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普通小麦春化基因VRN1、VRN3过表达及RNA干扰载体的构建及遗传转化

致谢第1-8页
摘要第8-9页
1 文献综述第9-18页
   ·植物的开花诱导途径第9-10页
     ·光周期途径第9页
     ·春化途径第9-10页
     ·自主途径第10页
     ·赤霉素途径第10页
   ·拟南芥中春化作用分子调控机制第10-12页
   ·春化作用对小麦生长发育的调控第12页
   ·小麦春化作用分子调控机制第12-17页
     ·VRN1 基因的研究第13-14页
     ·VRN2 基因的研究第14页
     ·VRN3 基因的研究第14-15页
     ·VRN 基因对小麦春化的调控第15-17页
   ·农杆菌转化研究进展第17-18页
2 引言第18-19页
3 材料与方法第19-31页
   ·材料第19-21页
     ·植物材料第19页
     ·菌株与质粒载体第19页
     ·分子生物学试剂及仪器第19-20页
     ·PCR 引物第20-21页
     ·细菌培养基第21页
   ·试验方法第21-31页
     ·幼穗分化及春化基因表达分析试验材料处理第21-22页
     ·RNA 的提取、纯化和反转录第22-23页
       ·RNA 的提取和纯化第22-23页
       ·cDNA 第一链的合成第23页
     ·VRN1 和 VRN3 基因的表达特性分析第23-24页
     ·VRN1 和 VRN3 表达载体的构建第24-26页
       ·VRN1 过表达载体和 VRN3 过表达载体的构建第24页
       ·VRN1 RNA 干扰表达载体的构建第24-25页
       ·VRN3 RNA 干扰表达载体的构建第25-26页
     ·载体构建过程中的实验技术第26-28页
       ·PCR 产物的回收第26-27页
       ·目的片段与载体的连接第27页
       ·重组载体的转化第27页
       ·阳性克隆的筛选、鉴定及测序第27-28页
     ·根癌农杆菌介导的小麦遗传转化第28-29页
       ·农杆菌感受态细胞的制备第28页
       ·构建的表达载体在农杆菌中的转化第28-29页
       ·农杆菌介导的小麦茎尖转化第29页
     ·转基因植株的鉴定第29-31页
       ·除草剂对 T_1 代的初步筛选第29页
       ·T_1代小麦 DNA 的提取第29-30页
       ·转基因植株的 PCR 检测第30-31页
4 结果与分析第31-43页
   ·不同春化处理下小麦幼穗分化的进程第31-32页
   ·VRN1 基因在叶片和茎尖中的表达特性分析第32-33页
   ·VRN3 基因在叶片和茎尖中的表达特性分析第33-34页
   ·VRN1 和 VRN3 过表达载体的构建第34-36页
     ·VRN1 过表达载体的构建第34-35页
     ·VRN3 过表达载体的构建第35-36页
   ·VRN1 和 VRN3 RNA 干扰载体的构建第36-38页
     ·VRN1 的 RNA 干扰载体的构建第36-37页
     ·VRN3 的 RNA 干扰载体的构建第37-38页
   ·农杆菌介导的小麦茎尖遗传转化及转基因后代筛选第38-43页
     ·农杆菌介导的小麦茎尖遗传转化第38-39页
     ·T1代植株的除草剂抗性筛选第39-40页
     ·转基因 T1代植株 PCR 鉴定第40-43页
       ·BAR 基因 PCR 检测第40-41页
       ·目的基因的 PCR 检测第41-43页
5 结论与讨论第43-45页
   ·春化基因 VRN1 对开花的调控第43-44页
   ·VRN1 和 VRN3 在开花调控中的互作第44页
   ·小麦春化发育的分子调控第44-45页
参考文献第45-51页
ABSTRACT第51-52页

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