摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
目录 | 第7-9页 |
第一章 前言 | 第9-13页 |
1 椰子简介 | 第9页 |
2 椰子油简介 | 第9-10页 |
3 椰子胚乳的分子生物学研究进展 | 第10页 |
4 抑制消减杂交法的选择 | 第10-11页 |
5 研究目的及意义 | 第11页 |
6 实验技术路线 | 第11-13页 |
第二章 材料方法 | 第13-23页 |
1 实验材料 | 第13页 |
2 试剂盒耗材 | 第13-14页 |
3 实验方法 | 第14-18页 |
·椰肉油脂提取及脂肪酸甲酯化 | 第14-15页 |
·油脂提取 | 第14页 |
·脂肪酸甲酯化 | 第14-15页 |
·椰肉总RNA提取 | 第15页 |
·SMARTer~(TM) PCR cDNA合成 | 第15页 |
·柱层析法纯化双链cDNA | 第15-16页 |
·抑制消减杂交 | 第16-17页 |
·纯化的ds cDNA用Rsa I酶切消化,再纯化 | 第16页 |
·接头连接 | 第16页 |
·两轮差减杂交 | 第16-17页 |
·两轮PCR扩增,纯化 | 第17页 |
·TA克隆和电击转化 | 第17-18页 |
4 测序所有挑选的克隆 | 第18页 |
5 生物信息学分析 | 第18-19页 |
6 荧光定量PCR验证文库的有效性 | 第19-23页 |
·荧光定量的cDNA第一链合成 | 第22页 |
·荧光定量 | 第22-23页 |
第三章 结果与分析 | 第23-55页 |
1 三个阶段椰肉样品的脂肪酸分析 | 第23-24页 |
2 椰肉SSH文库的构建和鉴定 | 第24-26页 |
3 核酸电泳检测 | 第26-27页 |
4 SSH文库中EST序列的BLAST hits结果 | 第27-28页 |
5 SSH文库中EST序列的功能分类和Gene ontology(GO)分析 | 第28-34页 |
6 椰肉发育过程中短暂或持续上下调基因的鉴定 | 第34-42页 |
7 实时荧光定量PCR和103个基因的表达谱聚类图 | 第42-45页 |
8 脂肪酸生物合成和代谢的KEGG途径以及淀粉、蔗糖和甲烷的代谢途径 | 第45-55页 |
第四章 讨论 | 第55-61页 |
第五章 结论 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
附录一 发表的论文 | 第69-71页 |
附录二 脂肪酸含量检测图表 | 第71-77页 |
附录三 常用实验方法与步骤 | 第77-83页 |
致谢 | 第83页 |