| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-39页 |
| 1.1 植物病毒及其危害 | 第14-15页 |
| 1.2 我国主要的烟草病毒病及分子生物学特性 | 第15-21页 |
| 1.2.1 烟草普通花叶病毒（Tobacco mosaic virus, TMV) | 第15-16页 |
| 1.2.2 黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus, CMV) | 第16-18页 |
| 1.2.3 烟草蚀纹病毒（Tobacco etch virus, TEV) | 第18-20页 |
| 1.2.4 烟草马铃薯Y病毒（Potato virus Y, PVY) | 第20-21页 |
| 1.3 植物病毒的检测技术 | 第21-30页 |
| 1.3.1 生物学方法 | 第21-22页 |
| 1.3.2 血清学检测技术 | 第22页 |
| 1.3.3 电镜技术 | 第22-23页 |
| 1.3.4 分子生物学检测技术 | 第23-29页 |
| 1.3.5 其他检测方法 | 第29-30页 |
| 1.4 植物RNA病毒的分子变异 | 第30-33页 |
| 1.4.1 突变 | 第30-31页 |
| 1.4.2 重组 | 第31-32页 |
| 1.4.3 分子重排 | 第32-33页 |
| 1.4.4 病毒RNA的缺失及缺失干扰 | 第33页 |
| 1.5 植物源病毒抑制物质的研究进展 | 第33-37页 |
| 1.5.1 植物源抗病毒活性物质 | 第34-36页 |
| 1.5.2 植物源抗病毒物质作用机理 | 第36-37页 |
| 1.6 本项目研究的目的与意义 | 第37-39页 |
| 第二章 烟草主要病毒的发生 | 第39-52页 |
| 前言 | 第39页 |
| 2.1 材料与方法 | 第39-45页 |
| 2.1.1 田间调查与样品采集 | 第39-40页 |
| 2.1.2 引物设计 | 第40页 |
| 2.1.3 血清学检测样品 | 第40-41页 |
| 2.1.4 提取样品总RNA | 第41-42页 |
| 2.1.5 反转录扩增 | 第42-43页 |
| 2.1.6 PCR分别扩增四种烟草病毒的外壳蛋白 | 第43页 |
| 2.1.7 四种烟草病毒的外壳蛋白基因序列测定 | 第43-45页 |
| 2.2 结果与分析 | 第45-50页 |
| 2.2.1 田间感病烟草的症状表现 | 第45页 |
| 2.2.2 烟草主要病毒的发生与分布 | 第45-46页 |
| 2.2.3 TMV的发生与分布 | 第46-47页 |
| 2.2.4 CMV的发生与分布 | 第47-48页 |
| 2.2.5 TEV的发生与分布 | 第48-49页 |
| 2.2.6 PVY的发生与分布 | 第49页 |
| 2.2.7 烟草病毒在田间的侵染形式 | 第49-50页 |
| 2.3 讨论 | 第50-51页 |
| 2.4 小结 | 第51-52页 |
| 第三章 烟草四种主要病毒的分子变异 | 第52-81页 |
| 前言 | 第52页 |
| 3.1 材料与方法 | 第52-54页 |
| 3.1.1 样品采集 | 第52页 |
| 3.1.2 RT-PCR | 第52-53页 |
| 3.1.3 外壳蛋白序列测定 | 第53页 |
| 3.1.4 外壳蛋白序列分析 | 第53页 |
| 3.1.5 多样性分析 | 第53页 |
| 3.1.6 重组分析 | 第53页 |
| 3.1.7 种群和选择压分析 | 第53-54页 |
| 3.2 结果与分析 | 第54-78页 |
| 3.2.1 四种烟草病毒分离物 | 第54-56页 |
| 3.2.2 序列一致性分析 | 第56-63页 |
| 3.2.3 系统发育树分析 | 第63-72页 |
| 3.2.4 重组分析 | 第72-74页 |
| 3.2.5 种群统计分析 | 第74-77页 |
| 3.2.6 选择压分析 | 第77-78页 |
| 3.3 讨论 | 第78-79页 |
| 3.4 小结 | 第79-81页 |
| 第四章 植物提取物WCT-II抗TMV活性分析 | 第81-92页 |
| 前言 | 第81页 |
| 4.1 材料与方法 | 第81-85页 |
| 4.1.1 供试药剂和植物材料 | 第81页 |
| 4.1.2 供试毒源 | 第81-82页 |
| 4.1.3 设计TMV特异引物 | 第82页 |
| 4.1.4 RNA提取 | 第82-83页 |
| 4.1.5 RT-PCR | 第83-84页 |
| 4.1.6 Real-time PCR | 第84页 |
| 4.1.7 WCT-II抗TMV活性 | 第84-85页 |
| 4.2 结果与分析 | 第85-90页 |
| 4.2.1 TMV特异的实时荧光定量PCR体系 | 第85-87页 |
| 4.2.2 WCT-II对TMV的钝化作用 | 第87-88页 |
| 4.2.3 半叶枯斑法测定WCT-II对TMV的防治作用 | 第88-89页 |
| 4.2.4 系统寄主上测定WCT-II对TMV的防治作用 | 第89-90页 |
| 4.3 讨论 | 第90-91页 |
| 4.4 小结 | 第91-92页 |
| 第五章 植物提取物WCT-II抗TMV机理初步研究 | 第92-106页 |
| 前言 | 第92页 |
| 5.1 材料与方法 | 第92-99页 |
| 5.1.1 供试材料 | 第92-93页 |
| 5.1.2 引物设计 | 第93页 |
| 5.1.3 SOD、PPO、POD活性测定 | 第93-96页 |
| 5.1.4 过氧化氢含量测定 | 第96-97页 |
| 5.1.5 烟草PR-1 基因表达量分析 | 第97-99页 |
| 5.2 结果与分析 | 第99-104页 |
| 5.2.1 WCT-II对SOD活性影响 | 第99-100页 |
| 5.2.2 WCT-II对POD活性影响 | 第100-101页 |
| 5.2.3 WCT-II对PPO活性影响 | 第101页 |
| 5.2.4 WCT-II对过氧化氢影响 | 第101-102页 |
| 5.2.5 烟草PR-1 基因特异的real-time PCR体系 | 第102-103页 |
| 5.2.6 WCT-II对PR-1 基因表达量影响 | 第103-104页 |
| 5.3 讨论 | 第104-105页 |
| 5.4 小结 | 第105-106页 |
| 第六章 结论和创新点 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-118页 |
| 附表 | 第118-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
| 作者简介 | 第125页 |
