| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 英文缩略表 | 第11-13页 |
| 1. 引言 | 第13-21页 |
| ·研究背景及意义 | 第13-14页 |
| ·研究现状 | 第14-21页 |
| ·肺表面活性物质作用机制 | 第14页 |
| ·肺表面活性物质的组成 | 第14-15页 |
| ·肺表面活性物质制剂 | 第15-16页 |
| ·肺表面活性蛋白 B | 第16-17页 |
| ·SP-B 的生化结构 | 第17-18页 |
| ·SP-B 蛋白类似物 | 第18-19页 |
| ·课题研究目的 | 第19页 |
| ·课题研究内容及技术路线 | 第19-21页 |
| 2. SP-B 蛋白在肺组织中的定位 | 第21-29页 |
| ·材料与仪器 | 第21-22页 |
| ·主要材料 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-24页 |
| ·大鼠急性肺损伤模型建立 | 第22-23页 |
| ·SP-B 在正常与急性肺损伤大鼠肺组织的定位 | 第23-24页 |
| ·结果与分析 | 第24-26页 |
| ·大鼠急性肺损伤模型建立 | 第24-25页 |
| ·SP-B 在正常大鼠肺部组织的定位 | 第25页 |
| ·SP-B 在肺损伤大鼠肺部组织的定位 | 第25-26页 |
| ·讨论 | 第26-29页 |
| 3. pEGFP-N2-SP-B 载体构建与细胞转染 | 第29-47页 |
| ·材料与仪器 | 第29-30页 |
| ·主要材料 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29-30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-36页 |
| ·肺组织总 RNA 提取 | 第30-31页 |
| ·以肺总 RNA 为模板进行 RT-PCR 扩增 | 第31-33页 |
| ·pUC-T-SP-B 重组质粒的构建、鉴定 | 第33-34页 |
| ·pEGFP-N2-SP-B 重组质粒的构建 | 第34-35页 |
| ·细胞培养 | 第35-36页 |
| ·脂质体转染 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-44页 |
| ·RNA 与 RT-PCR 电泳鉴定结果 | 第36-37页 |
| ·pUC-T-SP-B 载体构建与鉴定 | 第37-39页 |
| ·pUC-T-SP-B 与 pEGFP-N2 双酶切 | 第39-40页 |
| ·pEGFP-N2-SP-B 载体构建与鉴定 | 第40-42页 |
| ·细胞培养 | 第42页 |
| ·pEGFP-N2-SP-B 在 A549 与 CCL-149 细胞中的定位 | 第42-43页 |
| ·pEGFP-N2 在 A549 与 CCL-149 细胞中的定位 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-47页 |
| 4. SP-B 生物信息学分析及其模拟肽设计 | 第47-55页 |
| ·主要工具 | 第47页 |
| ·设计依据 | 第47-49页 |
| ·疏水性 | 第47-48页 |
| ·电荷分布 | 第48页 |
| ·α螺旋结构 | 第48-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-53页 |
| ·候选肽设计 | 第49页 |
| ·疏水性分析 | 第49-50页 |
| ·二级结构预测 | 第50-51页 |
| ·KAAVV 三级结构预测 | 第51-52页 |
| ·多肽合成 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 5. SP-B 模拟肽的体外活性与功能分析 | 第55-67页 |
| ·材料与仪器 | 第55-56页 |
| ·主要试剂 | 第55页 |
| ·主要仪器 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-57页 |
| ·冻干再水化脂质体（dehydration-rehydration vesicles，FRV）制备 | 第56页 |
| ·大鼠肺表面活性物质提取 | 第56-57页 |
| ·表面张力测定 | 第57页 |
| ·拉曼光谱测定 | 第57页 |
| ·结果与分析 | 第57-64页 |
| ·脂质体制剂制备 | 第57-58页 |
| ·天然肺表面活性物质中蛋白浓度测定 | 第58-59页 |
| ·表面张力测定 | 第59-60页 |
| ·拉曼光谱测定 | 第60-64页 |
| ·讨论 | 第64-67页 |
| 6. 模拟肽对离体肺功能影响的评估 | 第67-73页 |
| ·材料与方法 | 第67页 |
| ·主要材料 | 第67页 |
| ·主要试剂 | 第67页 |
| ·主要仪器 | 第67页 |
| ·实验方法 | 第67-68页 |
| ·大鼠离体肺顺应性测定 | 第67-68页 |
| ·结果与分析 | 第68-70页 |
| ·离体肺顺应性测定 | 第68-70页 |
| ·讨论 | 第70-73页 |
| 7. 结论与展望 | 第73-75页 |
| ·结论 | 第73页 |
| ·展望 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-79页 |
| 附录 | 第79-81页 |
| 附图 | 第81-83页 |
