| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| 1.1 对乙酰氨基酚诱导的肝毒性 | 第10页 |
| 1.2 外源线粒体对线粒体功能障碍疾病治疗作用的研究进展 | 第10-18页 |
| 1.2.1 外源线粒体向细胞内运送核酸 | 第11-12页 |
| 1.2.2 细胞摄取外源线粒体的机制 | 第12-13页 |
| 1.2.3 外源线粒体治疗线粒体功能障碍疾病模型 | 第13-18页 |
| 第二章 绪论 | 第18-20页 |
| 第三章 HepG2细胞摄取外源线粒体机制的初步分析 | 第20-30页 |
| 3.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 3.1.1 细胞 | 第20页 |
| 3.1.2 主要仪器和设备 | 第20页 |
| 3.1.3 试剂 | 第20-21页 |
| 3.1.4 溶液的配制 | 第21页 |
| 3.2 实验方法 | 第21-24页 |
| 3.2.1 细胞培养、传代与冻存 | 第21页 |
| 3.2.2 表达绿色荧光蛋白且含有线粒体靶向片段的质粒瞬时转染HepG2细胞的建立 | 第21-22页 |
| 3.2.3 荧光线粒体的制备 | 第22-23页 |
| 3.2.4 荧光线粒体进入HepG2细胞的观察 | 第23页 |
| 3.2.5 HepG2细胞摄取荧光线粒体的实时观测 | 第23页 |
| 3.2.6 外源荧光线粒体进入HepG2细胞的时间优化 | 第23页 |
| 3.2.7 HepG2细胞摄取机制的初步分析 | 第23-24页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第24-27页 |
| 3.3.1 荧光线粒体进入HepG2细胞的观察结果 | 第24-25页 |
| 3.3.2 HepG2细胞摄取荧光线粒体的动态过程 | 第25-26页 |
| 3.3.3 外源荧光线粒体进入HepG2细胞的时间优化结果 | 第26-27页 |
| 3.3.4 HepG2细胞摄取机制的初步分析 | 第27页 |
| 3.4 讨论 | 第27-30页 |
| 第四章 小鼠肝脏线粒体的提取与表征 | 第30-38页 |
| 4.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 4.1.1 动物 | 第30页 |
| 4.1.2 主要仪器和设备 | 第30-31页 |
| 4.1.3 试剂 | 第31页 |
| 4.1.4 溶液的配制 | 第31页 |
| 4.2 实验方法 | 第31-33页 |
| 4.2.1 小鼠肝脏线粒体的提取 | 第31-32页 |
| 4.2.2 线粒体染色与鉴定 | 第32页 |
| 4.2.3 线粒体蛋白浓度的测定 | 第32-33页 |
| 4.2.4 线粒体的直径表征 | 第33页 |
| 4.2.5 线粒体膜通透性和肿胀度的测定 | 第33页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第33-35页 |
| 4.3.1 线粒体染色与鉴定结果 | 第33-34页 |
| 4.3.2 线粒体的直径表征结果 | 第34-35页 |
| 4.3.3 线粒体膜通透性和肿胀度的测定结果 | 第35页 |
| 4.4 讨论 | 第35-38页 |
| 第五章 外源线粒体对APAP损伤的肝细胞的保护作用 | 第38-58页 |
| 5.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 5.1.1 细胞与动物 | 第38页 |
| 5.1.2 主要仪器和设备 | 第38-39页 |
| 5.1.3 试剂 | 第39页 |
| 5.1.4 溶液的配制 | 第39页 |
| 5.2 实验方法 | 第39-47页 |
| 5.2.1 细胞培养、传代与冻存 | 第39页 |
| 5.2.2 细胞生长曲线的绘制 | 第39-40页 |
| 5.2.3 细胞损伤模型的建立 | 第40-41页 |
| 5.2.4 细胞形态的观察 | 第41页 |
| 5.2.5 噻唑蓝法测定细胞相对活力 | 第41-42页 |
| 5.2.6 阿尔玛蓝法检测细胞氧分子相对消耗量 | 第42页 |
| 5.2.7 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第42-43页 |
| 5.2.8 细胞培养液中谷丙转氨酶和谷草转氨酶活力的检测 | 第43-45页 |
| 5.2.9 细胞中谷胱甘肽和三磷酸腺苷含量的检测 | 第45-46页 |
| 5.2.10 荧光显微镜和流式细胞仪检测线粒体膜电位 | 第46页 |
| 5.2.11 线粒体形态的观察 | 第46-47页 |
| 5.2.12 统计学分析 | 第47页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第47-55页 |
| 5.3.1 细胞生长曲线的绘制 | 第47-48页 |
| 5.3.2 细胞损伤模型的建立 | 第48页 |
| 5.3.3 细胞形态学的观察结果 | 第48-49页 |
| 5.3.4 细胞相对活力的测定结果 | 第49-50页 |
| 5.3.5 细胞氧分子相对消耗量的测定结果 | 第50页 |
| 5.3.6 细胞凋亡检测结果 | 第50-51页 |
| 5.3.7 细胞培养液中谷丙转氨酶和谷草转氨酶活力的测定结果 | 第51-52页 |
| 5.3.8 细胞中谷胱甘肽和三磷酸腺苷含量的测定结果 | 第52-53页 |
| 5.3.9 线粒体膜电位的检测结果 | 第53-55页 |
| 5.3.10 细胞的线粒体形态改变结果 | 第55页 |
| 5.4 讨论 | 第55-58页 |
| 第六章 总结与展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 缩略词表 | 第66-68页 |
| 附录 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第72页 |
