中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
1 绪论 | 第11-25页 |
1.1 问题的提出及研究意义 | 第11-12页 |
1.1.1 问题的提出 | 第11-12页 |
1.1.2 研究意义 | 第12页 |
1.2 国内外研究现状 | 第12-20页 |
1.2.1 负相关模式 | 第12-14页 |
1.2.2 微小染色体维持蛋白(MCM) | 第14-17页 |
1.2.3 核心组蛋白(Core Histone) | 第17-18页 |
1.2.4 热休克蛋白 | 第18-19页 |
1.2.5 核糖体蛋白 | 第19-20页 |
1.2.6 淀粉及蔗糖代谢通路 | 第20页 |
1.3 本文研究的目的和研究内容 | 第20-23页 |
1.3.1 本文研究的目的 | 第20-21页 |
1.3.2 本文研究的内容 | 第21-23页 |
1.4 本文的创新点 | 第23-25页 |
2 酵母细胞周期同步化处理 | 第25-31页 |
2.1 引言 | 第25页 |
2.2 材料与仪器 | 第25-26页 |
2.2.1 实验材料 | 第25页 |
2.2.2 主要仪器设备 | 第25-26页 |
2.2.3 主要试剂 | 第26页 |
2.3 实验方法和步骤 | 第26-27页 |
2.3.1 不连续密度梯度离心法 | 第26页 |
2.3.2 营养饥饿法 | 第26-27页 |
2.3.3 α 因子处理 | 第27页 |
2.3.4 羟基尿处理 | 第27页 |
2.4 结果与分析 | 第27-29页 |
2.5 本章小结 | 第29-31页 |
3 酵母细胞周期内MCM与核心组蛋白基因的表达分析 | 第31-59页 |
3.1 引言 | 第31页 |
3.2 材料与仪器 | 第31-32页 |
3.2.1 实验材料 | 第31页 |
3.2.2 主要仪器设备 | 第31-32页 |
3.2.3 主要试剂 | 第32页 |
3.3 实验方法和步骤 | 第32-37页 |
3.3.1 引物的设计 | 第32-34页 |
3.3.2 内参基因PCR扩增条件的优化 | 第34-35页 |
3.3.3 酿酒酵母总RNA的提取 | 第35-36页 |
3.3.4 c DNA第一链的合成 | 第36页 |
3.3.5 q PCR反应 | 第36页 |
3.3.6 数据分析 | 第36页 |
3.3.7 两组基因功能富集分析 | 第36-37页 |
3.4 结果与分析 | 第37-53页 |
3.4.1 引物的设计 | 第37页 |
3.4.2 内参基因的稳定性分析 | 第37-38页 |
3.4.3 荧光定量q PCR退火温度的优化 | 第38-39页 |
3.4.4 总RNA质量检测 | 第39页 |
3.4.5 MCM及核心组蛋白基因的表达情况 | 第39-40页 |
3.4.6 两组基因功能富集分析 | 第40-53页 |
3.5 讨论 | 第53-56页 |
3.5.1 内参基因的选择 | 第53-54页 |
3.5.2 微小染色体维持蛋白及核心组蛋白q PCR | 第54页 |
3.5.3 微小染色体维持蛋白及核心组蛋白功能富集分析 | 第54页 |
3.5.4 微小染色体维持蛋白及核心组蛋白形成负相关模式的原因 | 第54-56页 |
3.6 本章小结 | 第56-59页 |
4 酵母细胞内核糖体蛋白与热休克蛋白基因的表达分析 | 第59-73页 |
4.1 引言 | 第59页 |
4.2 材料和仪器 | 第59-60页 |
4.2.1 实验材料 | 第59页 |
4.2.2 主要仪器设备 | 第59-60页 |
4.2.3 主要试剂 | 第60页 |
4.3 实验方法和步骤 | 第60-63页 |
4.3.1 引物的设计与合成 | 第60-62页 |
4.3.2 酿酒酵母总RNA的提取 | 第62页 |
4.3.3c DNA第一链的合成 | 第62页 |
4.3.4q PCR反应 | 第62页 |
4.3.5 两组基因功能富集分析 | 第62-63页 |
4.4 结果与分析 | 第63-68页 |
4.4.1 总RNA质量检测 | 第63页 |
4.4.2 核糖体蛋白与热休克蛋白基因的表达情况 | 第63-64页 |
4.4.3 核糖体蛋白与热休克蛋白功能富集分析 | 第64-68页 |
4.5 讨论 | 第68-71页 |
4.5.1 核糖体蛋白与热休克蛋白基因q PCR | 第68页 |
4.5.2 核糖体蛋白与热休克蛋白基因功能富集分析 | 第68-69页 |
4.5.3 核糖体蛋白与热休克蛋白基因负相关的形成原因分析 | 第69-71页 |
4.6 本章小结 | 第71-73页 |
5 酵母细胞内淀粉及蔗糖通路与嘌呤通路基因的表达分析 | 第73-85页 |
5.1 引言 | 第73页 |
5.2 材料和仪器 | 第73-74页 |
5.2.1 实验材料 | 第73页 |
5.2.2 主要仪器设备 | 第73-74页 |
5.2.3 主要试剂 | 第74页 |
5.3 实验方法和步骤 | 第74-77页 |
5.3.1 引物的设计与合成 | 第74-76页 |
5.3.2 酿酒酵母总RNA的提取 | 第76页 |
5.3.3c DNA第一链的合成 | 第76页 |
5.3.4q PCR反应 | 第76页 |
5.3.5 两组基因功能富集分析 | 第76-77页 |
5.4 结果与分析 | 第77-81页 |
5.4.1 总RNA质量检测 | 第77页 |
5.4.2 淀粉和蔗糖代谢通路基因和嘌呤代谢通路基因的表达情况 | 第77-78页 |
5.4.3 淀粉和蔗糖代谢通路基因及嘌呤代谢通路基因功能富集分析 | 第78-81页 |
5.5 讨论 | 第81-84页 |
5.5.1 淀粉和蔗糖代谢通路基因及嘌呤代谢通路基因q PCR | 第81-82页 |
5.5.2 淀粉和蔗糖代谢通路基因及嘌呤代谢通路基因功能富集分析 | 第82页 |
5.5.3 淀粉和蔗糖代谢通路基因及嘌呤代谢通路基因负相关的形成原因分析 | 第82-84页 |
5.6 本章小结 | 第84-85页 |
6 结论和展望 | 第85-89页 |
6.1 酿酒酵母细胞周期同步化 | 第85页 |
6.2 内参基因的选择及引物设计 | 第85页 |
6.3 三对“负相关基因”的表达情况 | 第85-86页 |
6.4 三对负相关基因的功能富集分析情况 | 第86页 |
6.5 MCM与Histone基因负相关模式形成原因 | 第86页 |
6.6 核糖体蛋白与热休克蛋白基因负相关模式形成原因 | 第86-87页 |
6.7 淀粉和蔗糖通路与嘌呤代谢通路基因负相关模式形成原因 | 第87页 |
6.8 后续工作的展望 | 第87-89页 |
致谢 | 第89-91页 |
参考文献 | 第91-99页 |
附录 | 第99页 |
A作者在攻读学位期间发表的论文目录 | 第99页 |