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猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体的研制与抗原捕获ELISA抗体检测方法的建立

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
第一篇 文献综述第12-30页
 第一章 猪流行性腹泻病毒研究进展第12-30页
  1 病毒基本特性第12-15页
   ·分类与形态第12-13页
   ·理化特性第13页
   ·培养特性第13-14页
   ·基因组结构与编码蛋白第14-15页
     ·结构蛋白及其功能第14-15页
     ·非结构蛋白及其功能第15页
  2 流行病学第15-16页
  3 临床症状与病理变化第16页
  4 诊断技术第16-20页
   ·病原学诊断第16-17页
   ·血清学诊断第17-19页
   ·分子生物学检测第19-20页
  5 防制第20-22页
  参考文献第22-30页
第二篇 研究内容第30-84页
 第二章 猪流行性腹泻病毒N蛋白重组杆状病毒的构建与鉴定第30-46页
  摘要第30页
  1 材料与方法第30-38页
   ·材料第30-31页
   ·方法第31-38页
  2 结果第38-41页
   ·PEDV N基因的扩增第38-39页
   ·重组质粒的鉴定第39页
   ·基因序列测定第39页
   ·重组Bacmid的PCR鉴定第39-40页
   ·重组杆状病毒致细胞病变第40页
   ·重组N蛋白鉴定第40-41页
   ·重组N蛋白的纯化第41页
  3 讨论第41-43页
  参考文献第43-44页
  ABSTRACT第44-46页
 第三章 猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定第46-68页
  摘要第46页
  1 材料与方法第46-55页
   ·材料第46-47页
   ·方法第47-50页
   ·小鼠免疫第50页
   ·ELISA抗体测定第50-51页
   ·细胞融合第51-52页
   ·杂交瘤细胞株的建立第52-53页
   ·杂交瘤细胞冻存与复苏第53页
   ·单克隆抗体腹水的制备第53-54页
   ·单克隆抗体鉴定第54-55页
  2 结果第55-63页
   ·N基因扩增第55-56页
   ·重组质粒酶切鉴定第56页
   ·N基因测序鉴定第56页
   ·重组N蛋白SDS-PAGE第56-57页
   ·重组N蛋白Western blot第57页
   ·重组N蛋白可溶性检测第57-58页
   ·重组N蛋白纯化第58页
   ·免疫小鼠血清抗体效价的测定第58-59页
   ·杂交瘤细胞株的建立第59页
   ·单克隆抗体的鉴定第59-60页
   ·单克隆抗体特异性的鉴定第60-63页
  3 讨论第63-65页
  参考文献第65-66页
  ABSTRACT第66-68页
 第四章 猪流行性腹泻病毒抗原捕获ELISA抗体检测方法的建立与初步应用第68-84页
  摘要第68页
  1 材料与方法第68-71页
   ·材料第68-69页
   ·方法第69-71页
  2 结果第71-81页
   ·纯化的单克隆抗体IgG第71-72页
   ·纯化的PEDV抗原第72页
   ·抗原捕获ELISA优化的反应条件第72-76页
   ·判定标准的确定第76-77页
   ·特异性试验第77页
   ·敏感性、特异性和符合率分析第77-79页
   ·重复性实验第79-80页
   ·临床血清样品检测第80-81页
  3 讨论第81-82页
  参考文献第82-83页
  ABSTRACT第83-84页
全文总结第84-86页
致谢第86-88页
附录第88-91页

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