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羊附红细胞体病流行病学调查及猪附红细胞体粘附作用研究

中文摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略语表第10-12页
第一章 文献综述第12-22页
   ·附红细胞体病研究背景第12-13页
   ·羊附红细胞体病流行病学特点和流行现状第13-14页
   ·羊附红细胞体病诊断方法研究进展第14-16页
     ·病原学诊断第14-15页
     ·血清学诊断第15页
     ·分子生物学诊断第15-16页
   ·附红细胞体的红细胞受体第16-19页
     ·带3蛋白(Band3)第18-19页
     ·血型糖蛋A(GPA)第19页
   ·蛋白质相互作用研究技术第19-22页
     ·酵母双杂交(Yeast Two-Hybrid System)第20页
     ·Pull-down assay第20-21页
     ·Far-western blotting第21-22页
第二章 羊附红细胞体病流行病学调查第22-37页
   ·研究目的与意义第22页
   ·材料与方法第22-29页
     ·菌株及载体第22-23页
     ·试剂及仪器第23-24页
     ·试剂的配制第24页
     ·羊血液样品的采集第24-25页
     ·DNA模板的提取第25-26页
     ·引物设计第26页
     ·反应体系及条件第26页
     ·PCR产物的回收与纯化第26-27页
     ·回收片段与T载体的连接第27页
     ·大肠杆菌DH5α,BL21感受态细胞的制备第27页
     ·连接产物的转化第27-28页
     ·碱裂解法小量提取质粒第28页
     ·质粒的酶切鉴定第28页
     ·反应体系的优化第28-29页
     ·临床样本检测及统计学分析第29页
   ·结果与分析第29-34页
     ·羊附红细胞体16S rRNA质粒的构建与测序第29-30页
     ·羊附红细胞体半巢氏PCR检测方法的建立第30-32页
     ·临床样本检测及统计学分析第32-34页
   ·讨论第34-37页
第三章 猪附红细胞体粘附作用研究第37-64页
   ·研究目的与意义第37页
   ·材料与方法第37-50页
     ·菌株、载体及蛋白第37-39页
     ·试剂及仪器第39-40页
     ·试剂的配制第40-41页
     ·猪红细胞膜蛋白的获取第41页
     ·Far-western blotting第41-42页
     ·猪红细胞基因组的提取第42-44页
     ·猪红细胞膜蛋白Band3、GPA基因的克隆与测序第44-46页
     ·猪红细胞膜蛋白Band3、GPA蛋白表达第46-48页
     ·Pull-down assay第48-50页
   ·结果与分析第50-61页
     ·猪红细胞膜蛋白的获取第50-51页
     ·Far-western blot结果第51-52页
     ·猪红细胞膜蛋白Band3、GPA基因的原核表达第52-53页
     ·猪红细胞膜蛋白Band3、GPA基因的原核表达第53-57页
     ·His-tag pull-down assay结果第57-61页
   ·讨论第61-64页
     ·红细胞膜蛋白Band3和GPA的克隆与表达第61-62页
     ·蛋白相互作用的验证第62-64页
结论第64-65页
参考文献第65-72页
致谢第72-73页
附录第73页

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