| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略语 | 第9-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-18页 |
| ·鸭IgY分子的研究进展 | 第11-15页 |
| ·编码IgY的基因 | 第11-12页 |
| ·IgY分子与哺乳动物IgG分子结构的区别 | 第12-13页 |
| ·IgY分子在各类动物中的分布 | 第13-14页 |
| ·IgY分子的功能 | 第14页 |
| ·IgY分子的应用 | 第14-15页 |
| ·单克隆抗体的研究进展 | 第15-18页 |
| ·单克隆抗体的概念和基本原理 | 第15-16页 |
| ·单克隆抗体筛选的基本原理 | 第16页 |
| ·制备单克隆抗体的方法 | 第16-17页 |
| ·单克隆抗体的应用 | 第17-18页 |
| 2 研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 3 材料与方法 | 第19-39页 |
| ·实验材料 | 第19-24页 |
| ·载体及菌株 | 第19-20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·实验动物 | 第20页 |
| ·试剂配制 | 第20-24页 |
| ·实验方法 | 第24-39页 |
| ·鸭IgY Fc片段CH2-CH3-CH4的克隆 | 第24-28页 |
| ·鸭IgY Fc片段(CH2,CH3-CH4)基因亚克隆 | 第28-30页 |
| ·重组原核表达质粒的诱导表达 | 第30页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第30-31页 |
| ·表达产物可溶性检测 | 第31页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第31-32页 |
| ·融合蛋白的Western blot鉴定 | 第32页 |
| ·小鼠免疫以及血清效价的检测 | 第32-33页 |
| ·SP2/0骨髓瘤的准备 | 第33-34页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第34页 |
| ·免疫脾细胞的制备 | 第34-35页 |
| ·细胞融合 | 第35页 |
| ·杂交瘤细胞的选择性培养与克隆 | 第35-37页 |
| ·小鼠腹水法生产单克隆抗体 | 第37页 |
| ·腹水单抗的纯化 | 第37-38页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第38-39页 |
| 4 实验结果 | 第39-51页 |
| ·IgY Fc片段CH2-CH3-CH4基因的克隆及其蛋白的表达 | 第39-43页 |
| ·IgYFc片段CH1-CH2-CH3-CH4基因的RT-PCR扩增 | 第39页 |
| ·IgYFc片段CH2-CH3-CH4基因序列分析 | 第39-41页 |
| ·IgYFc片段CH2-CH3-CH4基因的亚克隆 | 第41-42页 |
| ·pGEX-KG-CH2-CH3-CH4重组质粒的构建 | 第42页 |
| ·GST-CH2-CH3-CH4蛋白的SDS-PAGE以及Western blot鉴定 | 第42-43页 |
| ·IgYFc片段基因(CH2,CH3-CH4)的亚克隆及其蛋白的表达 | 第43-46页 |
| ·IgYFc片段CH2基因以及CH3-CH4基因的扩增结果 | 第43-44页 |
| ·pET-28a-CH2以及pET-28a-CH3-CH4重组质粒的构建 | 第44-45页 |
| ·His-CH2和His-CH3-CH4蛋白的SDS-PAGE以及Western blot | 第45-46页 |
| ·鼠抗GST-CH2-CH3-CH4蛋白单克隆抗体的制备 | 第46-51页 |
| ·免疫小鼠血清效价的测定 | 第46-47页 |
| ·杂交瘤细胞株的筛选 | 第47-48页 |
| ·单克隆抗体的纯化以及鉴定 | 第48-51页 |
| 5 讨论 | 第51-54页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第51页 |
| ·细胞融合 | 第51-52页 |
| ·抗IgYFc片段CH2单克隆抗体筛选失败的原因分析 | 第52页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选与克隆 | 第52-53页 |
| ·4F8单克隆抗体的交叉反应试验 | 第53-54页 |
| 6 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
