| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 符号说明及缩写词 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-31页 |
| 1 粘细菌简介 | 第13-16页 |
| ·粘细菌的社会学行为 | 第14页 |
| ·粘细菌丰富的次级代谢产物 | 第14-15页 |
| ·粘细菌遗传操作 | 第15-16页 |
| 2 粘细菌内源质粒pMF1 | 第16-24页 |
| ·粘细菌内源质粒的发现 | 第16-17页 |
| ·质粒pMF1复制方式及复制区组成 | 第17-19页 |
| ·常见环形质粒复制机制 | 第19-24页 |
| 3 原核生物转录调控 | 第24-28页 |
| ·原核转录调控概述 | 第24-26页 |
| ·操纵子和调控因子 | 第26-27页 |
| ·研究调控因子的常用方法 | 第27-28页 |
| 4 论文开展思路和研究内容 | 第28-31页 |
| 第二章 复制区基因性质分析 | 第31-47页 |
| 1 实验材料和仪器试剂 | 第31-34页 |
| ·菌株和质粒 | 第31-32页 |
| ·主要培养基 | 第32-33页 |
| ·主要实验试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器设备与耗材 | 第33-34页 |
| 2 实验方法 | 第34-42页 |
| ·Myxococcus fulvus 124B02的RNA提取和制备 | 第34-36页 |
| ·提取RNA | 第34-36页 |
| ·RNA中残余DNA的去除 | 第36页 |
| ·RT-PCR反应验证四个基因共转录 | 第36-38页 |
| ·反转录操作 | 第36-37页 |
| ·反转录PCR | 第37-38页 |
| ·荧光定量PCR证明pMF1.13对pMF1.14的影响 | 第38-42页 |
| ·黄色粘球菌的电转化 | 第39-40页 |
| ·粘球菌转化子的纯化 | 第40页 |
| ·RT-PCR验证电转化成功 | 第40页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第40-42页 |
| 3 实验结果与讨论 | 第42-46页 |
| ·orf13-16四个基因共转录 | 第42-43页 |
| ·pMF1.13对pMF1.14的转录水平的影响 | 第43-46页 |
| 4 本章小结 | 第46-47页 |
| 第三章 pMF1.13的表达纯化 | 第47-73页 |
| 1 实验材料和仪器试剂 | 第47-51页 |
| ·菌株、质粒和引物 | 第47-48页 |
| ·主要培养基 | 第48页 |
| ·主要实验试剂 | 第48-50页 |
| ·主要仪器设备与耗材 | 第50页 |
| ·数据库及分析软件 | 第50-51页 |
| 2 实验方法 | 第51-63页 |
| ·异源表达载体的构建 | 第51-59页 |
| ·Rep蛋白的异源表达纯化 | 第59-62页 |
| ·分子筛分离纯化 | 第62-63页 |
| 3 实验结果与讨论 | 第63-71页 |
| ·生物信息学分析 | 第63-64页 |
| ·pMF1.13蛋白的异源表达尝试 | 第64-67页 |
| ·pMF1.13蛋白的纯化尝试 | 第67-71页 |
| 4 本章小结 | 第71-73页 |
| 第四章 复制区基因功能研究 | 第73-91页 |
| 1 实验材料和仪器试剂 | 第73-75页 |
| ·菌株、质粒和引物 | 第73页 |
| ·主要培养基 | 第73页 |
| ·主要实验试剂 | 第73-74页 |
| ·主要仪器设备与耗材 | 第74-75页 |
| 2 实验方法 | 第75-77页 |
| ·凝胶阻滞实验(band shift assay)DNA | 第75-76页 |
| ·DNA pull-down assay | 第76页 |
| ·质谱技术 | 第76-77页 |
| 3 实验结果与讨论 | 第77-89页 |
| ·Band Shift实验 | 第78-80页 |
| ·DNA pull down assay钓取结合蛋白 | 第80-81页 |
| ·pMF1.14蛋白的纯化和功能研究 | 第81-88页 |
| ·pMF1.15蛋白的表达尝试 | 第88-89页 |
| 4 本章小结 | 第89-91页 |
| 总结与展望 | 第91-93页 |
| 附录 | 第93-101页 |
| 参考文献 | 第101-105页 |
| 致谢 | 第105-107页 |
| 攻读硕士期间发表论文 | 第107-108页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第108页 |
