| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 缩略语表 | 第11-14页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-29页 |
| ·PRRSV的研究进展 | 第14-16页 |
| ·PRRSV的分类 | 第14页 |
| ·PRRSV的基因多样性 | 第14-15页 |
| ·PRRSV的传播 | 第15页 |
| ·PRRSV的复制周期 | 第15-16页 |
| ·PRRSV的防控 | 第16页 |
| ·抗病毒天然免疫概述 | 第16-22页 |
| ·Toll样受体(TLR)途径 | 第17-19页 |
| ·胞浆受体及其信号通路 | 第19-20页 |
| ·IFN信号通路 | 第20-22页 |
| ·PRRSV与天然免疫 | 第22-27页 |
| ·PRRSV与TLR | 第23-24页 |
| ·PRRSV通过IRF介导的RIG-I/MDA5途径靶向IFN增强子 | 第24-25页 |
| ·PRRSV与NF-κB信号通路 | 第25-26页 |
| ·PRRSV抑制JAK-STAT通路和ISG表达 | 第26-27页 |
| ·单股正链RNA病毒基因组UTR简述 | 第27-29页 |
| ·UTR与病毒的复制 | 第27页 |
| ·UTR与病毒的转录和翻译 | 第27-28页 |
| ·UTR的其它功能 | 第28-29页 |
| 第2章 研究目的与意义 | 第29-30页 |
| 第3章 材料与方法 | 第30-43页 |
| ·试验材料 | 第30-33页 |
| ·菌株与细胞 | 第30页 |
| ·质粒与载体 | 第30-31页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第31页 |
| ·培养基和抗生素的其配制 | 第31-32页 |
| ·主要缓冲液和试剂及其配制 | 第32-33页 |
| ·主要实验仪器及设备 | 第33页 |
| ·分子生物学分析软件 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-43页 |
| ·病毒的增殖与滴度测定 | 第33-34页 |
| ·细胞、病毒样品的总RNA的提取和cDNA的合成 | 第34-35页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第35-36页 |
| ·PCR产物或酶切产物回收与纯化 | 第36页 |
| ·PCR产物和质粒载体的酶切 | 第36-37页 |
| ·外源片段与质粒载体的连接 | 第37-38页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第38-39页 |
| ·连接产物的转化 | 第39页 |
| ·重组质粒的制备与鉴定 | 第39-40页 |
| ·乙醇沉淀DNA | 第40页 |
| ·体外转录及纯化UTR | 第40-41页 |
| ·UTR末端去磷酸化 | 第41页 |
| ·UTR的变性及复性处理 | 第41页 |
| ·质粒转染(脂质体介导转染法) | 第41页 |
| ·双荧光素酶检测实验 | 第41-42页 |
| ·SYBR Green Ⅰ实时定量PCR | 第42页 |
| ·ELISA检测IFN-β表达量 | 第42-43页 |
| 第4章 结果与分析 | 第43-51页 |
| ·PRRSV WUH3株UTR体外转录模板的制备 | 第43页 |
| ·PRRSV WUH3 UTR在Marc-145细胞中诱导IFN-β | 第43-45页 |
| ·5'-ppp增强UTR诱导IFN-β的能力 | 第45页 |
| ·UTR的结构增强其对IFN-β的诱导能力 | 第45-46页 |
| ·不同UTR缺失突变体诱导IFN-β的能力存在差异 | 第46-47页 |
| ·通过SiRNA技术初步探究UTR激活IFN-β的信号通路 | 第47-49页 |
| ·UTR诱导IFN-β的生物学意义 | 第49-51页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第51-54页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| ·UTR诱导IFN-β能力的初步研究 | 第51-52页 |
| ·UTR结构在其诱导IFN-β中影响的初步研究 | 第52页 |
| ·UTR诱导IFN-β信号通路的初步研究 | 第52-53页 |
| ·UTR诱导IFN-β生物学意义的简单评价 | 第53页 |
| ·结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
