摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 国内外研究现状及本研究目的意义 | 第11-24页 |
1.1 BHV-1的生物学特征 | 第12-13页 |
1.2 BHV-1的分子生物学特征 | 第13-15页 |
1.3 BHV-1的临床类型 | 第15-16页 |
1.3.1 呼吸道感染型 | 第15页 |
1.3.2 结膜角膜型 | 第15页 |
1.3.3 生殖器感染型 | 第15-16页 |
1.3.4 流产不孕型 | 第16页 |
1.3.5 脑膜脑炎性 | 第16页 |
1.3.6 肠炎型 | 第16页 |
1.4 BHV-1流行病学 | 第16-17页 |
1.5 诊断方法 | 第17-19页 |
1.5.1 根据临床症状进行诊断 | 第17页 |
1.5.2 实验室诊断 | 第17-19页 |
1.6 BHV-1的防治 | 第19-21页 |
1.7 环介导等温扩增技术 | 第21-23页 |
1.7.1 原理 | 第21-22页 |
1.7.2 引物设计要求 | 第22页 |
1.7.3 LAMP技术的应用 | 第22-23页 |
1.8 研究的目的和意义 | 第23-24页 |
2 实验材料与方法 | 第24-32页 |
2.1 材料 | 第24-25页 |
2.1.1 病毒 | 第24页 |
2.1.2 生物学试剂 | 第24页 |
2.1.3 主要仪器 | 第24页 |
2.1.4 引物 | 第24-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-32页 |
2.2.1 病毒培养 | 第25页 |
2.2.2 TCID_(50)测定 | 第25页 |
2.2.3 模板DNA的制备 | 第25-26页 |
2.2.4 BHV-1 LAMP方法的标准化 | 第26-29页 |
2.2.5 BHV-1 LAMP方法的可视化方法的建立 | 第29页 |
2.2.6 LAMP反应特异性实验 | 第29-30页 |
2.2.7 LAMP反应的敏感性实验 | 第30-31页 |
2.2.8 LAMP方法的实际应用 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-46页 |
3.1 TCID_(50)测定结果 | 第32页 |
3.2 BHV-1 LAMP方法的标准化 | 第32-37页 |
3.2.1 引物浓度优化结果 | 第32-33页 |
3.2.2 扩增时间优化结果 | 第33-34页 |
3.2.3 扩增温度优化结果 | 第34-35页 |
3.2.4 Mg~(2+)浓度优化结果 | 第35页 |
3.2.5 甜菜碱浓度优化结果 | 第35-36页 |
3.2.6 Bst DNA聚合酶浓度优化结果 | 第36-37页 |
3.2.7 LAMP反应体系优化结果 | 第37页 |
3.3 BHV-1 LAMP方法的可视化观察结果 | 第37-38页 |
3.4 BHV-1 LAMP方法的特异性结果 | 第38-39页 |
3.5 BHV-1 LAMP方法的敏感性结果 | 第39-41页 |
3.6 BHV-1 LAMP方法的实际应用结果 | 第41-46页 |
3.6.1 BHV-1 LAMP检测结果 | 第41-42页 |
3.6.2 常规PCR检测结果 | 第42-44页 |
3.6.3 中和试验检测结果 | 第44-45页 |
3.6.4 BHV-1 LAMP检测结果与常规PCR检测结果比较 | 第45-46页 |
4 结论与讨论 | 第46-51页 |
4.1 BHV-1 LAMP检测标准化方法的建立 | 第46-49页 |
4.1.1 BHV-1 LAMP检测标准化方法的建立的重要意义 | 第46-47页 |
4.1.2 BHV-1 LAMP检测标准化方法的建立与优化 | 第47-49页 |
4.2 BHV-1 LAMP检测标准化方法的应用价值与前景 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
附录 | 第55-56页 |
致谢 | 第56页 |