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博落回叶片cDNA文库的构建及EST分析

摘要第1-5页
Abstract第5-6页
略縮词表 Abbreviations第6-10页
绪论第10-16页
 1 研究目的与意义第10页
 2 药用植物次生代谢产物相关功能基因的研究进展第10-11页
 3 药用植物次生代谢产物合成相关功能基因组学研究方法第11-12页
 4 博落回中生物碱的研究及应用第12页
 5 博落回药理作用的研究第12-13页
   ·抗菌作用第12-13页
   ·抗炎作用第13页
   ·杀虫作用第13页
   ·抗肿瘤作用第13页
   ·改善肝功能,增强免疫力第13页
 6 博落回中生物碱的生物合成途径及相关酶第13-14页
 7 cDNA文库和EST(表达序列标签)技术的应用第14-16页
   ·cDNA文库的构建方法和种类第14-15页
   ·文库的应用第15页
   ·EST(表达序列标签)及其应用第15-16页
第一章 博落回叶片总RNA的提取第16-19页
 1 材料第16页
   ·植物材料第16页
   ·样品采集第16页
   ·主要试剂及处理第16页
 2 方法第16-17页
   ·总RNA提取方法第16-17页
   ·总RNA的质量检测与分析第17页
 3 结果与分析第17-18页
 4 讨论第18-19页
第二章 博落回叶片CDNA文库的构建第19-27页
 1 材料第19页
   ·试验材料第19页
   ·试验试剂第19页
   ·其他溶液的配制第19页
 2 方法第19-24页
   ·总RNA的提取第19页
   ·cDNA文库的构建第19-24页
     ·第一链cDNA的合成第20页
     ·LD PCR扩增cDNA第二链第20-21页
     ·蛋白酶K消化第21页
     ·SfiⅠ酶切第21页
     ·用CHROMASPIN-400进行cDNA的分级分离第21-22页
     ·cDNA与载体连接第22-23页
     ·重组质粒的转化第23页
     ·文库的扩增及保存第23-24页
     ·cDNA文库插入片断的检测第24页
 3 结果与分析第24-26页
   ·双链cDNA的合成第24-25页
   ·cDNA的分级分离第25页
   ·文库的滴度的测定第25页
   ·插入片段的检测第25-26页
 4 讨论第26-27页
第三章 EST(表达序列标签)生物信息学分析第27-34页
 1 材料第27页
 2 方法第27页
   ·EST序列的获得第27页
   ·Unigenes的获得第27页
   ·GO分析第27页
   ·KEGG分析第27页
 3 结果与分析第27-32页
   ·EST序列的获得第27-28页
   ·EST序列的拼接分析第28页
   ·序列间相似性分析及功能注释第28-32页
     ·Gene Ontology(GO)分类第28-31页
     ·KEGG分析第31-32页
   ·ESTs网上注册第32页
 4 讨论第32-34页
参考文献第34-40页
致谢第40-41页
作者简介第41页

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