| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-17页 |
| ·手足口病与手足口病病毒 | 第10页 |
| ·干扰素 | 第10-16页 |
| ·ISG15 | 第11页 |
| ·Mx GTPase | 第11-12页 |
| ·OAS-RNaseL | 第12-14页 |
| ·PKR | 第14页 |
| ·IFITM | 第14-16页 |
| ·Tet 调控系统 | 第16页 |
| ·研究目的及意义 | 第16-17页 |
| 第2章 pTRE2-IFITM1/2/3-FLAG 重组质粒的构建 | 第17-25页 |
| ·材料 | 第17-18页 |
| ·实验材料及试剂 | 第17页 |
| ·主要试剂配制 | 第17页 |
| ·主要实验仪器 | 第17-18页 |
| ·方法 | 第18-22页 |
| ·pTRE-2 质粒提取 | 第18-19页 |
| ·pTRE-2 载体臂的制备 | 第19-20页 |
| ·IFITM1/2/3 基因克隆 | 第20-21页 |
| ·重组质粒的构建 | 第21页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第21-22页 |
| ·结果 | 第22-23页 |
| ·pTRE2-IFITM1/2/3-FLAG 重组质粒的鉴定 | 第22-23页 |
| ·讨论 | 第23-25页 |
| 第3章 HeLa/Tet 单克隆细胞的筛选及鉴定 | 第25-29页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·实验材料及试剂 | 第25页 |
| ·培养基及缓冲液的配制 | 第25页 |
| ·主要实验仪器 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-27页 |
| ·阳性 pTet-on 质粒提取 | 第25-26页 |
| ·HeLa 细胞培养 | 第26页 |
| ·HeLa/Tet 单克隆细胞的构建 | 第26-27页 |
| ·结果 | 第27-28页 |
| ·HeLa/Tet 单克隆细胞的鉴定 | 第27-28页 |
| ·讨论 | 第28-29页 |
| 第4章 HeLa/IFITM1/2/3-FLAG 单克隆细胞的筛选及鉴定 | 第29-33页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·实验材料及试剂 | 第29页 |
| ·主要试剂配制 | 第29页 |
| ·主要实验仪器 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-31页 |
| ·pTRE-IFITM1/2/3-FLAG 及 pTK-Hyg 质粒提取 | 第30页 |
| ·pTet-on 单克隆细胞系转染 | 第30页 |
| ·pTRE-IFITM1/2/3-FLAG 阳性细胞团筛选 | 第30-31页 |
| ·结果 | 第31-32页 |
| ·pTRE-IFITM1/2/3-FLAG 阳性细胞团鉴定 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| 第5章 细胞活力的测定及荧光定量 PCR 检测 IFITM 蛋白对 CA16 病毒的抑制作用 | 第33-39页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·实验材料及试剂 | 第33页 |
| ·主要实验仪器 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-35页 |
| ·诱导表达 IFITM 蛋白稳定细胞系细胞活力分析 | 第33-34页 |
| ·荧光定量 PCR 检测 IFITM 蛋白对 CA16 病毒的抑制作用 | 第34-35页 |
| ·细胞总 RNA 提取 | 第34页 |
| ·cDNA 第一条链合成 | 第34-35页 |
| ·Realtime PCR 检测 CA16 拷贝数 | 第35页 |
| ·结果 | 第35-37页 |
| ·诱导表达 IFITMs 蛋白稳定细胞系细胞活力分析 | 第35-36页 |
| ·IFITM 对 CA16 的抗病毒作用 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 结论 | 第39-41页 |
| 参考文献 | 第41-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
