| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-21页 |
| 前言 | 第21-23页 |
| 第一章 EETs对ALI小鼠肺内炎症的影响及其机制 | 第23-49页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·动物 | 第24页 |
| ·细胞 | 第24页 |
| ·试剂 | 第24-25页 |
| ·仪器 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-34页 |
| ·小鼠ALI模型的建立 | 第26页 |
| ·小鼠血清中TPPU和EETs浓度检测 | 第26页 |
| ·小鼠支气管肺泡灌洗 | 第26-27页 |
| ·小鼠肺组织形态学观察 | 第27页 |
| ·小鼠肺组织MPO活性检测 | 第27-28页 |
| ·BCA法测定小鼠BALF中蛋白浓度 | 第28页 |
| ·小鼠血清和BALF中LDH活性测定 | 第28-29页 |
| ·小鼠肺组织总RNA提取 | 第29-30页 |
| ·第一链cDNA的制备 | 第30-31页 |
| ·基因扩增(RT-PCR) | 第31-32页 |
| ·ELISA法检测小鼠BALF中IL-1β的含量 | 第32-33页 |
| ·小鼠巨噬细胞培养 | 第33页 |
| ·细胞活力检测 | 第33-34页 |
| ·小鼠巨噬细胞的炎症激活与TPPU处理 | 第34页 |
| ·小鼠巨噬细胞培养上清液中LDH活性测定 | 第34页 |
| ·统计学处理 | 第34页 |
| ·结果 | 第34-45页 |
| ·腹腔注射TPPU可显著性增加小鼠血清中TPPU浓度 | 第34-36页 |
| ·小鼠一般情况 | 第36页 |
| ·TPPU处理对LPS诱导的ALI小鼠肺组织病理学改变的影响 | 第36-37页 |
| ·TPPU处理对LPS诱导ALI小鼠BALF中炎症细胞数量的影响 | 第37-38页 |
| ·TPPU处理对LPS诱导ALI小鼠肺组织MPO活性的影响 | 第38页 |
| ·TPPU处理对LPS诱导ALI小鼠BALF总蛋白含量的影响 | 第38-39页 |
| ·TPPU处理对LPS诱导ALI小鼠血清和BALF中LDH活性的影响 | 第39-40页 |
| ·TPPU处理对LPS诱导ALI小鼠肺内TNF-α mRNA表达的影响 | 第40-41页 |
| ·LPS诱导的ALI小鼠肺内NLRP3 mRNA和NLRC4 mRNA的表达 | 第41-42页 |
| ·TPPU处理对LPS诱导ALI小鼠肺内IL-1β表达与分泌的影响 | 第42-44页 |
| ·细胞活力检测 | 第44页 |
| ·TPPU处理对LPS应激下小鼠巨噬细胞IL-1β表达的影响 | 第44页 |
| ·TPPU处理对LPS诱导下小鼠巨噬细胞培养上清液中LDH活性的影响 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-48页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| 第二章 EETs对ALI继发肺纤维化的影响及其机制 | 第49-69页 |
| ·材料 | 第50-51页 |
| ·动物 | 第50页 |
| ·细胞 | 第50页 |
| ·试剂 | 第50-51页 |
| ·仪器 | 第51页 |
| ·方法 | 第51-58页 |
| ·小鼠ALI动物模型复制及干预 | 第51-52页 |
| ·小鼠支气管肺泡灌洗 | 第52页 |
| ·小鼠肺组织Masson染色 | 第52-53页 |
| ·小鼠肺组织羟脯氨酸含量检测 | 第53-54页 |
| ·肺组织总RNA提取和cDNA的制备以及基因扩增 | 第54页 |
| ·ELISA检测细胞因子TGF-β1的含量 | 第54-55页 |
| ·成纤维细胞和肺泡Ⅱ型上皮细胞培养 | 第55页 |
| ·小鼠肌成纤维细胞分化诱导及TPPU预处理 | 第55页 |
| ·细胞培养上清液中羟脯氨酸含量测定(消化法) | 第55-56页 |
| ·A549细胞EMT的诱导及TPPU预处理 | 第56-57页 |
| ·细胞形态学观察 | 第57页 |
| ·细胞总RNA提取和cDNA的合成以及基因扩增 | 第57-58页 |
| ·统计学处理 | 第58页 |
| ·结果 | 第58-66页 |
| ·TPPU处理对LPS诱导ALI小鼠体重的影响 | 第58页 |
| ·TPPU处理对LPS诱导ALI小鼠肺内胶原沉积的影响 | 第58-59页 |
| ·TPPU处理对LPS诱导ALI小鼠肺组织中羟脯氨酸含量的影响 | 第59-60页 |
| ·TPPU处理对LPS诱导ALI小鼠血清和BALF中TGF-β1含量的影响 | 第60页 |
| ·TPPU处理对LPS诱导ALI小鼠肺内基因表达的影响 | 第60-61页 |
| ·TPPU处理对TGF-β1诱导下小鼠成纤维细胞α-SMA mRNA表达的影响 | 第61-62页 |
| ·TPPU处理对TGF-β1诱导下小鼠成纤维细胞培养液羟脯氨酸的含量 | 第62-63页 |
| ·TPPU处理对TGF-β1诱导下A549细胞形态的影响 | 第63-65页 |
| ·TPPU处理对TGF-β1诱导下A549细胞E-钙粘素mRNA的表达 | 第65页 |
| ·TPPU处理对TGF-β1诱导下A549细胞培养上清液中羟脯氨酸含量的影响 | 第65-66页 |
| ·讨论 | 第66-68页 |
| ·小结 | 第68-69页 |
| 第三章 EETs对支气管上皮细胞损伤修复的影响 | 第69-94页 |
| ·材料 | 第69-71页 |
| ·细胞 | 第69-70页 |
| ·试剂 | 第70页 |
| ·仪器 | 第70-71页 |
| ·方法 | 第71-79页 |
| ·HBECs细胞培养 | 第71页 |
| ·损伤修复指数检测 | 第71-72页 |
| ·质粒构建 | 第72-75页 |
| ·质粒抽提及阳性克隆的鉴定 | 第75-77页 |
| ·质粒转染及转染效率观察 | 第77页 |
| ·MTT法检测CYP2J2过表达对HBECs细胞增殖的影响 | 第77-78页 |
| ·流式细胞术检测细胞周期 | 第78-79页 |
| ·PI染色检测细胞晚期凋亡 | 第79页 |
| ·统计学处理 | 第79页 |
| ·结果 | 第79-91页 |
| ·TPPU处理对HBECs损伤修复的影响 | 第79-82页 |
| ·人CYP2J2克隆产物电泳鉴定 | 第82页 |
| ·重组质粒酶切鉴定图谱 | 第82-83页 |
| ·重组质粒DNA测序鉴定 | 第83-85页 |
| ·荧光显微镜下观察重组质粒的转染效率 | 第85-86页 |
| ·CYP2J2重组过表达质粒转染HBECs后胞内CYP2J2 mRNA的表达 | 第86页 |
| ·CYP2J2过表达对HBECs细胞增殖的影响 | 第86-87页 |
| ·TPPU处理对HBECs细胞周期的影响 | 第87-89页 |
| ·TPPU处理对LPS诱导的HBECs晚期细胞凋亡的影响 | 第89-91页 |
| ·讨论 | 第91-93页 |
| ·小结 | 第93-94页 |
| 第四章 结论 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-104页 |
| 综述 | 第104-117页 |
| 参考文献 | 第110-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
