摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
略縮词表 Abbreviations | 第6-10页 |
绪论 | 第10-16页 |
1 研究目的与意义 | 第10页 |
2 药用植物次生代谢产物相关功能基因的研究进展 | 第10-11页 |
3 药用植物次生代谢产物合成相关功能基因组学研究方法 | 第11-12页 |
4 博落回中生物碱的研究及应用 | 第12页 |
5 博落回药理作用的研究 | 第12-13页 |
·抗菌作用 | 第12-13页 |
·抗炎作用 | 第13页 |
·杀虫作用 | 第13页 |
·抗肿瘤作用 | 第13页 |
·改善肝功能,增强免疫力 | 第13页 |
6 博落回中生物碱的生物合成途径及相关酶 | 第13-14页 |
7 cDNA文库和EST(表达序列标签)技术的应用 | 第14-16页 |
·cDNA文库的构建方法和种类 | 第14-15页 |
·文库的应用 | 第15页 |
·EST(表达序列标签)及其应用 | 第15-16页 |
第一章 博落回叶片总RNA的提取 | 第16-19页 |
1 材料 | 第16页 |
·植物材料 | 第16页 |
·样品采集 | 第16页 |
·主要试剂及处理 | 第16页 |
2 方法 | 第16-17页 |
·总RNA提取方法 | 第16-17页 |
·总RNA的质量检测与分析 | 第17页 |
3 结果与分析 | 第17-18页 |
4 讨论 | 第18-19页 |
第二章 博落回叶片CDNA文库的构建 | 第19-27页 |
1 材料 | 第19页 |
·试验材料 | 第19页 |
·试验试剂 | 第19页 |
·其他溶液的配制 | 第19页 |
2 方法 | 第19-24页 |
·总RNA的提取 | 第19页 |
·cDNA文库的构建 | 第19-24页 |
·第一链cDNA的合成 | 第20页 |
·LD PCR扩增cDNA第二链 | 第20-21页 |
·蛋白酶K消化 | 第21页 |
·SfiⅠ酶切 | 第21页 |
·用CHROMASPIN-400进行cDNA的分级分离 | 第21-22页 |
·cDNA与载体连接 | 第22-23页 |
·重组质粒的转化 | 第23页 |
·文库的扩增及保存 | 第23-24页 |
·cDNA文库插入片断的检测 | 第24页 |
3 结果与分析 | 第24-26页 |
·双链cDNA的合成 | 第24-25页 |
·cDNA的分级分离 | 第25页 |
·文库的滴度的测定 | 第25页 |
·插入片段的检测 | 第25-26页 |
4 讨论 | 第26-27页 |
第三章 EST(表达序列标签)生物信息学分析 | 第27-34页 |
1 材料 | 第27页 |
2 方法 | 第27页 |
·EST序列的获得 | 第27页 |
·Unigenes的获得 | 第27页 |
·GO分析 | 第27页 |
·KEGG分析 | 第27页 |
3 结果与分析 | 第27-32页 |
·EST序列的获得 | 第27-28页 |
·EST序列的拼接分析 | 第28页 |
·序列间相似性分析及功能注释 | 第28-32页 |
·Gene Ontology(GO)分类 | 第28-31页 |
·KEGG分析 | 第31-32页 |
·ESTs网上注册 | 第32页 |
4 讨论 | 第32-34页 |
参考文献 | 第34-40页 |
致谢 | 第40-41页 |
作者简介 | 第41页 |