| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-27页 |
| ·根茎类储藏器官形态发育的研究进展 | 第11-13页 |
| ·植物块根块茎形成的生物学研究 | 第13-18页 |
| ·温、光、水、气、无机离子等自然条件对根茎类储藏根发育的影响 | 第13-14页 |
| ·内源激素对根茎类储藏根发育的影响 | 第14-18页 |
| ·根茎类储藏器官发育过程中碳水化合物的合成代谢 | 第18-20页 |
| ·根茎类储藏器官的分子生物学研究进展 | 第20-22页 |
| ·激素合成代谢相关基因与块根发育的影响 | 第20-22页 |
| ·其他内部合成代谢基因与块根块茎发育的影响 | 第22-24页 |
| ·根茎类储藏器官发育过程中,储藏蛋白研究 | 第24-25页 |
| ·Sporamin储存蛋白与块根发育关系 | 第24页 |
| ·patatin糖蛋白与块根发育关系 | 第24-25页 |
| ·本研究目的与意义 | 第25-27页 |
| 第2章 地黄块根ABA,GA等基因的克隆与序列分析 | 第27-51页 |
| ·材料和方法 | 第27-28页 |
| ·材料与试剂 | 第27页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第27-28页 |
| ·溶液的配置 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-36页 |
| ·地黄块根总RNA提取 | 第28-29页 |
| ·RNA完整性及质量检测 | 第29页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第29-30页 |
| ·目的基因序列片段的扩增 | 第30-31页 |
| ·PCR产物回收纯化 | 第31页 |
| ·重组子的构建 | 第31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
| ·重组质粒的转化 | 第32页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第32-33页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第33页 |
| ·基因全长克隆 | 第33-36页 |
| ·列比较分析,编码蛋白比较及进化分析 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-49页 |
| ·RNA结果鉴定 | 第36页 |
| ·ABA8'化酶基因序列分析 | 第36-38页 |
| ·地黄脱落酸合成酶关键基因生物信息学分析 | 第38-40页 |
| ·NCED同源基因序列比对分析 | 第40-43页 |
| ·地黄脱落酸合成酶关键基因生物信息学分析 | 第43-45页 |
| ·GA20氧化酶同源家族基因序列分析 | 第45-46页 |
| ·地黄赤霉素合成酶关键基因生物信息学分析 | 第46-48页 |
| ·蔗糖合成酶(SS)和水苏糖合成酶(STS)基因片段克隆 | 第48-49页 |
| ·讨论与小结 | 第49-51页 |
| 第3章 ABA、GA代谢关键酶基因的表达水平与激素含量变化的关系研究 | 第51-71页 |
| ·试验材料与方法 | 第51-53页 |
| ·实验材料 | 第51-53页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第53页 |
| ·溶液配置 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-60页 |
| ·酶联免疫样品制备 | 第53-54页 |
| ·植物激素含量测定 | 第54-55页 |
| ·地黄块根、茎、叶等器官总RNA提取 | 第55-56页 |
| ·RNA质量检测 | 第56页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第56-57页 |
| ·内参基因的选择和引物设计 | 第57页 |
| ·荧光定量PCR目的基因引物设计 | 第57-58页 |
| ·荧光定量PCR反应条件 | 第58页 |
| ·内参基因和目的基因引物特异性鉴定 | 第58-59页 |
| ·内参基因引物扩增效率验证和标准曲线的绘制 | 第59页 |
| ·数据处理分析 | 第59-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-67页 |
| ·RNA完整性鉴定 | 第60页 |
| ·荧光定量内参基因、目的基因特异性鉴定 | 第60页 |
| ·内参基因稳定性比较 | 第60-64页 |
| ·ABA含量变化与ABA-8'ox、NCED基因mRNA表达水平分析 | 第64-66页 |
| ·GA含量变化与ga2-ox、ga20-ox1、ga20-ox2和ga20ox3基因mRNA表达水平相关关系分析 | 第66-67页 |
| ·讨论与小结 | 第67-71页 |
| ·内参基因选择的重要性 | 第67-68页 |
| ·地黄发育过程中脱落酸(ABA)和赤霉素(GA)合成代谢关键酶基因的变化 | 第68-71页 |
| 第4章 地黄蔗糖水苏糖关键酶基因表达分析及含量变化 | 第71-79页 |
| ·材料与试剂 | 第71-72页 |
| ·材料 | 第71页 |
| ·试剂与仪器 | 第71-72页 |
| ·实验方法 | 第72-73页 |
| ·蔗糖合成酶(SS)和水苏糖合成酶(STS)定量PCR引物设计 | 第72页 |
| ·色谱条件 | 第72页 |
| ·对照品溶液 | 第72页 |
| ·样品制备 | 第72-73页 |
| ·荧光定最PcR反应条件 | 第73页 |
| ·试验结果与分析 | 第73-77页 |
| ·标准曲线绘制 | 第73页 |
| ·标准品峰图及样品含量测定峰图 | 第73-74页 |
| ·精密度试验、稳定性试验、重复性实验和加样回收率检测 | 第74页 |
| ·地黄不同发育时期水苏糖含量变化 | 第74-75页 |
| ·地黄不同发育时期蔗糖含量变化 | 第75-76页 |
| ·地黄不同发育时期SS-1、SS-2和STS基因mRNA表达水平分析 | 第76-77页 |
| ·讨论 | 第77-79页 |
| 第5章 结论 | 第79-80页 |
| 附录 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 作者简介 | 第89页 |
