致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
1 绪论 | 第10-23页 |
1.1 希瓦氏菌(Shewanella) | 第10页 |
1.2 S. oneidensis MR-1中Arc系统 | 第10-13页 |
1.2.1 二元系统 | 第10-11页 |
1.2.2 Arc系统 | 第11-13页 |
1.3 细菌应对氧化应激的机制 | 第13-19页 |
1.3.1 活性氧(ROS)的来源 | 第13页 |
1.3.2 细菌中对活性氧的防御系统 | 第13-16页 |
1.3.3 细菌中氧化压力的调控 | 第16-19页 |
1.4 Arc系统对氧化压力的抗性 | 第19-20页 |
1.5 本研究的背景、主要内容及意义 | 第20-23页 |
2 材料与方法 | 第23-32页 |
2.1 菌株、质粒和培养条件 | 第23页 |
2.2 框内缺失突变菌株的构建和质粒回补 | 第23-25页 |
2.3 S. oneidensis应答过氧化氢和SDS的生理特征的测试方法 | 第25-27页 |
2.3.1 最小抑菌浓度(MIC)的测定 | 第26页 |
2.3.2 纸片扩散试验 | 第26页 |
2.3.3 S. oneidensis菌株存活率的测定 | 第26页 |
2.3.4 测定过氧化氢的消耗 | 第26-27页 |
2.3.5 SDS敏感性试验 | 第27页 |
2.4 细胞膜缺陷分析 | 第27-28页 |
2.5 微阵列分析 | 第28页 |
2.6 ArcA的表达,纯化和磷酸化以及凝胶电泳迁移实验(EMSA) | 第28-29页 |
2.7 SDS-PAGE分析外膜蛋白 | 第29-30页 |
2.8 β-半乳糖苷酶活性检测试验 | 第30页 |
2.9 过氧化氢酶活性分析 | 第30-31页 |
2.10 体内过氧化氢扩散实验 | 第31页 |
2.11 其他分析 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-44页 |
3.1 S.oneidensis中arcA的突变增加了过氧化氢的敏感性 | 第32-33页 |
3.2 △arcA菌株中OxyR的功能正常 | 第33-35页 |
3.3 ArcA的缺失不影响细菌分解过氧化氢的能力 | 第35-36页 |
3.4 ArcA的缺失提高了细菌摄取过氧化氢的速率 | 第36-37页 |
3.5 S.oneidensis中孔蛋白对过氧化氢的吸收没有很大作用 | 第37-39页 |
3.6 ArcA的缺失造成了细胞膜的损伤 | 第39-41页 |
3.7 SO1915与△arcA菌株细胞膜受损有关 | 第41-43页 |
3.8 由于arcA突变导致细胞膜缺陷的原因可能不仅仅依赖于单独的一个基因调控 | 第43-44页 |
4 讨论 | 第44-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
附录 | 第54-55页 |