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白藜芦醇诱导线粒体自噬修复巨噬细胞氧化损伤

中文摘要第1-5页
Abstract第5-8页
英文缩略词表第8-13页
1 前言第13-25页
   ·Resv 的研究进展第13-17页
     ·Resv 的抗氧化作用第13-15页
     ·Resv 的抗癌作用第15-16页
     ·Resv 对心血管疾病的保护作用第16-17页
     ·Resv 的抗炎作用第17页
   ·自噬与氧化应激第17-21页
     ·自噬的概述及分类第17-19页
     ·自噬的分子机制第19页
     ·氧化应激与线粒体自噬第19-21页
   ·Resv 诱导线粒体自噬的机制研究第21-23页
     ·Resv 与自噬的关系第21-22页
     ·SIRT3 /AMPK 途径第22-23页
   ·立题依据第23-25页
2 Resv 对拘束负荷小鼠腹腔巨噬细胞氧化损伤的改善作用第25-34页
   ·材料与方法第25-29页
     ·实验材料第25-27页
     ·实验分组第27-28页
     ·检测小鼠腹腔巨噬细胞的数目及其吞噬率第28页
     ·用荧光显微镜和流式细胞术检测腹腔巨噬细胞的线粒体膜电位第28页
     ·用荧光显微镜初步检测线粒体自噬第28-29页
     ·数据统计与分析第29页
   ·实验结果第29-33页
     ·Resv 对拘束负荷小鼠腹腔巨噬细胞的数目的影响第29-30页
     ·Resv 对拘束负荷小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率的影响第30页
     ·Resv 对拘束负荷小鼠腹腔巨噬细胞线粒体膜电位的影响第30-32页
     ·Resv 对拘束负荷小鼠腹腔巨噬细胞自噬水平的影响第32-33页
   ·小结与讨论第33-34页
3 Resv 对 AAPH 所致的 RAW 264.7 巨噬细胞氧化损伤的改善作用及其机制研究第34-61页
   ·材料与方法第35-44页
     ·实验材料第35-38页
     ·细胞的复苏、传代及冻存第38页
     ·MTT 法测定细胞增殖抑制率第38页
     ·Hoechst 33258 染料检测细胞凋亡第38-39页
     ·流式细胞术检测细胞吞噬率第39页
     ·DCFH-DA 荧光探针法检测 ROS 的生成率第39页
     ·TMRM 染料上流式检测线粒体膜电位第39页
     ·RT-PCR 检测 RAW 264.7 细胞基因表达第39-42页
     ·MDC 染色进行细胞自噬的初筛第42页
     ·透射电子显微镜观察细胞的自噬结构第42页
     ·用 Western blotting 检测蛋白表达第42-43页
     ·激光共聚焦显微镜检测自噬水平及相关蛋白共定位第43页
     ·SIRT3 的 siRNA 转染实验第43页
     ·数据统计与分析第43-44页
   ·实验结果第44-57页
     ·AAPH 对巨噬细胞 RAW 264.7 细胞增殖的影响第44页
     ·AAPH 对巨噬细胞 RAW 264.7 细胞形态的影响第44-45页
     ·Resv 对 AAPH 处理的巨噬细胞 RAW264.7 细胞增殖的影响第45页
     ·Resv 对 AAPH 处理的巨噬细胞 RAW 264.7 吞噬功能的影响第45-46页
     ·Resv 对 AAPH 处理的巨噬细胞 RAW 264.7 ROS 生成率的影响第46-47页
     ·Resv 对 AAPH 处理的巨噬细胞 RAW 264.7 线粒体膜电位的影响第47-48页
     ·Resv 对 AAPH 处理的巨噬细胞 RAW264.7 的线粒体呼吸链复合物 I 的亚单位NDUFS8 表达的影响第48-49页
     ·用 MDC 染色法检测 RAW 264.7 细胞的自噬水平第49-50页
     ·用透射电镜观察 AAPH 处理的 RAW 264.7 细胞的自噬结构第50-51页
     ·用 Western blotting 检测 RAW264.7 细胞自噬相关蛋白的表达水平第51-52页
     ·用蛋白印迹法检测 RAW 264.7 细胞 SIRT3/AMPK 通路相关蛋白的表达水平第52-53页
     ·用蛋白印迹法检测 SIRT3 的 siRNA 脂质体转染效果第53-54页
     ·用蛋白印迹法检测 SIRT3 siRNA 处理的 RAW 264.7 细胞的 SIRT3/AMPK 通路相关蛋白和自噬相关蛋白的表达水平第54-55页
     ·用激光共聚焦显微镜观察 RAW 264.7 细胞的自噬结构第55-56页
     ·用流式细胞术检测 SIRT3 siRNA 处理的 RAW 264.7 细胞吞噬荧光微球的吞噬率第56-57页
   ·小结与讨论第57-61页
4 结论与展望第61-63页
   ·结果与讨论第61页
   ·创新和突破第61-62页
   ·展望第62-63页
参考文献第63-74页
致谢第74-76页
附录:论文涉及的基因序列第76-78页
在学期间发表论文第78页

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