| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-24页 |
| ·帕金森病简介 | 第11-15页 |
| ·临床症状及病理特征 | 第11页 |
| ·帕金森病病因 | 第11-12页 |
| ·帕金森病发病机制 | 第12-15页 |
| ·氧化应激影响内源性神经毒素儿茶酚异喹啉类物质形成的假说 | 第15-17页 |
| ·Sal 的生物合成及神经毒性 | 第17-20页 |
| ·Sal 的生物合成 | 第17-18页 |
| ·Sal 及其衍生物的神经毒性 | 第18-20页 |
| ·Sal 合成酶及其相关研究现状 | 第20-22页 |
| ·Pictet-Spengler 酶 | 第20页 |
| ·Sal 合成酶 | 第20-22页 |
| ·本课题研究的意义与目的 | 第22-24页 |
| 第2章 实验部分 | 第24-47页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第24-26页 |
| ·试剂 | 第24页 |
| ·菌株和质粒 | 第24页 |
| ·试剂配置 | 第24-25页 |
| ·实验仪器 | 第25-26页 |
| ·Sal 合成酶稳定表达体系的建立 | 第26-36页 |
| ·Sal 合成酶基因的获取 | 第26-28页 |
| ·原核表达体系的构建 | 第28-33页 |
| ·真核表达体系的构建 | 第33-36页 |
| ·Sal 合成酶的表达及纯化 | 第36-44页 |
| ·原核表达体系蛋白表达 | 第36页 |
| ·真核表达体系蛋白表达 | 第36-38页 |
| ·表达蛋白 Sal 合成酶的验证 | 第38-42页 |
| ·Sal 合成酶的分离和纯化 | 第42-44页 |
| ·Sal 合成酶酶活测定 | 第44-47页 |
| ·Sal 合成酶反应体系及反应条件 | 第44-45页 |
| ·Sal 催化产物 Sal 的 LC-ESI-QQQ 检测方法 | 第45-47页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第47-57页 |
| ·Sal 合成酶基因克隆 | 第47-50页 |
| ·定点突变 | 第47-48页 |
| ·Sal 合成酶基因扩增 | 第48页 |
| ·重组质粒的构建与分析 | 第48-49页 |
| ·基因测序与序列分析 | 第49-50页 |
| ·Sal 合成酶的表达与纯化 | 第50-54页 |
| ·诱导表达融合蛋白 | 第50页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第50-51页 |
| ·融合蛋白切除 His 标签 | 第51-52页 |
| ·Western-blot 验证 | 第52-54页 |
| ·Sal 合成酶酶活检测 | 第54-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-71页 |
| 攻读学位期间发表论文与研究成果清单 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |