中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略语表 | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
·附红细胞体病研究背景 | 第12-13页 |
·羊附红细胞体病流行病学特点和流行现状 | 第13-14页 |
·羊附红细胞体病诊断方法研究进展 | 第14-16页 |
·病原学诊断 | 第14-15页 |
·血清学诊断 | 第15页 |
·分子生物学诊断 | 第15-16页 |
·附红细胞体的红细胞受体 | 第16-19页 |
·带3蛋白(Band3) | 第18-19页 |
·血型糖蛋A(GPA) | 第19页 |
·蛋白质相互作用研究技术 | 第19-22页 |
·酵母双杂交(Yeast Two-Hybrid System) | 第20页 |
·Pull-down assay | 第20-21页 |
·Far-western blotting | 第21-22页 |
第二章 羊附红细胞体病流行病学调查 | 第22-37页 |
·研究目的与意义 | 第22页 |
·材料与方法 | 第22-29页 |
·菌株及载体 | 第22-23页 |
·试剂及仪器 | 第23-24页 |
·试剂的配制 | 第24页 |
·羊血液样品的采集 | 第24-25页 |
·DNA模板的提取 | 第25-26页 |
·引物设计 | 第26页 |
·反应体系及条件 | 第26页 |
·PCR产物的回收与纯化 | 第26-27页 |
·回收片段与T载体的连接 | 第27页 |
·大肠杆菌DH5α,BL21感受态细胞的制备 | 第27页 |
·连接产物的转化 | 第27-28页 |
·碱裂解法小量提取质粒 | 第28页 |
·质粒的酶切鉴定 | 第28页 |
·反应体系的优化 | 第28-29页 |
·临床样本检测及统计学分析 | 第29页 |
·结果与分析 | 第29-34页 |
·羊附红细胞体16S rRNA质粒的构建与测序 | 第29-30页 |
·羊附红细胞体半巢氏PCR检测方法的建立 | 第30-32页 |
·临床样本检测及统计学分析 | 第32-34页 |
·讨论 | 第34-37页 |
第三章 猪附红细胞体粘附作用研究 | 第37-64页 |
·研究目的与意义 | 第37页 |
·材料与方法 | 第37-50页 |
·菌株、载体及蛋白 | 第37-39页 |
·试剂及仪器 | 第39-40页 |
·试剂的配制 | 第40-41页 |
·猪红细胞膜蛋白的获取 | 第41页 |
·Far-western blotting | 第41-42页 |
·猪红细胞基因组的提取 | 第42-44页 |
·猪红细胞膜蛋白Band3、GPA基因的克隆与测序 | 第44-46页 |
·猪红细胞膜蛋白Band3、GPA蛋白表达 | 第46-48页 |
·Pull-down assay | 第48-50页 |
·结果与分析 | 第50-61页 |
·猪红细胞膜蛋白的获取 | 第50-51页 |
·Far-western blot结果 | 第51-52页 |
·猪红细胞膜蛋白Band3、GPA基因的原核表达 | 第52-53页 |
·猪红细胞膜蛋白Band3、GPA基因的原核表达 | 第53-57页 |
·His-tag pull-down assay结果 | 第57-61页 |
·讨论 | 第61-64页 |
·红细胞膜蛋白Band3和GPA的克隆与表达 | 第61-62页 |
·蛋白相互作用的验证 | 第62-64页 |
结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
附录 | 第73页 |