| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 前言 | 第8-12页 |
| 参考文献 | 第10-12页 |
| 第一部分：冷冻技术对精子印记基因DNA甲基化影响的研究 | 第12-31页 |
| 1. 实验材料 | 第12-14页 |
| ·主要仪器 | 第12-13页 |
| ·主要试剂 | 第13-14页 |
| ·主要溶液 | 第14页 |
| 2. 实验方法 | 第14-21页 |
| ·标本采集与分组 | 第14-15页 |
| ·精液冷冻复苏 | 第15-16页 |
| ·精子DNA提取 | 第16页 |
| ·亚硫酸氢盐处理 | 第16-18页 |
| ·目的片段扩増 | 第18-19页 |
| ·PCR产物电泳及纯化回收 | 第19页 |
| ·TA克隆测序 | 第19-21页 |
| 3. 实验结果 | 第21-27页 |
| ·PCR扩増后的目的片段经电泳产物验证 | 第21页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第21-22页 |
| ·H19测序结果及统计 | 第22-24页 |
| ·冷冻保护剂对精子H19 ICR的DNA甲基化程度的影响 | 第24-25页 |
| ·冷冻过程及冷冻时间对精子H19ICR的DNA甲基化程度的影响 | 第25页 |
| ·MEST测序结果及统计 | 第25页 |
| ·MEST基因ICR邱G各位点甲基化状态分析 | 第25-27页 |
| ·冷冻保护剂对精子MEST ICR的DNA甲基化程度的影响 | 第27页 |
| ·冷冻及冷冻时间长短对精子MEST ICR的DNA甲基化程度的影响 | 第27页 |
| 4. 实验讨论 | 第27-29页 |
| 参考文献 | 第29-31页 |
| 第二部分：冷冻技术对精子结构的影响 | 第31-41页 |
| 1. 实验材料 | 第31-32页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·主要溶液 | 第31-32页 |
| 2. 实验方法 | 第32-37页 |
| ·标本采集与分组 | 第32页 |
| ·精液冷冻复苏 | 第32-33页 |
| ·精子DNA完整性检测 | 第33-34页 |
| ·精子膜完整性检测 | 第34-35页 |
| ·精子顶体完整性检测 | 第35-37页 |
| 3. 实验结果 | 第37页 |
| ·精子DNA完整性的比较 | 第37页 |
| ·精子膜完整性的化较 | 第37页 |
| ·精子顶体完整率的比较 | 第37页 |
| 4. 实验讨论 | 第37-40页 |
| 参考文献 | 第40-41页 |
| 第三部分：“雪域圣宝”对人类精子影响体外实验 | 第41-50页 |
| 1. 实验材料 | 第41-42页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41-42页 |
| 2. 实验方法 | 第42-46页 |
| ·标本采集与分组 | 第42页 |
| ·精子活力及活力延迟的影响 | 第42页 |
| ·PSA法检测精子顶体完整性 | 第42-43页 |
| ·ELISA方法评估精子的氧化损伤程度 | 第43-45页 |
| ·伊红-苯胺黑法评估膜完整性 | 第45-46页 |
| 3. 实验结果 | 第46-48页 |
| ·不同时点CASA分析精子活力及活力延迟影响的结果 | 第46-48页 |
| ·精子顶体完整率评估结果 | 第48页 |
| ·氧化损伤评估 | 第48页 |
| ·精子质膜完整性评估的结果 | 第48页 |
| 4. 实验讨论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-50页 |
| 文献综述 | 第50-58页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 英文缩略词表(Abbreviation) | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 个人简历 | 第61-62页 |
