摘要 | 第1-3页 |
Abstract | 第3-4页 |
缩略语表 | 第4-5页 |
目录 | 第5-7页 |
第一章 口蹄疫病毒外源序列插入位点的研究进展 | 第7-13页 |
1. 前导蛋白 L 区引入外源基因片段 | 第7-8页 |
2. VP1 区引入外源基因 | 第8-9页 |
3. VP1 区与 2A 蛋白区之间引入外源基因 | 第9页 |
4. 3A 蛋白区引入外源基因 | 第9页 |
5. 3B 蛋白区引入外源基因 | 第9-13页 |
第二章 口蹄疫抗原表位缺失标记疫苗候选株的构建 | 第13-20页 |
1 材料与方法 | 第13-17页 |
·材料 | 第13-14页 |
·载体及试剂 | 第13-14页 |
·实验设备 | 第14页 |
·方法 | 第14-17页 |
·实验用试剂的配制 | 第14页 |
·氨苄青霉素稀释 | 第14页 |
·抗性培养液以及培养基的制备 | 第14页 |
·引物的设计与合成 | 第14-15页 |
·目的片段的扩增 | 第15页 |
·3D 区域抗原表位的突变 | 第15-16页 |
·重组质粒的构建 | 第16-17页 |
2 结果 | 第17-18页 |
·重组质粒的扩增和鉴定 | 第17-18页 |
·重组质粒序列分析 | 第18页 |
3 讨论 | 第18-20页 |
第三章 ASIA 1 型口蹄疫 3D 基因抗原表位缺失全长 CDNA 的拯救及生物学特性 | 第20-28页 |
1 材料与方法 | 第20-24页 |
·材料 | 第20-21页 |
·口蹄疫感染性克隆 | 第20页 |
·转染用细胞及试剂 | 第20页 |
·实验设备 | 第20-21页 |
·方法 | 第21-24页 |
·重组病毒的拯救 | 第21页 |
·重组病毒遗传稳定性分析 | 第21-23页 |
·重组病毒 RASIA1-3DM 的生学特性的检测 | 第23-24页 |
·对 BHK-21 细胞的适应性及 TCID_(50)测定 | 第23页 |
·对乳鼠的毒力及 LD_(50) | 第23页 |
·实时定量荧光 PCR | 第23-24页 |
2. 结果 | 第24-27页 |
·重组病毒的拯救 | 第24页 |
·重组病毒遗传稳定性分析 | 第24-25页 |
·对 BHK-21 细胞的适应性及毒力(TCID_(50))测定 | 第25页 |
·对乳鼠的毒力 LD_(50) 测定 | 第25页 |
·实时定量荧光 PCR | 第25-27页 |
3. 讨论 | 第27-28页 |
第四章 口蹄疫抗原表位缺失标记疫苗候选株的致病性及与亲本毒诱导抗体差异性分析 | 第28-35页 |
1 材料与方法 | 第28-32页 |
·材料 | 第28-29页 |
·实验动物 | 第28-29页 |
·实验试剂 | 第29页 |
·实验设备 | 第29页 |
·方法 | 第29-32页 |
·实验动物攻毒 | 第29页 |
·日常采样 | 第29页 |
·动物处理 | 第29页 |
·血毒症测定 | 第29页 |
·抗体分析 | 第29-30页 |
·结构蛋白抗体的分析 | 第29-30页 |
·非结构蛋白抗体的分析 | 第30页 |
·被检血清抗体滴度测定 | 第30-31页 |
·间接免疫荧光 | 第31页 |
·多肽的合成 | 第31页 |
·WESTERN BLOT 实验 | 第31-32页 |
2 结果 | 第32-34页 |
·结构蛋白的分析 | 第32页 |
·非结构蛋白抗体的分析 | 第32页 |
·间接免疫荧光 | 第32页 |
·R 值的检测 | 第32-33页 |
·W ESTERN BLOT 结果 | 第33-34页 |
3.讨论 | 第34-35页 |
全文结论 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
作者简介 | 第43-44页 |
导师简介 | 第44-45页 |