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椰肉发育过程中差异表达基因的分离和功能注释

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-9页
第一章 前言第9-13页
 1 椰子简介第9页
 2 椰子油简介第9-10页
 3 椰子胚乳的分子生物学研究进展第10页
 4 抑制消减杂交法的选择第10-11页
 5 研究目的及意义第11页
 6 实验技术路线第11-13页
第二章 材料方法第13-23页
 1 实验材料第13页
 2 试剂盒耗材第13-14页
 3 实验方法第14-18页
   ·椰肉油脂提取及脂肪酸甲酯化第14-15页
     ·油脂提取第14页
     ·脂肪酸甲酯化第14-15页
   ·椰肉总RNA提取第15页
   ·SMARTer~(TM) PCR cDNA合成第15页
   ·柱层析法纯化双链cDNA第15-16页
   ·抑制消减杂交第16-17页
     ·纯化的ds cDNA用Rsa I酶切消化,再纯化第16页
     ·接头连接第16页
     ·两轮差减杂交第16-17页
   ·两轮PCR扩增,纯化第17页
   ·TA克隆和电击转化第17-18页
 4 测序所有挑选的克隆第18页
 5 生物信息学分析第18-19页
 6 荧光定量PCR验证文库的有效性第19-23页
   ·荧光定量的cDNA第一链合成第22页
   ·荧光定量第22-23页
第三章 结果与分析第23-55页
 1 三个阶段椰肉样品的脂肪酸分析第23-24页
 2 椰肉SSH文库的构建和鉴定第24-26页
 3 核酸电泳检测第26-27页
 4 SSH文库中EST序列的BLAST hits结果第27-28页
 5 SSH文库中EST序列的功能分类和Gene ontology(GO)分析第28-34页
 6 椰肉发育过程中短暂或持续上下调基因的鉴定第34-42页
 7 实时荧光定量PCR和103个基因的表达谱聚类图第42-45页
 8 脂肪酸生物合成和代谢的KEGG途径以及淀粉、蔗糖和甲烷的代谢途径第45-55页
第四章 讨论第55-61页
第五章 结论第61-63页
参考文献第63-69页
附录一 发表的论文第69-71页
附录二 脂肪酸含量检测图表第71-77页
附录三 常用实验方法与步骤第77-83页
致谢第83页

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