中文摘要 | 第1-13页 |
Abstract | 第13-15页 |
1 前言 | 第15-40页 |
·植物开花基因 FT 的研究进展 | 第15-30页 |
·植物开花基因 FT 的发现及发展 | 第16-18页 |
·植物开花基因 FT 的作用模式 | 第16-17页 |
·植物 FT 基因家族 | 第17-18页 |
·植物开花信号途径 | 第18-21页 |
·植物开花基因 FT 的作用 | 第20-21页 |
·光周期途径对 FT 基因的调控 | 第20页 |
·春化途径和自主途径对 FT 基因的调控 | 第20-21页 |
·小麦春化开花途径 | 第21-27页 |
·小麦春化基因 Vrn-1 | 第22-23页 |
·小麦春化基因 Vrn-2 | 第23页 |
·小麦春化基因 Vrn-3 | 第23-24页 |
·小麦春化途径中主要春化基因的相互作用 | 第24-27页 |
·短柄草开花途径 | 第27页 |
·水稻开花途径 | 第27-29页 |
·.植物开花基因 FT 基因研究前景 | 第29-30页 |
·植物开花基因的克隆和功能分析 | 第30-40页 |
·同源克隆 | 第30-31页 |
·图位克隆 | 第31页 |
·转座子标签法 | 第31-32页 |
·目的基因的差异表达分析 | 第32-33页 |
·电子克隆技术 | 第33-34页 |
·植物基因的过量表达分析 | 第34页 |
·植物基因的 RNA 沉默分析 | 第34-35页 |
·植物组织培养及有关转化技术 | 第35-37页 |
·农杆菌介导的转化方法 | 第36页 |
·基因枪轰击转化方法 | 第36-37页 |
·花粉管通道转化方法 | 第37页 |
·TILLING 技术 | 第37-39页 |
·Gateway 技术 | 第39-40页 |
2 材料与方法 | 第40-59页 |
·实验材料 | 第40页 |
·植物材料及培养条件 | 第40页 |
·菌株和载体 | 第40页 |
·实验方法 | 第40-59页 |
·DNA 提取步骤 | 第40-41页 |
·DNA 提取试剂的配制 | 第41页 |
·RNA 提取步骤 | 第41-42页 |
·RNA 提取试剂的配制 | 第42页 |
·cDNA 的合成 | 第42-43页 |
·高保真 PCR 扩增 | 第43页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第43页 |
·目的片段胶回收 | 第43-44页 |
·Gateway 系统表达载体构建 | 第44-45页 |
·Gateway 反应体系 | 第45-46页 |
·FT 基因同源克隆及表达载体构建 | 第46-47页 |
·T-载体连接 | 第47页 |
·大肠杆菌感受态制备 | 第47-48页 |
·质粒提取 | 第48页 |
·小麦幼胚基因枪转化过程 | 第48-52页 |
·取材培养 | 第49页 |
·表达载体准备 | 第49页 |
·基因枪转化 | 第49-50页 |
·恢复培养 | 第50页 |
·筛选培养 | 第50页 |
·再生移苗 | 第50页 |
·转基因苗检测 | 第50-51页 |
·基因枪转化的培养基及试剂配制 | 第51-52页 |
·电击法农杆菌感受态制备 | 第52页 |
·短柄草农杆菌转化过程 | 第52-54页 |
·诱愈继代培养 | 第52-53页 |
·农杆菌侵染 | 第53页 |
·筛选再生移苗 | 第53-54页 |
·转基因苗鉴定 | 第54页 |
·短柄草组培需用培养基及试剂的配制 | 第54页 |
·实时荧光定量分析 | 第54-56页 |
·荧光定量准备 | 第54-55页 |
·荧光定量引物效率测定 | 第55页 |
·荧光定量检测转基因植株基因表达 | 第55-56页 |
·TILLING PCR 反应过程 | 第56-57页 |
·CEL1 酶的提取 | 第57-59页 |
3 结果与分析 | 第59-80页 |
·植物开花基因 FT 的同源比较 | 第59-64页 |
·麦类作物主要开花基因的比较 | 第59页 |
·麦类作物主要开花基因的分布 | 第59-61页 |
·大麦和短柄草的 FT 基因家族 | 第61-64页 |
·FT 基因相关表达载体的构建 | 第64-67页 |
·入门载体的构建 | 第65页 |
·终端表达载体的构建 | 第65-67页 |
·FT 基因表达载体的转化 | 第67-72页 |
·FT 相关转基因小麦的获得 | 第67-71页 |
·FT 基因的过量表达 | 第69页 |
·FT 基因的沉默表达 | 第69-71页 |
·FT 沉默转基因植株的 T1代表型 | 第70-71页 |
·短柄草 BdFT 基因的遗传转化 | 第71-72页 |
·短柄草 BdFT 基因的过量表达 | 第71-72页 |
·短柄草 BdFT 基因的沉默表达 | 第72页 |
·转基因植株中目标基因的定量表达 | 第72-77页 |
·小麦 FT 基因的沉默对其它基因的影响 | 第72-75页 |
·小麦春化途径中基因的表达 | 第73页 |
·小麦光周期开花途径中基因的表达 | 第73-75页 |
·短柄草 FT 基因的沉默对其他基因的影响 | 第75-76页 |
·短柄草春化途径中基因的表达 | 第75页 |
·短柄草光周期开花途径中基因的表达 | 第75-76页 |
·FT1 沉默转基因小麦和短柄草中 FT-like 基因的表达 | 第76-77页 |
·TILLING 技术筛选大麦中开花基因突变体 | 第77-80页 |
4 讨论 | 第80-83页 |
·FT 基因家族在麦类作物中的分布 | 第80页 |
·小麦和短柄草的遗传转化 | 第80-81页 |
·FT 基因与开花结实关系 | 第81页 |
·大麦突变群体春化途径相关突变体的筛选 | 第81页 |
·FT 基因与开花模式 | 第81-83页 |
5 结论 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-94页 |
附录 | 第94-97页 |
致谢 | 第97-98页 |
攻读博士期间发表论文 | 第98页 |