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酿酒酵母内三对负相关基因的实验研究

中文摘要第3-5页
英文摘要第5-6页
1 绪论第11-25页
    1.1 问题的提出及研究意义第11-12页
        1.1.1 问题的提出第11-12页
        1.1.2 研究意义第12页
    1.2 国内外研究现状第12-20页
        1.2.1 负相关模式第12-14页
        1.2.2 微小染色体维持蛋白(MCM)第14-17页
        1.2.3 核心组蛋白(Core Histone)第17-18页
        1.2.4 热休克蛋白第18-19页
        1.2.5 核糖体蛋白第19-20页
        1.2.6 淀粉及蔗糖代谢通路第20页
    1.3 本文研究的目的和研究内容第20-23页
        1.3.1 本文研究的目的第20-21页
        1.3.2 本文研究的内容第21-23页
    1.4 本文的创新点第23-25页
2 酵母细胞周期同步化处理第25-31页
    2.1 引言第25页
    2.2 材料与仪器第25-26页
        2.2.1 实验材料第25页
        2.2.2 主要仪器设备第25-26页
        2.2.3 主要试剂第26页
    2.3 实验方法和步骤第26-27页
        2.3.1 不连续密度梯度离心法第26页
        2.3.2 营养饥饿法第26-27页
        2.3.3 α 因子处理第27页
        2.3.4 羟基尿处理第27页
    2.4 结果与分析第27-29页
    2.5 本章小结第29-31页
3 酵母细胞周期内MCM与核心组蛋白基因的表达分析第31-59页
    3.1 引言第31页
    3.2 材料与仪器第31-32页
        3.2.1 实验材料第31页
        3.2.2 主要仪器设备第31-32页
        3.2.3 主要试剂第32页
    3.3 实验方法和步骤第32-37页
        3.3.1 引物的设计第32-34页
        3.3.2 内参基因PCR扩增条件的优化第34-35页
        3.3.3 酿酒酵母总RNA的提取第35-36页
        3.3.4 c DNA第一链的合成第36页
        3.3.5 q PCR反应第36页
        3.3.6 数据分析第36页
        3.3.7 两组基因功能富集分析第36-37页
    3.4 结果与分析第37-53页
        3.4.1 引物的设计第37页
        3.4.2 内参基因的稳定性分析第37-38页
        3.4.3 荧光定量q PCR退火温度的优化第38-39页
        3.4.4 总RNA质量检测第39页
        3.4.5 MCM及核心组蛋白基因的表达情况第39-40页
        3.4.6 两组基因功能富集分析第40-53页
    3.5 讨论第53-56页
        3.5.1 内参基因的选择第53-54页
        3.5.2 微小染色体维持蛋白及核心组蛋白q PCR第54页
        3.5.3 微小染色体维持蛋白及核心组蛋白功能富集分析第54页
        3.5.4 微小染色体维持蛋白及核心组蛋白形成负相关模式的原因第54-56页
    3.6 本章小结第56-59页
4 酵母细胞内核糖体蛋白与热休克蛋白基因的表达分析第59-73页
    4.1 引言第59页
    4.2 材料和仪器第59-60页
        4.2.1 实验材料第59页
        4.2.2 主要仪器设备第59-60页
        4.2.3 主要试剂第60页
    4.3 实验方法和步骤第60-63页
        4.3.1 引物的设计与合成第60-62页
        4.3.2 酿酒酵母总RNA的提取第62页
        4.3.3c DNA第一链的合成第62页
        4.3.4q PCR反应第62页
        4.3.5 两组基因功能富集分析第62-63页
    4.4 结果与分析第63-68页
        4.4.1 总RNA质量检测第63页
        4.4.2 核糖体蛋白与热休克蛋白基因的表达情况第63-64页
        4.4.3 核糖体蛋白与热休克蛋白功能富集分析第64-68页
    4.5 讨论第68-71页
        4.5.1 核糖体蛋白与热休克蛋白基因q PCR第68页
        4.5.2 核糖体蛋白与热休克蛋白基因功能富集分析第68-69页
        4.5.3 核糖体蛋白与热休克蛋白基因负相关的形成原因分析第69-71页
    4.6 本章小结第71-73页
5 酵母细胞内淀粉及蔗糖通路与嘌呤通路基因的表达分析第73-85页
    5.1 引言第73页
    5.2 材料和仪器第73-74页
        5.2.1 实验材料第73页
        5.2.2 主要仪器设备第73-74页
        5.2.3 主要试剂第74页
    5.3 实验方法和步骤第74-77页
        5.3.1 引物的设计与合成第74-76页
        5.3.2 酿酒酵母总RNA的提取第76页
        5.3.3c DNA第一链的合成第76页
        5.3.4q PCR反应第76页
        5.3.5 两组基因功能富集分析第76-77页
    5.4 结果与分析第77-81页
        5.4.1 总RNA质量检测第77页
        5.4.2 淀粉和蔗糖代谢通路基因和嘌呤代谢通路基因的表达情况第77-78页
        5.4.3 淀粉和蔗糖代谢通路基因及嘌呤代谢通路基因功能富集分析第78-81页
    5.5 讨论第81-84页
        5.5.1 淀粉和蔗糖代谢通路基因及嘌呤代谢通路基因q PCR第81-82页
        5.5.2 淀粉和蔗糖代谢通路基因及嘌呤代谢通路基因功能富集分析第82页
        5.5.3 淀粉和蔗糖代谢通路基因及嘌呤代谢通路基因负相关的形成原因分析第82-84页
    5.6 本章小结第84-85页
6 结论和展望第85-89页
    6.1 酿酒酵母细胞周期同步化第85页
    6.2 内参基因的选择及引物设计第85页
    6.3 三对“负相关基因”的表达情况第85-86页
    6.4 三对负相关基因的功能富集分析情况第86页
    6.5 MCM与Histone基因负相关模式形成原因第86页
    6.6 核糖体蛋白与热休克蛋白基因负相关模式形成原因第86-87页
    6.7 淀粉和蔗糖通路与嘌呤代谢通路基因负相关模式形成原因第87页
    6.8 后续工作的展望第87-89页
致谢第89-91页
参考文献第91-99页
附录第99页
    A作者在攻读学位期间发表的论文目录第99页

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