| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-24页 |
| 1 漆酶的研究进展 | 第12-17页 |
| ·漆酶的来源 | 第12页 |
| ·漆酶的分子特征与结构 | 第12-13页 |
| ·漆酶的催化氧化作用 | 第13-14页 |
| ·金属离子与漆酶酶活 | 第14-15页 |
| ·漆酶的应用 | 第15-17页 |
| ·造纸领域 | 第15页 |
| ·生物合成领域 | 第15页 |
| ·食品领域 | 第15-16页 |
| ·生物修复领域 | 第16页 |
| ·改善纤维特性领域 | 第16页 |
| ·生物传感器领域 | 第16-17页 |
| ·能源领域 | 第17页 |
| 2 漆酶的分子生物学研究 | 第17-21页 |
| ·漆酶的氨基酸序列分析 | 第17-18页 |
| ·漆酶基因启动子序列 | 第18-19页 |
| ·漆酶编码基因家族 | 第19-20页 |
| ·真菌基因组中木质素纤维素降解研究 | 第20-21页 |
| 3 生物信息学分析工具介绍 | 第21-22页 |
| ·美国国立生物技术中心(NCBI) | 第21页 |
| ·PROTEIN BLAST | 第21页 |
| ·SIGNALP 4.1 | 第21-22页 |
| ·PROTCOMP 9.0 | 第22页 |
| ·DNAMAN | 第22页 |
| ·SOFTBERRY | 第22页 |
| 4 研究目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 灵芝漆酶基因的生物信息学分析 | 第24-33页 |
| 1 材料与方法 | 第24-25页 |
| ·研究对象 | 第24页 |
| ·漆酶基因推断氨基酸序列结构分析 | 第24-25页 |
| ·Protein Blast | 第24页 |
| ·信号肽及亚细胞位置预测 | 第24-25页 |
| ·同源性分析 | 第25页 |
| ·氨基酸多序列比对 | 第25页 |
| ·漆酶基因启动子区域分析 | 第25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-31页 |
| ·信号肽及亚细胞定位预测 | 第25-26页 |
| ·氨基酸序列结构分析 | 第26-27页 |
| ·LACC1-LACC16的进化分析 | 第27-28页 |
| ·氨基酸序列的多序列比对 | 第28-30页 |
| ·上游启动子区分析 | 第30-31页 |
| 4 小结与讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 灵芝漆酶酶活测定 | 第33-37页 |
| 1 材料与方法 | 第33-34页 |
| ·供试菌种 | 第33页 |
| ·培养基 | 第33页 |
| ·平板培养基 | 第33页 |
| ·深层发酵培养基 | 第33页 |
| ·主要生化试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器与设备 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-34页 |
| ·菌丝培养 | 第33-34页 |
| ·粗酶液的获取 | 第34页 |
| ·漆酶酶活的测定 | 第34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-35页 |
| 3 小结与讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 灵芝漆酶基因的表达分析 | 第37-52页 |
| 1 材料与方法 | 第37-42页 |
| ·供试菌种 | 第37页 |
| ·培养基 | 第37页 |
| ·平板培养基 | 第37页 |
| ·深层发酵培养基 | 第37页 |
| ·主要生化试剂 | 第37页 |
| ·主要仪器与设备 | 第37-38页 |
| ·试验方法 | 第38-42页 |
| ·灵芝菌球的采集 | 第38页 |
| ·RNA提取用品前处理及准备 | 第38页 |
| ·灵芝总RNA提取 | 第38-39页 |
| ·总RNA纯度及浓度检测 | 第39页 |
| ·第一链cDNA的制备 | 第39-40页 |
| ·第一链cDNA的质量及浓度检测 | 第40页 |
| ·半定量PCR反应 | 第40页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第40-42页 |
| ·荧光定量PCR数据处理 | 第42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-49页 |
| ·RNA样本的检测及第一链cDNA合成 | 第42-43页 |
| ·灵芝不同生长时期漆酶基因的表达情况 | 第43-49页 |
| ·RT-qPCR分析的有效性 | 第43-46页 |
| ·Lacc1-Lacc16基因在不同培养时期表达量的变化 | 第46页 |
| ·在Cu~(2+)的诱导下Lacc1-Lacc16基因转录水平的变化 | 第46-49页 |
| 3 小结与讨论 | 第49-52页 |
| 总结、创新与展望 | 第52-53页 |
| 1 本文的创新点 | 第52页 |
| 2 展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60页 |