| 致谢 | 第11-13页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 摘要 | 第14-16页 |
| Abstract | 第16-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-40页 |
| 1.1 高等植物对低磷胁迫的响应 | 第19-25页 |
| 1.1.1 根系构型的改变 | 第20-21页 |
| 1.1.2 高亲和磷酸盐转运体基因的诱导表达 | 第21-22页 |
| 1.1.3 有机酸的分泌 | 第22-23页 |
| 1.1.4 磷酸酶的产生和分泌 | 第23-24页 |
| 1.1.5 菌根的形成 | 第24页 |
| 1.1.6 其他生物学变化 | 第24-25页 |
| 1.2 紫色酸性磷酸酶 | 第25-32页 |
| 1.2.1 植物PAPs生物信息学分析 | 第25-27页 |
| 1.2.2 植物PAPs生化和分子特性 | 第27-30页 |
| 1.2.3 植物PAPs亚细胞定位 | 第30-31页 |
| 1.2.4 植物PAPs表达调控 | 第31-32页 |
| 1.3 磷营养高效作物品种改良 | 第32-39页 |
| 1.3.1 调节核心转录因子和其他磷酸盐调节蛋白的表达 | 第32-33页 |
| 1.3.2 调节磷酸盐转运蛋白的表达 | 第33-35页 |
| 1.3.3 调节有机酸的合成与转运 | 第35-36页 |
| 1.3.4 调节磷酸酶的分泌 | 第36-39页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第39-40页 |
| 第二章 材料方法 | 第40-49页 |
| 2.1 实验材料 | 第40页 |
| 2.2 实验方法 | 第40-49页 |
| 2.2.1 植物生长条件 | 第40-41页 |
| 2.2.2 进化树构建 | 第41-42页 |
| 2.2.3 载体构建 | 第42页 |
| 2.2.4 RNA提取与纯化 | 第42页 |
| 2.2.5 半定量PCR(RT-PCR)与实时定量PCR(qRT-PCR)分析 | 第42-43页 |
| 2.2.6 OsPAP10c多克隆抗体的制备 | 第43页 |
| 2.2.7 Western蛋白印迹分析 | 第43-44页 |
| 2.2.8 农杆菌介导的水稻转基因 | 第44-45页 |
| 2.2.9 农杆菌介导的拟南芥转基因 | 第45页 |
| 2.2.10 BCIP(5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸盐)染色 | 第45页 |
| 2.2.11 GUS染色与切片制作 | 第45-46页 |
| 2.2.12 植物组织和培养液中的蛋白提取 | 第46页 |
| 2.2.13 酸性磷酸酶活性测定 | 第46页 |
| 2.2.14 活性胶染色实验 | 第46-47页 |
| 2.2.15 水稻磷含量测定 | 第47-48页 |
| 2.2.16 田间表型分析 | 第48页 |
| 2.2.17 总磷测定 | 第48-49页 |
| 第三章 水稻紫色酸性磷酸酶Ia亚家族的表达调控 | 第49-58页 |
| 3.1 PAP Ia亚家族成员及其表达分析 | 第49-52页 |
| 3.1.1 植物PAP Ia亚家族进化分析 | 第49-50页 |
| 3.1.2 水稻PAP Ia亚家族基因在不同组织中的表达分析 | 第50-52页 |
| 3.2 OsPAP10a在地上和地下部分受缺磷特异诱导表达 | 第52-54页 |
| 3.2.1 OsPAP10a的定量分析 | 第52-53页 |
| 3.2.2 OsPAP10a的组织表达分析 | 第53-54页 |
| 3.3 OsPAP10c在地下部分受缺磷特异诱导表达 | 第54-58页 |
| 3.3.1 OsPAP10c的定量分析 | 第54-55页 |
| 3.3.2 OsPAP10c的组织表达分析 | 第55-58页 |
| 第四章 紫色酸性磷酸酶OsPAP10a和OsPAP10c的功能研究 | 第58-74页 |
| 4.1 OsPAP10a和OsPAP10c与拟南芥AtPAP10的功能互补关系 | 第58-59页 |
| 4.2 超表达OsPAP10a和OsPAP10c植株的培育与鉴定 | 第59-60页 |
| 4.3 超表达OsPAP10a和OsPAP10c植株的酸性磷酸酶活性检测 | 第60-67页 |
| 4.3.1 根表面酸性磷酸酶活性检测 | 第60-62页 |
| 4.3.2 根和叶中酸性磷酸酶活性检测及活性胶染色分析 | 第62-64页 |
| 4.3.3 分泌性酸性磷酸酶活性检测及活性胶染色分析 | 第64-67页 |
| 4.4 超表达OsPAP10a和OsPAP10c对胞外ATP的降解和利用效率分析 | 第67-69页 |
| 4.5 超表达OsPAP10a和OsPAP10c植株的田间表型分析 | 第69-71页 |
| 4.6 讨论 | 第71-74页 |
| 第五章 结论与展望 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-89页 |
| 第六章 (附录)：抗除草剂转基因大豆的培育及分子鉴定 | 第89-109页 |
| 6.1 实验材料与方法 | 第89-96页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第89页 |
| 6.1.2 载体和农杆菌 | 第89-91页 |
| 6.1.3 外植体的准备与共培养 | 第91页 |
| 6.1.4 筛选与再生 | 第91-92页 |
| 6.1.5 再生率、出苗率和转化效率的测定 | 第92页 |
| 6.1.6 多序列比对与进化树分析 | 第92页 |
| 6.1.7 转基因植株的PCR和Southern检测 | 第92-93页 |
| 6.1.8 转基因植株半定量PCR检测 | 第93页 |
| 6.1.9 Western blot检测 | 第93页 |
| 6.1.10 转基因大豆草甘膦抗性检测 | 第93页 |
| 6.1.11 TAIL-PCR分析 | 第93-96页 |
| 6.2 实验结果 | 第96-107页 |
| 6.2.1 EPSPS基因G6与G10的获得及功能验证 | 第96-99页 |
| 6.2.2 抗草甘膦转基因大豆培育条件的优化 | 第99-103页 |
| 6.2.3 转基因材料的分子验证 | 第103-104页 |
| 6.2.4 转基因后代的除草剂抗性检测 | 第104-105页 |
| 6.2.5 转基因后代的旁邻序列检测 | 第105-106页 |
| 6.2.6 转基因后代的旁邻序列作图分析 | 第106-107页 |
| 6.3 讨论 | 第107-109页 |
| 攻读博士学位期间主要的研究成果 | 第109页 |
