| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 第一章 材料和方法 | 第12-23页 |
| 1 材料 | 第12-14页 |
| ·PCR引物,菌株,质粒 | 第12页 |
| ·培养基 | 第12-13页 |
| ·试剂与溶液配制 | 第13-14页 |
| ·主要设备 | 第14页 |
| 2 方法 | 第14-23页 |
| ·目的基因的合成及表达载体的构建 | 第14-19页 |
| ·采用毕赤酵母体系表达biscfv和dmDT390-biscfv重组蛋白 | 第19-21页 |
| ·biscfv和dmDT390-biscfv蛋白纯化 | 第21-23页 |
| 第二章 实验结果 | 第23-27页 |
| 1 目的基因的合成和表达载体的构建 | 第23-24页 |
| ·目的基因的合成 | 第23-24页 |
| ·表达载体的构建 | 第24页 |
| 2 采用毕赤酵母体系表达biscfv和dmDT390-biscfv重组蛋白 | 第24-26页 |
| ·biscfv蛋白 | 第24-25页 |
| ·dmDT390-biscfv蛋白 | 第25-26页 |
| 3 蛋白纯化 | 第26-27页 |
| ·biscfv蛋白纯化 | 第26页 |
| ·dmDT390-biscfv蛋白纯化 | 第26-27页 |
| 第三章 讨论 | 第27-30页 |
| 1 目的基因合成及表达载体的构建 | 第27-28页 |
| ·装配PCR法 | 第27-28页 |
| ·构建表达载体 | 第28页 |
| 2 毕赤酵母体系表达biscfv和dmDT390-biscfv蛋白 | 第28-29页 |
| ·质粒线性化 | 第28页 |
| ·蛋白表达 | 第28页 |
| ·SDS-PAGE和Western blot | 第28-29页 |
| 3 蛋白纯化 | 第29-30页 |
| ·硫酸铵沉淀 | 第29页 |
| ·透析 | 第29页 |
| ·镍柱纯化 | 第29页 |
| ·超滤 | 第29-30页 |
| 结论 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-33页 |
| 附录 | 第33-38页 |
| 致谢 | 第38-39页 |
| 文献综述 | 第39-46页 |
| 参考文献 | 第44-46页 |
| 作者简历 | 第46页 |
