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农杆菌介导的抗逆基因GmGT-2A及抗草甘膦标记基因CP4-EPSPS转化大豆的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
缩略词第9-10页
目录第10-12页
1 文献综述第12-29页
   ·植物对逆境的应答及其抗性机制第13-15页
     ·高盐胁迫对植物生长发育影响第14页
     ·低温胁迫对植物生长发育的影响第14页
     ·干旱胁迫对植物生长发育的影响第14-15页
   ·大豆抗旱相关转录因子研究进展第15-22页
     ·转录因子的结构和功能第16页
     ·抗旱相关转录因子第16-22页
       ·AP2/EREBPs家族转录因子第16-18页
       ·bZIP家族转录因子第18页
       ·MYB家族转录因子第18-19页
       ·WRKY家族转录因子第19-20页
       ·NAC家族转录因子第20-21页
       ·其他家族抗旱转录因子第21-22页
   ·大豆遗传转化方法研究进展第22-26页
     ·基因枪法第22-23页
     ·农杆菌介导法第23页
     ·花粉管通道法第23页
     ·电击法第23-24页
     ·大豆受体系统的选择第24页
     ·大豆基因型的选择第24-25页
     ·筛选标记基因的选择第25-26页
   ·转基因作物的生物安全性第26页
   ·转基因大豆的食用和环境安全性的研究第26-27页
   ·小结第27-29页
2 含抗草甘膦CP4-EPSPS基因和耐逆相关Trihelix类转录因子GmGT-2A基因的植物表达载体的构建及转化验证第29-42页
   ·材料和方法第30-34页
     ·材料第30页
     ·方法第30-34页
       ·CP4-EPSPS与GmGT-2A基因的高保真扩增第30-31页
       ·高保真PCR产物的TA克隆与验证测序第31页
       ·重组质粒pES002的构建与验证第31-32页
       ·重组质粒pES002-GmGT-2A的构建与验证第32-33页
       ·新构建植物表达载体的功能验证第33-34页
   ·结果分析第34-40页
     ·GmGT-2A与CP4-EPSPS基因全长的克隆与测序验证第34-35页
     ·植物表达载体pES002的构建与验证第35-36页
     ·植物表达载体pES002-GmGT-2A的构建与验证第36-37页
     ·转基因拟南芥的筛选标记基因检测与抗除草剂筛选第37-39页
     ·转基因拟南芥株系的耐逆基因检测与耐盐性鉴定第39-40页
   ·结论第40页
   ·讨论第40-42页
3 农杆菌介导的大豆遗传转化第42-57页
   ·材料与方法第42-50页
     ·实验材料第42-46页
       ·植物材料第42-43页
       ·主要化学试剂及药品溶液配制第43-45页
       ·主要仪器和设备第45页
       ·培养基配方第45-46页
     ·实验方法第46-50页
       ·种子的消毒第46页
       ·子叶节法第46-47页
       ·胚尖法第47-48页
       ·生根培养第48页
       ·植株的驯化与移栽第48-49页
       ·转基因大豆小量DNA的提取第49-50页
   ·结果与分析第50-54页
     ·大豆的遗传转化第50-51页
     ·植株的再生及再生率的统计第51页
     ·转基因大豆幼苗的草甘膦抗性筛选第51页
     ·转基因大豆的分子检测第51-54页
   ·讨论第54-56页
   ·结论第56-57页
参考文献第57-72页
攻读学位期间取得的研究成果第72-73页
致谢第73-74页

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