| 摘要 | 第1-5页 |
| Summary | 第5-10页 |
| 缩写词英汉对照表 | 第10-12页 |
| 第一章 启动子结构和功能研究进展 | 第12-21页 |
| 1 核心启动子结构特征 | 第12-15页 |
| ·转录起始位点 | 第13页 |
| ·TATA 框 | 第13-14页 |
| ·CAAT 框 | 第14页 |
| ·BRE 元件 | 第14页 |
| ·DPE 元件 | 第14-15页 |
| ·MTE 元件 | 第15页 |
| 2 基本转录因子 | 第15-17页 |
| 3 增强子 | 第17-18页 |
| 4 展望 | 第18页 |
| 参考文献 | 第18-21页 |
| 第二章 朊蛋白生理功能研究进展 | 第21-40页 |
| 1 朊蛋白细胞定位及生理功能 | 第21-33页 |
| ·PrPC的结构、细胞定位及转运 | 第21-24页 |
| ·PrPC的结构特征 | 第21-23页 |
| ·PrPC的细胞定位及转运 | 第23-24页 |
| ·PrPC的生理功能 | 第24-33页 |
| ·与 PrPC相互作用的蛋白分子 | 第24-25页 |
| ·PrPC的抗凋亡活性 | 第25-28页 |
| ·PrPC的抗氧化应激活性 | 第28页 |
| ·PrPC与铜离子的关系 | 第28-29页 |
| ·PrPC与跨膜信号转导 | 第29-31页 |
| ·PrPC在神经元突触中的作用 | 第31页 |
| ·PrPC与肿瘤的发生 | 第31-32页 |
| ·PrPC与细胞的增殖粘附 | 第32-33页 |
| 2 展望 | 第33页 |
| 参考文献 | 第33-40页 |
| 第三章 禽源 U6 启动子的克隆及转录活性分析 | 第40-55页 |
| 1 材料与方法 | 第40-45页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·细胞与菌株 | 第40页 |
| ·主要试剂与质粒 | 第40-41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·引物的设计和合成 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-45页 |
| ·启动子序列克隆 | 第41-42页 |
| ·表达载体构建 | 第42-43页 |
| ·细胞转染 | 第43-44页 |
| ·细胞复苏 | 第43页 |
| ·转染 | 第43-44页 |
| ·荧光显微镜观察 | 第44页 |
| ·荧光定量 RT-PCR 检测 | 第44页 |
| ·Western blot 分析 | 第44-45页 |
| ·流式细胞术分析 | 第45页 |
| ·统计学分析 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-53页 |
| ·cU6 、hU6 启动子序列克隆及分析 | 第45-46页 |
| ·绿色荧光蛋白表达载体的构建 | 第46-47页 |
| ·不同载体转染后 Hela 和 DF-1 细胞 EGFP 表达水平分析 | 第47-53页 |
| 3 讨论 | 第53页 |
| 参考文献 | 第53-55页 |
| 第四章 PrPC过表达的 DF-1 稳定细胞系建立 | 第55-64页 |
| 1 材料和方法 | 第55-59页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·细胞与菌株 | 第55页 |
| ·主要试剂与质粒 | 第55-56页 |
| ·主要仪器 | 第56页 |
| ·引物的设计和合成 | 第56页 |
| ·方法 | 第56-59页 |
| ·目的片段扩增和检测 | 第56页 |
| ·表达载体构建 | 第56-57页 |
| ·细胞培养 | 第57-58页 |
| ·DF-1 细胞复苏 | 第57页 |
| ·DF-1 细胞传代 | 第57-58页 |
| ·DF-1 细胞冻存 | 第58页 |
| ·细胞转染与稳定转染细胞系筛选 | 第58-59页 |
| ·脂质体介导的 DF-1 细胞转染 | 第58页 |
| ·G418 最佳浓度选择 | 第58页 |
| ·转染 DF-1 稳定细胞系筛选 | 第58-59页 |
| ·Western blot 鉴定 | 第59页 |
| ·RT-PCR 分析 | 第59页 |
| 2 结果和分析 | 第59-62页 |
| ·鸡朊蛋白基因目的 DNA 片段扩增 | 第59-60页 |
| ·鸡朊蛋白重组表达载体构建 | 第60页 |
| ·过表达鸡朊蛋白的 DF-1 稳定细胞系建立 | 第60-61页 |
| ·Western blot 检测 | 第61页 |
| ·RT-PCR 分析 | 第61-62页 |
| 3 讨论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-64页 |
| 第五章 PrPC过表达对 DF-1 细胞增殖、粘附和侵袭的影响 | 第64-73页 |
| 1 材料和方法 | 第64-66页 |
| ·材料 | 第64-65页 |
| ·细胞 | 第64页 |
| ·主要试剂 | 第64-65页 |
| ·主要仪器 | 第65页 |
| ·方法 | 第65-66页 |
| ·细胞培养 | 第65页 |
| ·粘附实验 | 第65页 |
| ·侵袭实验 | 第65-66页 |
| ·细胞增殖和凋亡检测 | 第66页 |
| ·MTT 法检测细胞增殖 | 第66页 |
| ·流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-70页 |
| ·过表达 ChPrPC促进 DF-1 细胞粘附 | 第66-68页 |
| ·过表达 ChPrPC促进 DF-1 细胞侵袭 | 第68-69页 |
| ·过表达 ChPrPC促进 DF-1 细胞增殖 | 第69-70页 |
| ·过表达 ChPrPC减缓 DF-1 细胞凋亡 | 第70页 |
| 3 讨论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-73页 |
| 结论 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 作者简介 | 第75-77页 |
| 导师简介 | 第77-78页 |
