| 中文摘要 | 第13-15页 |
| ABSTRACT | 第15-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-29页 |
| 1.1 蛋白质的翻译终止 | 第19页 |
| 1.2 肽链释放因子介绍 | 第19-26页 |
| 1.2.1 肽链释放因子的分类 | 第20页 |
| 1.2.2 肽链释放因子的结构及功能介绍 | 第20-22页 |
| 1.2.3 第一类肽链释放因子识别终止密码子机制的研究进展 | 第22-26页 |
| 1.3 肽链的翻译终止过程需要多种因子共同作用 | 第26-27页 |
| 1.4 密码子的标准性和特异性 | 第27页 |
| 1.5 嗜热四膜虫的特点及本课题的研究意义 | 第27-29页 |
| 1.5.1 嗜热四膜虫的简介 | 第27页 |
| 1.5.2 本课题研究的意义 | 第27-29页 |
| 第二章 eRF1的C端结构域影响四膜虫eRF1识别终止密码子的活性 | 第29-49页 |
| 2.1 引言 | 第29页 |
| 2.2 实验材料 | 第29-33页 |
| 2.2.1 菌株和质粒 | 第29-30页 |
| 2.2.2 实验用生化试剂、引物合成及测序 | 第30-31页 |
| 2.2.3 主要试剂的配制 | 第31-32页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第32-33页 |
| 2.3 实验方法 | 第33-41页 |
| 2.3.1 PCR扩增目的基因片段 | 第33-34页 |
| 2.3.2 四膜虫eRF1（Tt/Sc eRF1,Tt/Sp eRF1）嵌合体的构建（含HA标签） | 第34-36页 |
| 2.3.3 基因的定点突变 | 第36-37页 |
| 2.3.4 双荧光素酶通读效率实验测定 | 第37-39页 |
| 2.3.5 糖源转换实验 | 第39-40页 |
| 2.3.6 质粒洗牌技术 | 第40-41页 |
| 2.3.7 Western Blotting | 第41页 |
| 2.4 实验结果 | 第41-47页 |
| 2.4.1 嵌合体Tt/Sc eRF1，Tt/Sp eRF1，Sp eRF1重组质粒的构建 | 第41页 |
| 2.4.2 嵌合体Tt/Sc eRF1，Tt/Sp eRF1突变质粒的构建 | 第41-42页 |
| 2.4.3 嵌合体及突变体细胞活性分析 | 第42-43页 |
| 2.4.4 四膜虫eRF1的N结构域的功能 | 第43-44页 |
| 2.4.5 eRF1的C端小结构域影响N端结构域对终止密码子识别的特异性 | 第44-46页 |
| 2.4.6 eRF1的C端小结构域（minidomain）中Loop结构影响N端结构域对终止密码子识别的特异性 | 第46-47页 |
| 2.4.7 Western印迹检测eRF1在酵母细胞中的表达 | 第47页 |
| 2.5 讨论 | 第47-49页 |
| 第三章 eRF1嵌合体与第二类肽链释放因子eRF3的相互作用 | 第49-58页 |
| 3.1 引言 | 第49页 |
| 3.2 实验材料 | 第49-51页 |
| 3.2.1 菌株和质粒 | 第49-50页 |
| 3.2.2 生化试剂、相关酶、引物合成以及测序 | 第50页 |
| 3.2.3 实验试剂的配制 | 第50-51页 |
| 3.2.4 实验仪器 | 第51页 |
| 3.3 实验方法 | 第51-54页 |
| 3.3.1 酵母双杂交重组质粒的构建 | 第51-52页 |
| 3.3.2 酵母双杂交实验 | 第52-54页 |
| 3.4 实验结果 | 第54-56页 |
| 3.4.1 构建用于酵母双杂交的重组质粒 | 第54-55页 |
| 3.4.2 酵母双杂交证实嵌合体eRF1与酿酒酵母eRF3之间的相互作用 | 第55-56页 |
| 3.5 讨论 | 第56-58页 |
| 第四章 eRF1分子内的N端结构域与C端结构域的相互作用 | 第58-70页 |
| 4.1 引言 | 第58-59页 |
| 4.2 实验材料 | 第59-60页 |
| 4.2.1 实验菌株和质粒 | 第59页 |
| 4.2.2 生化试剂、引物合成及测序 | 第59页 |
| 4.2.3 主要实验仪器 | 第59-60页 |
| 4.2.4 主要试剂的配制 | 第60页 |
| 4.3 实验方法 | 第60-64页 |
| 4.3.1 引物序列 | 第60-62页 |
| 4.3.2 双分子荧光互补实验重组质粒的构建 | 第62-64页 |
| 4.4 实验结果 | 第64-68页 |
| 4.4.1 Tt-eRF1-N,Tt-eRF1-C,Sc-eRF1-C,Sp-eRF1-C基因的克隆 | 第64-65页 |
| 4.4.2 BiFC实验重组质粒的构建 | 第65页 |
| 4.4.3 双分子荧光互补实验（BiFC） | 第65-66页 |
| 4.4.4 BiFC证实N端结构域与C端结构域的相互作用 | 第66-68页 |
| 4.5 讨论 | 第68-70页 |
| 总结与展望 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-76页 |
| 附录 | 第76-78页 |
| 攻读硕士期间取得的研究成果 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 个人简介及联系方式 | 第80-81页 |
