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Shewanella oneidensis中arcA突变造成过氧化氢敏感性增加的作用机制

致谢第5-6页
摘要第6-7页
Abstract第7页
1 绪论第10-23页
    1.1 希瓦氏菌(Shewanella)第10页
    1.2 S. oneidensis MR-1中Arc系统第10-13页
        1.2.1 二元系统第10-11页
        1.2.2 Arc系统第11-13页
    1.3 细菌应对氧化应激的机制第13-19页
        1.3.1 活性氧(ROS)的来源第13页
        1.3.2 细菌中对活性氧的防御系统第13-16页
        1.3.3 细菌中氧化压力的调控第16-19页
    1.4 Arc系统对氧化压力的抗性第19-20页
    1.5 本研究的背景、主要内容及意义第20-23页
2 材料与方法第23-32页
    2.1 菌株、质粒和培养条件第23页
    2.2 框内缺失突变菌株的构建和质粒回补第23-25页
    2.3 S. oneidensis应答过氧化氢和SDS的生理特征的测试方法第25-27页
        2.3.1 最小抑菌浓度(MIC)的测定第26页
        2.3.2 纸片扩散试验第26页
        2.3.3 S. oneidensis菌株存活率的测定第26页
        2.3.4 测定过氧化氢的消耗第26-27页
        2.3.5 SDS敏感性试验第27页
    2.4 细胞膜缺陷分析第27-28页
    2.5 微阵列分析第28页
    2.6 ArcA的表达,纯化和磷酸化以及凝胶电泳迁移实验(EMSA)第28-29页
    2.7 SDS-PAGE分析外膜蛋白第29-30页
    2.8 β-半乳糖苷酶活性检测试验第30页
    2.9 过氧化氢酶活性分析第30-31页
    2.10 体内过氧化氢扩散实验第31页
    2.11 其他分析第31-32页
3 结果与分析第32-44页
    3.1 S.oneidensis中arcA的突变增加了过氧化氢的敏感性第32-33页
    3.2 △arcA菌株中OxyR的功能正常第33-35页
    3.3 ArcA的缺失不影响细菌分解过氧化氢的能力第35-36页
    3.4 ArcA的缺失提高了细菌摄取过氧化氢的速率第36-37页
    3.5 S.oneidensis中孔蛋白对过氧化氢的吸收没有很大作用第37-39页
    3.6 ArcA的缺失造成了细胞膜的损伤第39-41页
    3.7 SO1915与△arcA菌株细胞膜受损有关第41-43页
    3.8 由于arcA突变导致细胞膜缺陷的原因可能不仅仅依赖于单独的一个基因调控第43-44页
4 讨论第44-48页
参考文献第48-54页
附录第54-55页

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