摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
目录 | 第6-8页 |
第一部分 研究背景 | 第8-18页 |
一、Mda-7 基因及其转录调控机制的研究进展 | 第8-12页 |
(一) 基因发现与命名 | 第8-9页 |
(二) 基因结构与表达 | 第9页 |
(三) 基因功能 | 第9-12页 |
二、组蛋白乙酰化修饰与真核生物基因的转录调控 | 第12-17页 |
(一) 组蛋白去乙酰化酶(HDAC)与组蛋白乙酰转移酶(HAT) | 第12-13页 |
(二) 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 | 第13-17页 |
三、本论文的内容及意义 | 第17-18页 |
(一) 立题依据 | 第17页 |
(二) 本文的研究内容和意义 | 第17-18页 |
第二部分 实验材料与方法 | 第18-27页 |
一、实验材料 | 第18页 |
(一) 质粒 | 第18页 |
(二) 蛋白质和抗体 | 第18页 |
(三) 哺乳动物细胞系 | 第18页 |
(四) 试剂 | 第18页 |
二、实验方法 | 第18-27页 |
Ⅰ. 生物信息学分析 | 第19页 |
Ⅱ. 分子生物学实验方法 | 第19-23页 |
(一) 分子克隆 | 第19页 |
(二) DNA 的琼脂糖电泳 | 第19页 |
(三) 质粒大量制备的方法 | 第19-20页 |
(四) 哺乳动物细胞总RNA 的提取 | 第20-21页 |
(五) 逆转录(Reverse Transcription ,RT) | 第21页 |
(六) PCR 和Real-time PCR | 第21-23页 |
Ⅲ. 细胞生物学实验方法 | 第23-26页 |
(一) 哺乳动物细胞系的培养 | 第23页 |
(二) 真核生物细胞的瞬时转染和荧光素酶报告基因检测 | 第23页 |
(三) 蛋白质的Western Blotting 分析 | 第23-24页 |
(四) 染色质免疫沉淀实验(Chromatin immunoprecipitation ,ChIP) | 第24-26页 |
Ⅳ. 统计分析 | 第26-27页 |
第三部分 实验结果与分析 | 第27-34页 |
一、HDAC 抑制剂激活mda-7 的表达 | 第27-28页 |
二、转录因子Sp1 诱导mda-7 表达,HDAC4 部分逆转这一作用 | 第28-31页 |
三、HDAC 抑制剂TSA 通过提高mda-7 启动子处的乙酰化水平激活mda-7 的表达 | 第31-34页 |
第四部分 讨论 | 第34-36页 |
结论 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
在学期间公开发表论文及著作情况 | 第45页 |