摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第10-29页 |
1.1 L-酪氨酸研究现状 | 第10-11页 |
1.1.1 L-酪氨酸研究意义 | 第10页 |
1.1.2 L-酪氨酸制备方法 | 第10-11页 |
1.2 酪氨酸酚裂解酶概述 | 第11-18页 |
1.2.1 酪氨酸酚裂解酶来源 | 第11-12页 |
1.2.2 酪氨酸酚裂解酶结构特征 | 第12-15页 |
1.2.3 酪氨酸酚裂解酶催化机理 | 第15-17页 |
1.2.4 酪氨酸酚裂解酶应用 | 第17-18页 |
1.3 丝氨酸脱氨酶概述 | 第18-20页 |
1.3.1 丝氨酸脱氨酶来源 | 第18页 |
1.3.2 丝氨酸脱氨酶结构特征 | 第18-19页 |
1.3.3 丝氨酸脱氨酶催化机理 | 第19-20页 |
1.3.4 丝氨酸脱氨酶应用及研究进展 | 第20页 |
1.4 基因工程技术及密码子优化介绍 | 第20-24页 |
1.4.1 大肠杆菌表达系统和表达载体 | 第20-22页 |
1.4.2 基因工程菌酶法制备氨基酸 | 第22页 |
1.4.3 密码子优化概述 | 第22-24页 |
1.5 多酶偶联反应体系研究和应用 | 第24页 |
1.6 研究目的及主要研究内容 | 第24-25页 |
参考文献 | 第25-29页 |
第二章 酪氨酸酚裂解酶基因工程菌构建及酶学性质研究 | 第29-43页 |
2.1 酪氨酸酚裂解酶基因工程菌构建实验材料和方法 | 第29-37页 |
2.1.1 实验材料 | 第29-30页 |
2.1.2 分子生物学操作 | 第30-36页 |
2.1.3 酶活测定和HPLC检测L-酪氨酸 | 第36-37页 |
2.2 酪氨酸酚裂解酶基因工程菌酶学性质研究和应用 | 第37-41页 |
2.2.1 酪氨酸酚裂解酶酶学性质研究 | 第37-41页 |
2.2.2 酪氨酸酚裂解酶催化丙酮酸发酵液合成L-酪氨酸 | 第41页 |
2.3 结果与讨论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-43页 |
第三章 双酶偶联反应制备L-酪氨酸研究 | 第43-53页 |
3.1 实验材料及方法 | 第43-45页 |
3.1.1 菌种来源 | 第43-44页 |
3.1.2 检测方法 | 第44-45页 |
3.2 双酶偶联反应制备L-酪氨酸 | 第45-49页 |
3.2.1 丝氨酸脱氨酶催化L-丝氨酸脱氨反应制备丙酮酸研究 | 第45页 |
3.2.2 双酶偶联反应体系酶学性质研究 | 第45-49页 |
3.3 双酶偶联催化混合氨基酸液和其电渗析液制备L-酪氨酸 | 第49-52页 |
3.3.1 电渗析技术处理混合氨基酸液 | 第50-51页 |
3.3.2 双酶偶联催化混合氨基酸液和其电渗析液合成L-酪氨酸研究 | 第51-52页 |
3.4 实验结果与讨论 | 第52页 |
参考文献 | 第52-53页 |
第四章 共表达基因工程菌构建及催化合成L-酪氨酸研究 | 第53-64页 |
4.1 多基因串联技术概述 | 第53-55页 |
4.1.1 多基因串联共表达载体 | 第53-54页 |
4.1.2 多基因串联体构建策略 | 第54页 |
4.1.3 多基因串联体表达模式 | 第54-55页 |
4.2 双基因串联表达基因工程菌构建 | 第55-60页 |
4.2.1 实验材料 | 第55-56页 |
4.2.2 分子生物学操作 | 第56-60页 |
4.2.3 双基因串联表达基因工程菌酶活检测 | 第60页 |
4.3 单表达与双基因串联表达基因工程菌酶活比较 | 第60-62页 |
4.3.1 单表达与双基因串联表达基因工程菌表达SdaA酶活比较 | 第61页 |
4.3.2 单表达与双基因串联表达基因工程菌表达TPL酶活比较 | 第61-62页 |
4.4 单菌单酶法与单菌双酶法合成L-酪氨酸比较研究 | 第62页 |
4.5 实验结果与讨论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-64页 |
第五章 单菌双酶法催化多种来源L-丝氨酸合成L-酪氨酸 | 第64-66页 |
5.1 单菌双酶法催化L-丝氨酸酶转化液合成L-酪氨酸 | 第64页 |
5.2 单菌双酶法催化混合氨基酸液合成L-酪氨酸 | 第64-65页 |
5.3 单菌双酶法催化混合氨基酸电渗析液合成L-酪氨酸 | 第65页 |
5.4 实验结果与讨论 | 第65页 |
参考文献 | 第65-66页 |
第六章 总结与展望 | 第66-67页 |
攻读硕士学位期间发表论文与申请专利 | 第67-68页 |
致谢 | 第68-69页 |