| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-20页 |
| ·NK细胞研究进展概述 | 第9-15页 |
| ·NK细胞 | 第9页 |
| ·NK细胞功能和活化机制 | 第9-11页 |
| ·NK细胞的受体 | 第11-13页 |
| ·NK细胞与肿瘤细胞的杀伤机制 | 第13-15页 |
| ·CD96分子的研究进展 | 第15-20页 |
| ·CD96的发现,及结构特征 | 第15-17页 |
| ·CD96同源性分子 | 第17-18页 |
| ·CD96的识别与活化机制的研究进展 | 第18-20页 |
| 2 引言 | 第20-21页 |
| 3 材料和方法 | 第21-40页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第21-26页 |
| ·细胞与基因 | 第21页 |
| ·引物 | 第21-22页 |
| ·载体质粒 | 第22页 |
| ·仪器 | 第22-23页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第23-24页 |
| ·溶液配制 | 第24-26页 |
| ·技术路线 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-40页 |
| ·CD96V1-pET21a表达质粒的构建 | 第27-31页 |
| ·CD96V1结构域的小量表达分析 | 第31-32页 |
| ·CD96V1结构域包涵体的大量制备 | 第32页 |
| ·CD96V1结构域包涵体的复性 | 第32-33页 |
| ·CD96V1结构域蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| ·CD96V1结构域蛋白的结晶 | 第34页 |
| ·CD96V1结构域蛋白的Sulfo-EGS交联实验 | 第34页 |
| ·CD96V1结构域蛋白分析超速离心 | 第34-35页 |
| ·CD96V1生物素化及其突变体生物素化克隆的构建 | 第35-37页 |
| ·CD96V1及其突变体生物素化和四聚体制备 | 第37-38页 |
| ·CD155真核表达载体构建 | 第38页 |
| ·细胞培养及表达CD155的细胞鉴定 | 第38-39页 |
| ·CD155-GFP转染CHO细胞 | 第39页 |
| ·CD96V1及其突变体的四聚体染色 | 第39-40页 |
| 4 结果与分析 | 第40-55页 |
| ·CD96V1原核表达质粒的构建 | 第40-41页 |
| ·CD96V1结构域的小量表达分析 | 第41-42页 |
| ·CD96V1结构域蛋白的纯化 | 第42-44页 |
| ·CD96V1结构域蛋白结晶的生长 | 第44-45页 |
| ·CD96V1结构域蛋白SULFO-EGS交联实验 | 第45-46页 |
| ·CD96V1结构域蛋白分析超速离心 | 第46页 |
| ·CD96V1结构域晶体的衍射数据收集及处理 | 第46-47页 |
| ·CD96V1结构域及其突变体(生物素化)克隆的构建 | 第47-50页 |
| ·CD96V1结构域及其突变体(生物素化)四聚体蛋白的制备 | 第50-51页 |
| ·细胞培养及表达CD155的细胞鉴定 | 第51-52页 |
| ·CD155真核表达载体的构建 | 第52-53页 |
| ·CD155-GFP转染CHO细胞 | 第53页 |
| ·CHO细胞染色及流式细胞术鉴定 | 第53-55页 |
| 5 讨论与展望 | 第55-57页 |
| ·CD96V1结构域晶体结构分析的意义 | 第55页 |
| ·CD96二聚体形成的作用力 | 第55-56页 |
| ·CD96分子的展望 | 第56-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 附录 | 第62-65页 |
| 缩略词表 | 第62-64页 |
| 载体图谱 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |
