摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
第一篇 文献综述 | 第12-30页 |
第一章 猪流行性腹泻病毒研究进展 | 第12-30页 |
1 病毒基本特性 | 第12-15页 |
·分类与形态 | 第12-13页 |
·理化特性 | 第13页 |
·培养特性 | 第13-14页 |
·基因组结构与编码蛋白 | 第14-15页 |
·结构蛋白及其功能 | 第14-15页 |
·非结构蛋白及其功能 | 第15页 |
2 流行病学 | 第15-16页 |
3 临床症状与病理变化 | 第16页 |
4 诊断技术 | 第16-20页 |
·病原学诊断 | 第16-17页 |
·血清学诊断 | 第17-19页 |
·分子生物学检测 | 第19-20页 |
5 防制 | 第20-22页 |
参考文献 | 第22-30页 |
第二篇 研究内容 | 第30-84页 |
第二章 猪流行性腹泻病毒N蛋白重组杆状病毒的构建与鉴定 | 第30-46页 |
摘要 | 第30页 |
1 材料与方法 | 第30-38页 |
·材料 | 第30-31页 |
·方法 | 第31-38页 |
2 结果 | 第38-41页 |
·PEDV N基因的扩增 | 第38-39页 |
·重组质粒的鉴定 | 第39页 |
·基因序列测定 | 第39页 |
·重组Bacmid的PCR鉴定 | 第39-40页 |
·重组杆状病毒致细胞病变 | 第40页 |
·重组N蛋白鉴定 | 第40-41页 |
·重组N蛋白的纯化 | 第41页 |
3 讨论 | 第41-43页 |
参考文献 | 第43-44页 |
ABSTRACT | 第44-46页 |
第三章 猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 | 第46-68页 |
摘要 | 第46页 |
1 材料与方法 | 第46-55页 |
·材料 | 第46-47页 |
·方法 | 第47-50页 |
·小鼠免疫 | 第50页 |
·ELISA抗体测定 | 第50-51页 |
·细胞融合 | 第51-52页 |
·杂交瘤细胞株的建立 | 第52-53页 |
·杂交瘤细胞冻存与复苏 | 第53页 |
·单克隆抗体腹水的制备 | 第53-54页 |
·单克隆抗体鉴定 | 第54-55页 |
2 结果 | 第55-63页 |
·N基因扩增 | 第55-56页 |
·重组质粒酶切鉴定 | 第56页 |
·N基因测序鉴定 | 第56页 |
·重组N蛋白SDS-PAGE | 第56-57页 |
·重组N蛋白Western blot | 第57页 |
·重组N蛋白可溶性检测 | 第57-58页 |
·重组N蛋白纯化 | 第58页 |
·免疫小鼠血清抗体效价的测定 | 第58-59页 |
·杂交瘤细胞株的建立 | 第59页 |
·单克隆抗体的鉴定 | 第59-60页 |
·单克隆抗体特异性的鉴定 | 第60-63页 |
3 讨论 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-66页 |
ABSTRACT | 第66-68页 |
第四章 猪流行性腹泻病毒抗原捕获ELISA抗体检测方法的建立与初步应用 | 第68-84页 |
摘要 | 第68页 |
1 材料与方法 | 第68-71页 |
·材料 | 第68-69页 |
·方法 | 第69-71页 |
2 结果 | 第71-81页 |
·纯化的单克隆抗体IgG | 第71-72页 |
·纯化的PEDV抗原 | 第72页 |
·抗原捕获ELISA优化的反应条件 | 第72-76页 |
·判定标准的确定 | 第76-77页 |
·特异性试验 | 第77页 |
·敏感性、特异性和符合率分析 | 第77-79页 |
·重复性实验 | 第79-80页 |
·临床血清样品检测 | 第80-81页 |
3 讨论 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-83页 |
ABSTRACT | 第83-84页 |
全文总结 | 第84-86页 |
致谢 | 第86-88页 |
附录 | 第88-91页 |