| 摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-14页 |
| 1 绪论 | 第14-53页 |
| ·铁的生理功能和铁过载的危害 | 第14-18页 |
| ·铁的生理学功能 | 第14-15页 |
| ·铁累积的危害 | 第15-17页 |
| ·铁的吸收和外排过程 | 第17-18页 |
| ·生物节律和生物钟基因Period2 | 第18-24页 |
| ·生物节律 | 第18页 |
| ·昼夜节律 | 第18-19页 |
| ·生物钟基因调控路径 | 第19-21页 |
| ·生物钟基因Period | 第21-24页 |
| ·衰老对生物钟系统的影响 | 第24-27页 |
| ·衰老对生物钟输出通路的影响 | 第24-25页 |
| ·衰老对中心生物钟(SCN)的影响 | 第25-26页 |
| ·衰老对外周生物钟的影响 | 第26-27页 |
| ·生物节律对巨核细胞发育、血小板的生成和功能的影响 | 第27-34页 |
| ·巨核细胞的产生、发育和成熟的过程 | 第27-29页 |
| ·巨核细胞的成熟调控机制 | 第29-30页 |
| ·血小板的产生与凋亡 | 第30-31页 |
| ·血小板功能异常 | 第31-33页 |
| ·生物节律对巨核细胞和血小板的影响 | 第33-34页 |
| ·溶血的原因和生物节律对红细胞的影响 | 第34-37页 |
| ·溶血原因的研究进展 | 第34-36页 |
| ·昼夜节律对红细胞的影响 | 第36-37页 |
| ·本论文研究的目的和意义 | 第37-38页 |
| ·研究目的 | 第37页 |
| ·研究意义 | 第37-38页 |
| ·本论文的主要内容 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-53页 |
| 2 铁过载削弱生物钟基因Per2的表达 | 第53-83页 |
| ·引言 | 第53-54页 |
| ·材料与方法 | 第54-57页 |
| ·实验动物及饲养方案 | 第54页 |
| ·试剂 | 第54页 |
| ·实验仪器 | 第54-55页 |
| ·小鼠铁过载模型的建立及处死时间的选择 | 第55页 |
| ·铁代谢指标的检测 | 第55页 |
| ·细胞同步化及FeSO4的处理 | 第55-56页 |
| ·RNA的抽取、cDNA的生成及基因表达分析 | 第56页 |
| ·数据的余弦拟合 | 第56-57页 |
| ·结果与讨论 | 第57-78页 |
| ·Per2基因在衰老小鼠肝脏中表达减少 | 第57-61页 |
| ·C57BL/6J老龄小鼠表现出铁过载的现象 | 第61-64页 |
| ·羰基铁导致的铁过载削弱了生物钟基因Per2的表达 | 第64-69页 |
| ·右旋糖酐铁削弱了肝脏中生物钟基因Per2的转录 | 第69-71页 |
| ·FeSO_4处理NIH3T3细胞削弱了生物钟基因Per2的表达 | 第71-74页 |
| ·血红素(Heme)代谢基因的表达在高铁食物喂养小鼠和老龄小鼠有着相似性 | 第74-77页 |
| ·讨论 | 第77-78页 |
| ·本章小结 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-83页 |
| 3 生物钟基因Per2缺失导致血小板数目减少和功能减弱 | 第83-116页 |
| ·引言 | 第83-84页 |
| ·方法与材料 | 第84-90页 |
| ·实验动物 | 第84页 |
| ·试剂 | 第84页 |
| ·实验仪器 | 第84-85页 |
| ·实验小鼠基因型鉴定 | 第85页 |
| ·小鼠尾部流血实验 | 第85-86页 |
| ·制备洗涤过的血小板(washed platelet)、富含血小板的血清(PRP,Plateletrich plasma)和没有血小板的血清(PPP,Platelet poor plasma) | 第86页 |
| ·血块收缩实验 | 第86页 |
| ·血小板聚集实验 | 第86页 |
| ·血小板分泌实验 | 第86-87页 |
| ·血小板形态学分析 | 第87页 |
| ·外周血小板数目和体积分析 | 第87页 |
| ·组织学分析巨核细胞 | 第87-88页 |
| ·巨核细胞微观形态分析 | 第88页 |
| ·巨核细胞DNA含量分析 | 第88页 |
| ·富集巨核细胞 | 第88页 |
| ·血小板前体生成实验 | 第88-89页 |
| ·巨核细胞凋亡分析 | 第89页 |
| ·相关基因的表达分析 | 第89-90页 |
| ·实验结果与讨论 | 第90-111页 |
| ·Per2基因缺失小鼠基因型鉴定 | 第90页 |
| ·Per2基因缺失小鼠的尾部流血时间延长 | 第90-91页 |
| ·Per2基因缺失小鼠的血块收缩变慢 | 第91页 |
| ·Per2基因缺失导致血小板的聚集下降 | 第91-92页 |
| ·Per2基因缺失导致血小板的分泌能力下降 | 第92-94页 |
| ·Per2基因缺失导致血小板α颗粒和密度颗粒的缺失 | 第94-95页 |
| ·Per2-null小鼠的血小板数目减少同时体积增大 | 第95-96页 |
| ·Per2基因缺失没有影响巨核细胞的数目 | 第96-98页 |
| ·Per2基因缺失导致巨核细胞分界膜系统发育异常伴随着颗粒缺失 | 第98-99页 |
| ·Per2基因缺失使巨核细胞的DNA合成增加 | 第99页 |
| ·Per2基因缺失的巨核细胞产生血小板前体数目减少 | 第99-101页 |
| ·Per2基因缺失的巨核细胞凋亡减少 | 第101-103页 |
| ·Per2基因缺失的增强了TPO/C-mpl信号通路 | 第103-105页 |
| ·Per2基因缺失削弱了巨核细胞内P53的表达,增强了Bcl-2和Bcl-xl的表达 | 第105-109页 |
| ·讨论 | 第109-111页 |
| ·本章小结 | 第111页 |
| 参考文献 | 第111-116页 |
| 4 生物钟基因Per2在红细胞应对外界压力的过程中起着重要作用 | 第116-144页 |
| ·引言 | 第116-117页 |
| ·材料与方法 | 第117-122页 |
| ·实验动物 | 第117页 |
| ·试剂 | 第117页 |
| ·仪器 | 第117-118页 |
| ·血气分析和氧代谢指标测定 | 第118页 |
| ·红细胞常规分析 | 第118页 |
| ·红细胞形态分析 | 第118-119页 |
| ·透射电镜分析 | 第119页 |
| ·红细胞膜蛋白分离及分析 | 第119页 |
| ·铁含量测定及组织学研究 | 第119-120页 |
| ·盐酸苯肼诱导溶血性贫血 | 第120页 |
| ·H_2O_2诱导的溶血 | 第120页 |
| ·谷胱甘肽和丙二醛的测定 | 第120页 |
| ·高铁血红蛋白形成实验 | 第120-121页 |
| ·渗透脆性分析 | 第121页 |
| ·红细胞中ATP含量的测定 | 第121页 |
| ·红细胞膜ATPase活性测定 | 第121-122页 |
| ·红细胞膜内Na+、K+离子浓度的含量 | 第122页 |
| ·RNA的分离及相关基因的表达分析 | 第122页 |
| ·结果与讨论 | 第122-138页 |
| ·高剂量的苯肼注射后,Per2-null小鼠死亡率增加 | 第122-123页 |
| ·低剂量的苯肼注射后,Per2-null小鼠红细胞贫血更严重 | 第123-124页 |
| ·H_2O_2导致Per2-null小鼠红细胞溶血更严重 | 第124-125页 |
| ·Per2基因小鼠的红细胞更容易被H_2O_2诱导形成高铁血红蛋白 | 第125-126页 |
| ·Per2-null小鼠导致血液中含氧量下降氧代谢下降 | 第126-127页 |
| ·Per2-null小鼠的红细胞对渗透压力更加敏感 | 第127-128页 |
| ·Per2-null小鼠血铁增加、脾脏中红髓和铁含量增加 | 第128-130页 |
| ·Per2-null没有导致贫血 | 第130-131页 |
| ·Per2-null小鼠的红细胞中畸形红细胞数目增加 | 第131-132页 |
| ·野生型小鼠和Per2-null小鼠的红细胞膜蛋白没有明显差异 | 第132-133页 |
| ·Per2-null小鼠的红细胞中谷胱甘肽(GSH)减少,丙二醛(MDA)增加 | 第133-134页 |
| ·Per2-null小鼠的红细胞中ATP含量下降、ADP含量上升 | 第134-135页 |
| ·Per2-null小鼠的红细胞膜的ATPase活性上升 | 第135-136页 |
| ·Per2-null小鼠的红细胞内部K+离子浓度上升 | 第136-137页 |
| ·Per2基因的缺失导致ATP1A1高表达 | 第137页 |
| ·讨论 | 第137-138页 |
| ·本章小结 | 第138-139页 |
| 参考文献 | 第139-144页 |
| 5 结论、创新点、建议和展望 | 第144-147页 |
| ·结论 | 第144-145页 |
| ·创新点 | 第145-146页 |
| ·建议和展望 | 第146-147页 |
| 致谢 | 第147-148页 |
| 博士期间研究成果 | 第148页 |
