摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
上篇 文献综述 | 第11-28页 |
第一章 细菌性软腐病和胡萝卜软腐果胶杆菌的研究进展 | 第12-18页 |
1 细菌性软腐病的概述 | 第12页 |
2 胡萝卜软腐果胶杆菌介绍 | 第12页 |
3 胡萝卜软腐果胶杆菌的致病机理 | 第12-13页 |
4 胡萝卜软腐果胶杆菌的致病因子 | 第13-16页 |
4.1 生物膜与鞭毛 | 第13-14页 |
4.2 胞外水解酶类 | 第14-15页 |
4.3 脂多糖 | 第15页 |
4.4 群体感应与碳青霉烯抗生素 | 第15-16页 |
5 胡萝卜软腐果胶杆菌的防治办法 | 第16-18页 |
5.1 农业防治 | 第16页 |
5.2 化学防治 | 第16-17页 |
5.3 生物防治 | 第17-18页 |
第二章 多胺代谢及高效液相色谱法检测多胺研究进展 | 第18-28页 |
1 多胺的研究进展 | 第18-28页 |
1.1 多胺的基本结构和生物功能 | 第18-21页 |
1.2 多胺的检测方法 | 第21-24页 |
1.3 高效液相色谱研究多胺的应用前景 | 第24-28页 |
下篇 研究内容 | 第28-60页 |
第一章 胡萝卜软腐果胶杆菌中多胺代谢相关基因的功能研究 | 第30-46页 |
1 试验材料 | 第32-33页 |
1.1 供试菌株和质粒 | 第32页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第32-33页 |
1.3 培养基 | 第33页 |
1.4 抗生素 | 第33页 |
1.5 引物 | 第33页 |
2 试验方法 | 第33-41页 |
2.1 细菌基因组DNA提取 | 第33-35页 |
2.2 质粒的提取 | 第35-36页 |
2.3 DNA酶切、反应产物回收和连接 | 第36-37页 |
2.4 质粒DNA的转化 | 第37-38页 |
2.5 突变体的构建 | 第38-39页 |
2.6 相关表型的测定 | 第39-41页 |
3 结果与分析 | 第41-44页 |
3.1 突变株的构建及验证 | 第41页 |
3.2 突变株的致病性表型 | 第41-42页 |
3.3 胞外水解酶活力测定 | 第42-43页 |
3.4 碳青霉烯抗生素表型测定 | 第43页 |
3.5 生长速率测定 | 第43-44页 |
4 讨论与结论 | 第44-46页 |
第二章 胡萝卜软腐果胶杆菌中腐胺高效液相色谱检测方法建立 | 第46-60页 |
1 试验材料 | 第47-48页 |
1.1 供试菌株 | 第47页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第47-48页 |
1.3 培养基 | 第48页 |
1.4 抗生素 | 第48页 |
2 试验方法 | 第48-51页 |
2.1 细菌的培养与收集 | 第48-49页 |
2.2 细胞破碎法 | 第49页 |
2.3 低温真空冻干 | 第49页 |
2.4 腐胺衍生处理添加苯甲酰氯体积的确定 | 第49页 |
2.5 腐胺的苯甲酰化 | 第49-50页 |
2.6 腐胺标准样品的标准曲线制作 | 第50页 |
2.7 高效液相色谱仪分析条件的确定 | 第50-51页 |
2.8 液质联用仪(LC-MS)分析 | 第51页 |
3 结果与分析 | 第51-58页 |
3.1 样品浓度的提高 | 第51-52页 |
3.2 细胞破碎方法的确定 | 第52-53页 |
3.3 腐胺衍生化试剂苯甲酰氯添加体积的确定 | 第53页 |
3.4 液相色谱检测腐胺标准曲线制作 | 第53-54页 |
3.5 液相色谱检测多胺流动相及检测条件 | 第54-55页 |
3.6 液质联用仪(LC-MS)分析结果 | 第55-57页 |
3.7 液相色谱检测Pcc菌株胞内腐胺含量 | 第57-58页 |
4 讨论与总结 | 第58-60页 |
全文总结 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-68页 |
致谢 | 第68页 |