |
2.4 讨论 | 第54-56页 |
2.5结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
攻读硕士学位期间发表的论文和成果 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |