| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-15页 |
| 1.1 加氧酶的研究进展 | 第8-9页 |
| 1.2 异亮氨酸双加氧酶的研究进展 | 第9-11页 |
| 1.3 羟基氨基酸生物合成的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.4 羟基异亮氨酸的生物合成研究进展 | 第12-13页 |
| 1.5 论文的立项依据及研究内容 | 第13-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-20页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-16页 |
| 2.1.1 菌株 | 第15页 |
| 2.1.2 试剂及药品 | 第15页 |
| 2.1.3 培养基 | 第15页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第15-16页 |
| 2.2 试验方法 | 第16页 |
| 2.2.1 异亮氨酸双加氧酶基因的诱导表达 | 第16页 |
| 2.2.2 重组异亮氨酸双加氧酶的分离纯化 | 第16页 |
| 2.2.3 异亮氨酸双加氧酶的活性检测 | 第16页 |
| 2.2.4 重组菌株的生物转化 | 第16页 |
| 2.3 反应体系的优化 | 第16-19页 |
| 2.3.1 异亮氨酸双加氧酶的酶学特性研究 | 第16-18页 |
| 2.3.2 粗酶反应体系的优化 | 第18页 |
| 2.3.3 全细胞反应体系的优化 | 第18-19页 |
| 2.4 底物与产物的分析检测 | 第19-20页 |
| 2.4.1 反应液的衍生化 | 第19页 |
| 2.4.2 HPLC分析检测条件 | 第19-20页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第20-40页 |
| 3.1 异亮氨酸双加氧酶酶学特性的研究 | 第20-25页 |
| 3.1.1 异亮氨酸双氧酶的表达及纯化 | 第20页 |
| 3.1.2 异亮氨酸双加氧酶的动力学参数分析 | 第20-21页 |
| 3.1.3 异亮氨酸双加氧酶最适温度、最适p H的测定 | 第21-22页 |
| 3.1.4 异亮氨酸双加氧酶的热稳定性 | 第22页 |
| 3.1.5 金属离子Fe~(2+)对异亮氨酸双加氧酶活性的影响 | 第22-23页 |
| 3.1.6 纯酶体系L-Ile和 α-KG对重组酶IDO活性的影响 | 第23-24页 |
| 3.1.7 异亮氨酸双加氧酶的底物特异性分析 | 第24页 |
| 3.1.8 异亮氨酸双加氧酶催化反应过程分析 | 第24-25页 |
| 3.2 重组异亮氨酸双加氧酶粗酶体系转化羟基异亮氨酸 | 第25-31页 |
| 3.2.1 Fe~(2+)浓度对 4-HIL合成的影响 | 第25页 |
| 3.2.2 Vc浓度对 4-HIL合成的影响 | 第25页 |
| 3.2.3 葡萄糖浓度对 4-HIL合成的影响 | 第25-26页 |
| 3.2.4 粗酶浓度对 4-HIL合成的影响 | 第26页 |
| 3.2.5 α-酮戊二酸浓度对 4-HIL合成的影响 | 第26-27页 |
| 3.2.6 异柠檬酸裂解酶抑制剂对异亮氨酸羟基化反应的影响 | 第27-28页 |
| 3.2.7 异柠檬酸脱氢酶激活剂对异亮氨酸羟基化反应的影响 | 第28-29页 |
| 3.2.8 α-酮戊二酸脱氢酶抑制剂对异亮氨酸羟基化反应的影响 | 第29-30页 |
| 3.2.9 底物L-Ile浓度对 4-HIL合成的影响 | 第30-31页 |
| 3.3 异亮氨酸双加氧酶重组细胞转化羟基异亮氨酸 | 第31-40页 |
| 3.3.1 Fe~(2+)浓度对 4-HIL合成的影响 | 第31页 |
| 3.3.2 Ca Cl2浓度对 4-HIL合成的影响 | 第31-32页 |
| 3.3.3 抗坏血酸浓度对 4-HIL合成的影响 | 第32页 |
| 3.3.4 葡萄糖浓度对 4-HIL合成的影响 | 第32-33页 |
| 3.3.5 菌体浓度及反应方式对 4-HIL合成的影响 | 第33页 |
| 3.3.6 α-酮戊二酸浓度对 4-HIL合成的影响 | 第33-34页 |
| 3.3.7 全细胞体系中异柠檬酸裂解酶抑制剂对异亮氨酸羟基化反应的影响 | 第34-36页 |
| 3.3.8 全细胞体系中异柠檬酸脱氢酶激活剂对异亮氨酸羟基化反应的影响 | 第36-37页 |
| 3.3.9 全细胞体系中 α-酮戊二酸脱氢酶抑制剂对异亮氨酸羟基化反应的影响 | 第37-38页 |
| 3.3.10 底物L-Ile浓度对 4-HIL合成的影响 | 第38-40页 |
| 主要结论与展望 | 第40-42页 |
| 主要结论 | 第40-41页 |
| 展望 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第48页 |
