摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-12页 |
缩略词 | 第12-13页 |
1 绪论 | 第13-51页 |
·土壤盐渍化的形成 | 第13页 |
·土壤盐渍化的危害 | 第13-15页 |
·植物在盐胁迫下的应激调控机理 | 第15-25页 |
·植物对盐胁迫的感应机制 | 第15-16页 |
·盐离子在植物体内的运输和分布 | 第16页 |
·Na~+的输入输出以及 K~+/Na~+平衡 | 第16-19页 |
·Na~+的区隔作用 | 第19页 |
·有机渗透调节物 | 第19-21页 |
·LEA 类蛋白与耐盐调控 | 第21-23页 |
·植物在盐胁迫下的氧化应激调控 | 第23-25页 |
·植物在盐胁迫下的细胞信号传导 | 第25-32页 |
·植物在盐胁迫下的钙离子信号传导 | 第25-27页 |
·双元受体激酶与植物盐胁迫信号传导 | 第27-28页 |
·植物在盐胁迫下的 MAPK 信号传导路径 | 第28-30页 |
·ABA 与植物盐胁迫信号传导 | 第30-31页 |
·植物盐胁迫下的 SOS 信号传导路径 | 第31-32页 |
·小 RNA 与植物非生物胁迫应激调控 | 第32-41页 |
·植物小 RNA | 第32-35页 |
·小 RNA 与植物基因表达调控 | 第35-36页 |
·miRNA 与氧化应激调控 | 第36页 |
·miRNA 与植物 ABA 调控 | 第36-38页 |
·miRNA 与植物干旱胁迫调控 | 第38-39页 |
·miRNA 与植物逆境胁迫下的生长发育调控 | 第39-40页 |
·siRNA 与植物逆境调控 | 第40-41页 |
·植物膜蛋白与逆境调控 | 第41-42页 |
·植物耐盐性状改良研究 | 第42-47页 |
·植物耐盐分子遗传模型 | 第42-44页 |
·基因工程技术在增强植物耐盐性研究中的应用 | 第44-46页 |
·高通量分析技术与植物耐盐性研究 | 第46-47页 |
·苜蓿耐盐性研究进展 | 第47-49页 |
·紫花苜蓿与蒺藜苜蓿 | 第47-48页 |
·苜蓿盐胁迫应激调控机理研究进展 | 第48-49页 |
·本研究的目的、内容及意义 | 第49-51页 |
2 紫花苜蓿与蒺藜苜蓿根中盐胁迫相关蛋白的鉴定分析 | 第51-81页 |
·材料 | 第51-52页 |
·植物材料 | 第51页 |
·主要试剂 | 第51页 |
·主要仪器 | 第51页 |
·分析软件 | 第51页 |
·主要试剂配方 | 第51-52页 |
·方法 | 第52-59页 |
·植物材料培养、处理及取样 | 第52页 |
·蛋白质提取 | 第52-53页 |
·总 RNA 的提取 | 第53页 |
·蛋白质溶解及定量 | 第53-54页 |
·蛋白质第一向等电聚焦 | 第54-55页 |
·第二向 SDS-PAGE 垂直电泳 | 第55-56页 |
·SDS-PAGE 凝胶染色 | 第56-57页 |
·凝胶扫描及图像分析 | 第57页 |
·蛋白质谱鉴定 | 第57页 |
·反转录及荧光定量 PCR | 第57-59页 |
·结果与分析 | 第59-78页 |
·实验材料的选择及处理 | 第59-60页 |
·蛋白质双向电泳分析 | 第60页 |
·蛋白凝胶图像分析 | 第60-67页 |
·差异蛋白质谱分析 | 第67页 |
·差异蛋白功能分析 | 第67-78页 |
·转录水平表达分析 | 第78页 |
·讨论 | 第78-79页 |
·小结 | 第79-81页 |
3 紫花苜蓿与蒺藜苜蓿根中盐胁迫相关 miRNA 的鉴定分析 | 第81-97页 |
·材料 | 第81页 |
·植物材料 | 第81页 |
·主要试剂 | 第81页 |
·主要仪器 | 第81页 |
·分析软件 | 第81页 |
·方法 | 第81-85页 |
·植物材料处理及取样 | 第81页 |
·总 RNA 提取 | 第81页 |
·小 RNA 测序 | 第81-82页 |
·测序数据的基本分析 | 第82页 |
·已知 miRNA 和新 miRNA 的鉴定分析 | 第82页 |
·新 miRNA 及其前体结构预测 | 第82-83页 |
·miRNA 靶标基因预测 | 第83页 |
·miRNA 的差异表达分析 | 第83页 |
·荧光定量 PCR 检测 miRNA 表达量 | 第83-85页 |
·结果与分析 | 第85-95页 |
·高通量测序数据分析 | 第85-87页 |
·已知 miRNA 的分析 | 第87页 |
·新 miRNA 的预测分析 | 第87-89页 |
·miRNA 靶标基因预测分析 | 第89-91页 |
·miRNA 表达量差异分析 | 第91页 |
·miRNA 的荧光定量分析 | 第91-95页 |
·讨论 | 第95页 |
·小结 | 第95-97页 |
4 紫花苜蓿与蒺藜苜蓿 RCI2 类基因的克隆及功能分析 | 第97-117页 |
·材料 | 第97-99页 |
·生物材料 | 第97页 |
·主要试剂及配方 | 第97页 |
·质粒载体 | 第97页 |
·培养基及配方 | 第97-99页 |
·主要仪器 | 第99页 |
·方法 | 第99-107页 |
·植物材料培养、处理及取样 | 第99页 |
·总 RNA 和基因组 DNA 的提取 | 第99页 |
·引物设计与合成 | 第99-100页 |
·未知基因全长序列克隆 | 第100-103页 |
·序列分析软件及数据库 | 第103页 |
·荧光定量 PCR 分析 | 第103页 |
·相关载体的构建 | 第103-104页 |
·基因枪子弹制备及瞬时表达载体转化 | 第104-105页 |
·酿酒酵母转化 | 第105页 |
·农杆菌转化 | 第105-106页 |
·拟南芥转化 | 第106页 |
·GUS 化学染色 | 第106-107页 |
·叶绿素提取及含量测定 | 第107页 |
·结果与分析 | 第107-116页 |
·MsRCI2A 基因 3’和 5’端序列的克隆 | 第107-108页 |
·MsRCI2A 基因全长序列拼接及序列分析 | 第108-110页 |
·苜蓿 RCI2 类基因表达量分析 | 第110-111页 |
·苜蓿 RCI2 类基因亚细胞定位分析 | 第111-112页 |
·酵母突变体 pmp3 的功能恢复分析 | 第112-113页 |
·转 MsRCI2A 基因拟南芥的鉴定及相关分析 | 第113-116页 |
·讨论 | 第116页 |
·小结 | 第116-117页 |
5 紫花苜蓿盐诱导基因 MsGRP 的克隆及功能分析 | 第117-129页 |
·材料 | 第117页 |
·生物材料 | 第117页 |
·主要试剂及配方 | 第117页 |
·质粒载体 | 第117页 |
·培养基及配方 | 第117页 |
·主要仪器 | 第117页 |
·方法 | 第117-118页 |
·植物材料培养、处理及取样 | 第117页 |
·总 RNA 及基因组 DNA 的提取 | 第117页 |
·引物设计与合成 | 第117-118页 |
·未知基因全长序列克隆 | 第118页 |
·序列分析软件及数据库 | 第118页 |
·荧光定量 PCR 分析 | 第118页 |
·相关载体的构建 | 第118页 |
·基因枪子弹制备及瞬时表达载体转化 | 第118页 |
·农杆菌转化 | 第118页 |
·拟南芥转化 | 第118页 |
·GUS 化学染色 | 第118页 |
·叶绿素提取及含量测定 | 第118页 |
·结果与分析 | 第118-127页 |
·MsGRP 基因 3’和 5’端序列的克隆 | 第118-119页 |
·MsGRP 基因全长 c DNA 序列拼接及序列分析 | 第119-121页 |
·MsGRP 基因的表达量分析 | 第121-122页 |
·MsGRP 基因亚细胞定位分析 | 第122页 |
·转 MsGRP 基因拟南芥的鉴定及相关分析 | 第122-127页 |
·讨论 | 第127-128页 |
·小结 | 第128-129页 |
6 结论与展望 | 第129-133页 |
·结论 | 第129-130页 |
·创新点 | 第130页 |
·后续工作展望 | 第130-133页 |
致谢 | 第133-135页 |
参考文献 | 第135-155页 |
附录 作者在攻读学位期间发表论文目录 | 第155页 |