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梅花鹿生茸区骨膜细胞S100A4基因RNAi重组慢病毒载体的构建

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 引言第11-18页
   ·前言第11页
   ·研究背景第11-16页
     ·鹿茸的形态学与组织学第11-13页
     ·鹿茸干细胞第13-14页
     ·探索鹿茸干细胞与鹿茸再生相关的基因第14-15页
     ·鹿茸干细胞 S100A4 的独特性第15页
     ·S100A4 的生物学特性和功能第15-16页
     ·鹿茸干细胞与 S100A4 的研究第16页
   ·研究的目的及意义第16-17页
   ·主要研究内容第17-18页
第二章 S100A4 重组载体质粒的构建与鉴定第18-28页
   ·实验材料第18-19页
     ·实验试剂第18页
     ·实验仪器第18页
     ·主要溶液配制第18-19页
   ·实验方法第19-24页
     ·筛选梅花鹿 S100A4 基因 RNAi 靶位点第19页
     ·设计 shRNA 寡核苷酸链第19-20页
     ·shRNA 退火第20页
     ·载体质粒的转化、涂布、挑菌、小量扩增第20-21页
     ·载体质粒的小量提取第21页
     ·载体质粒的酶切第21-22页
     ·载体质粒 DNA 片段回收第22页
     ·重组片段的连接第22-23页
     ·重组质粒的获取第23页
     ·重组质粒的 PCR 鉴定第23-24页
   ·实验结果第24-27页
     ·shRNA 退火连接结果第24页
     ·载体质粒 pLVTHM 酶切结果第24-25页
     ·pLVTHM 重组质粒 PCR 鉴定结果第25-26页
     ·重组载体质粒测序结果第26-27页
   ·讨论第27页
   ·本章小结第27-28页
第三章 重组慢病毒的获得及检测第28-33页
   ·实验材料第28-29页
     ·实验试剂第28页
     ·实验仪器第28-29页
   ·实验方法第29-31页
     ·慢病毒系统三质粒的无内毒素大量提取第29页
     ·293T 细胞的复苏第29-30页
     ·293T 细胞的传代培养第30页
     ·重组慢病毒的包装第30页
     ·病毒的收集与浓缩第30-31页
     ·生茸区骨膜细胞的复苏与传代第31页
     ·生茸区骨膜细胞的病毒感染第31页
   ·实验结果第31-32页
     ·重组慢病毒三质粒共转染效果检测第31页
     ·重组慢病毒感染生茸区骨膜细胞效果检测第31-32页
   ·讨论第32页
   ·本章小结第32-33页
第四章 全文结论第33-34页
参考文献第34-38页
致谢第38-39页
作者简历第39页

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