| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第11-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-20页 |
| ·禽流感 | 第13-14页 |
| ·禽流感病毒 | 第13页 |
| ·血凝素蛋白(HA) | 第13-14页 |
| ·禽流感疫苗的研究进展 | 第14页 |
| ·哺乳动物新生儿Fc受体(FcRn)的研究进展 | 第14-15页 |
| ·FcRn的分子结构 | 第14页 |
| ·FcRn的胞转功能 | 第14-15页 |
| ·鸡卵黄抗体IgY Fc受体(FcRy)的研究进展 | 第15-16页 |
| ·鸡卵黄抗体IgY | 第15页 |
| ·FcRy的分子结构 | 第15-16页 |
| ·FcRy与IgY的结合特点 | 第16页 |
| ·杆状病毒昆虫细胞表达系统 | 第16-18页 |
| ·杆状病毒昆虫细胞表达系统的基本原理 | 第16-17页 |
| ·杆状病毒昆虫细胞表达系统的优势 | 第17-18页 |
| ·CpG-ODN | 第18页 |
| ·粘膜免疫 | 第18-20页 |
| 2 目的意义 | 第20-21页 |
| 3 材料方法 | 第21-47页 |
| ·材料 | 第21-26页 |
| ·菌株、细胞与实验动物 | 第21页 |
| ·质粒与杆粒 | 第21页 |
| ·主要药品与试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·主要抗生素与培养基的配制 | 第22-23页 |
| ·主要试剂的配制 | 第23-26页 |
| ·实验方法 | 第26-47页 |
| ·鸡组织RNA的提取与反转录 | 第26-27页 |
| ·引物设计 | 第27页 |
| ·禽流感H5N1 HA1、鸡IgY Fc基因的扩增 | 第27-28页 |
| ·sHA1-Fc融合基因的扩增 | 第28-29页 |
| ·重组质粒pMD18-T-sHA1-Fc的构建 | 第29-30页 |
| ·pFAST HTb-sHA1-Fc重组质粒的转座 | 第30-31页 |
| ·杆粒Bacmid的提取与鉴定 | 第31-33页 |
| ·重组阳性杆粒Bacmid转染Sf9细胞 | 第33-34页 |
| ·杆状病毒的扩增 | 第34-36页 |
| ·重组sHA1-Fc融合蛋白的表达 | 第36页 |
| ·GST-HA1融合蛋白的大量表达与纯化 | 第36-37页 |
| ·抗禽流感病毒H5N1 HA1多克隆抗体的制备 | 第37-41页 |
| ·非还原条件下sHA1-Fc融合蛋白Western Blot检测 | 第41-42页 |
| ·HA1融合蛋白跨越鸡呼吸道粘膜屏障的检测 | 第42-43页 |
| ·滴鼻和皮下接种鸡的免疫效果检测 | 第43-47页 |
| 4 结果 | 第47-61页 |
| ·禽流感H5N1 HA1、鸡IgY Fc基因的扩增 | 第47页 |
| ·sHA1-Fc融合基因的扩增 | 第47-48页 |
| ·重组质粒pMD18-T-sHA1-Fc的构建 | 第48页 |
| ·pFAST HTb-sHA1-Fc真核表达载体的构建 | 第48-49页 |
| ·重组质粒的转座 | 第49-50页 |
| ·重组阳性杆粒Bacmid转染Sf9细胞 | 第50-51页 |
| ·重组sHA1-Fc融合蛋白的表达 | 第51页 |
| ·GST-HA1融合蛋白的大量表达与纯化 | 第51-52页 |
| ·抗禽流感病毒H5N1 HA1多克隆抗体的制备 | 第52-53页 |
| ·重组sHA1-Fc融合蛋白的表达 | 第53页 |
| ·重组sHA1-Fc融合蛋白的纯化与鉴定 | 第53-54页 |
| ·非还原条件下sHA1-Fc融合蛋白Western Blot检测 | 第54-55页 |
| ·HA1融合蛋白跨越鸡呼吸道粘膜屏障的检测 | 第55页 |
| ·融合蛋白接种鸡的免疫效果检测 | 第55-61页 |
| ·血清中抗禽流感H5N1 HA1特异性抗体IgY的检测 | 第55-56页 |
| ·血清特异性抗体的HI效价检测 | 第56-57页 |
| ·呼吸道局部特异性IgY和SIgA的检测 | 第57-59页 |
| ·脾淋巴细胞增殖实验 | 第59页 |
| ·血清中细胞因子的检测 | 第59-61页 |
| 5 讨论 | 第61-64页 |
| ·引物设计 | 第61页 |
| ·HA1融合蛋白跨越呼吸道粘膜屏障的转运 | 第61页 |
| ·融合蛋白的粘膜免疫 | 第61-64页 |
| 6 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
