| 摘要 | 第1-16页 |
| Abstract | 第16-18页 |
| 第一章 真菌分类鉴定及代谢物中杀线虫活性物质的研究进展 | 第18-34页 |
| ·根结线虫的危害及其防治 | 第18-19页 |
| ·杀线虫真菌的分类鉴定研究进展 | 第19-21页 |
| ·DNA中G+C(mol%)含量测定 | 第20页 |
| ·核酸杂交技术 | 第20页 |
| ·限制性酶切片段长度多态性 | 第20-21页 |
| ·随机扩增多态性DNA | 第21页 |
| ·具杀线虫活性的真菌及其代谢产物 | 第21-27页 |
| ·担子菌中产生杀线虫活性的代谢产物 | 第22页 |
| ·半知菌中产生杀线虫活性的代谢产物 | 第22页 |
| ·子囊菌中产生杀线虫活性的代谢产物 | 第22-23页 |
| ·接合菌中产生杀线虫活性的代谢产物 | 第23-27页 |
| ·毒杀线虫真菌的作用机制 | 第27页 |
| ·天然代谢产物的分离及纯化技术研究现状 | 第27-29页 |
| ·新技术在工程真菌研究中的应用 | 第29-31页 |
| ·工程真菌次生代谢产物基因簇的研究进展 | 第29页 |
| ·抑制差减杂交法 | 第29-30页 |
| ·Genome mining天然产物生物合成代谢途径技术 | 第30-31页 |
| ·菌株Snef5的研究概况 | 第31-32页 |
| ·微生物杀线剂存在的问题与展望 | 第32-34页 |
| 第二章 菌株Snef5的鉴定及生物学特性研究 | 第34-47页 |
| ·材料与方法 | 第34-37页 |
| ·菌株 | 第34页 |
| ·菌株的形态学鉴定 | 第34页 |
| ·菌株的分子生物学鉴定 | 第34-35页 |
| ·系统发育树的构建 | 第35-36页 |
| ·菌株的生物学特性研究 | 第36-37页 |
| ·数据分析 | 第37页 |
| ·结果分析 | 第37-44页 |
| ·菌株的形态学鉴定 | 第37-38页 |
| ·分子生物学鉴定 | 第38-39页 |
| ·系统发育树的构建 | 第39-40页 |
| ·菌株Snef5生物学特性研究 | 第40-44页 |
| ·结论与讨论 | 第44-47页 |
| 第三章 菌株Snef5发酵液对植物线虫的毒力研究 | 第47-51页 |
| ·材料与方法 | 第47-48页 |
| ·菌株及试验材料 | 第47页 |
| ·培养基 | 第47页 |
| ·发酵液的制备 | 第47页 |
| ·靶标线虫 | 第47页 |
| ·菌株Snef5发酵液对靶标线虫生物活性测定 | 第47-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-49页 |
| ·菌株Snef5发酵液杀线虫活性测定结果 | 第48-49页 |
| ·结论与讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 菌株Snef5发酵液对植物安全性评价 | 第51-59页 |
| ·材料与方法 | 第51-53页 |
| ·菌株及试验材料 | 第51页 |
| ·培养基的制备 | 第51页 |
| ·菌株Snef5孢子悬浮液的制备 | 第51-52页 |
| ·菌株Snef5菌株发酵液对种子萌芽的影响试验 | 第52页 |
| ·菌株Snef5发酵液对植株生长发育的影响试验 | 第52页 |
| ·播种育苗 | 第52页 |
| ·接种方法 | 第52-53页 |
| ·观察并记录侵染情况 | 第53页 |
| ·结果分析 | 第53-57页 |
| ·发酵液处理种子的萌芽情况 | 第53-54页 |
| ·菌株Snef5发酵液对番茄植株生长的影响 | 第54页 |
| ·菌株Snef5发酵液对黄瓜植株生长的影响 | 第54页 |
| ·菌株Snef5发酵液对大豆植株生长的影响 | 第54-55页 |
| ·菌株Snef5对黑麦草致病性鉴定 | 第55页 |
| ·菌株Snef5对小麦品种辽春10致病性鉴定 | 第55-56页 |
| ·菌株Snef5对小麦品种小密穗致病性鉴定 | 第56-57页 |
| ·菌株Snef5对柞蚕茧蛹的侵染 | 第57页 |
| ·结论与讨论 | 第57-59页 |
| 第五章 菌株Snef5发酵液中杀线虫活性物质的粗提取 | 第59-65页 |
| ·试验材料 | 第59-60页 |
| ·供试线虫 | 第59页 |
| ·试验试剂 | 第59-60页 |
| ·仪器设备 | 第60页 |
| ·试验方法 | 第60-62页 |
| ·菌丝体预处理 | 第60页 |
| ·发酵液预处理 | 第60-62页 |
| ·结果与分析 | 第62-63页 |
| ·菌丝体活性检测 | 第62页 |
| ·加热法处理发酵液 | 第62页 |
| ·调节pH值法处理发酵液 | 第62页 |
| ·无水乙醇法处理发酵液 | 第62页 |
| ·(NH_4)_2SO_4分级盐析法处理发酵液 | 第62-63页 |
| ·加Na_5P_3O_(10)、K_4Fe(CN)_6、C_2H_2O_4处理发酵液 | 第63页 |
| ·结论与讨论 | 第63-65页 |
| 第六章 菌株Snef5发酵液理化性质研究 | 第65-74页 |
| ·材料和设备 | 第65-66页 |
| ·试验材料 | 第65页 |
| ·仪器设备 | 第65-66页 |
| ·试剂 | 第66页 |
| ·溶媒萃取试剂 | 第66页 |
| ·Doskochilova八溶剂系统试剂 | 第66页 |
| ·纸电泳缓冲液配制 | 第66页 |
| ·试验方法 | 第66-69页 |
| ·溶媒萃取试验 | 第66-67页 |
| ·Doskochilova八溶剂系统层析试验 | 第67页 |
| ·纸电泳试验 | 第67-68页 |
| ·稳定性试验 | 第68-69页 |
| ·结果与分析 | 第69-73页 |
| ·溶媒萃取试验 | 第69-70页 |
| ·Doskochilova溶剂系统层析试验 | 第70页 |
| ·纸电泳试验 | 第70-71页 |
| ·稳定性试验 | 第71-73页 |
| ·结论与讨论 | 第73-74页 |
| 第七章 菌株Snef5发酵液中杀线虫活性物质的分离纯化 | 第74-98页 |
| ·HC-ADS-7离子交换柱层析法分离菌株Snef5发酵液中杀线虫活性物质 | 第74-76页 |
| ·材料与试剂 | 第74页 |
| ·试验设备 | 第74-75页 |
| ·试验方法 | 第75页 |
| ·结果与分析 | 第75-76页 |
| ·薄层层析法分离菌株Snef5发酵液中杀线虫活性物质 | 第76-78页 |
| ·材料与试剂 | 第76页 |
| ·试验设备 | 第76页 |
| ·试验方法 | 第76-77页 |
| ·结果与分析 | 第77-78页 |
| ·硅胶柱层析法分离菌株Snef5发酵液中杀线虫活性物质 | 第78-79页 |
| ·材料与试剂 | 第78页 |
| ·试验设备 | 第78页 |
| ·试验方法 | 第78-79页 |
| ·结果分析 | 第79页 |
| ·Sephadex凝胶柱层析法分离菌株Snef5发酵液中杀线虫活性物质 | 第79-81页 |
| ·材料与试剂 | 第79页 |
| ·试验设备 | 第79-80页 |
| ·试验方法 | 第80页 |
| ·结果与分析 | 第80-81页 |
| ·菌株Snef5发酵液杀线虫活性物质氨基酸检测 | 第81页 |
| ·材料与试剂 | 第81页 |
| ·试验方法 | 第81页 |
| ·结果与分析 | 第81页 |
| ·高效液相色谱检测菌株Snef5发酵液中杀线虫活性物质 | 第81-96页 |
| ·材料与试剂 | 第81页 |
| ·试验设备 | 第81-82页 |
| ·试验方法 | 第82页 |
| ·结果与分析 | 第82-96页 |
| ·结论与讨论 | 第96-98页 |
| 第八章 菌株Snef5强毒株与弱毒株诱变筛选研究 | 第98-109页 |
| ·材料和方法 | 第99-102页 |
| ·菌株 | 第99页 |
| ·供试靶标线虫 | 第99页 |
| ·供试培养基及试剂 | 第99-100页 |
| ·孢子悬浮液的制备 | 第100页 |
| ·诱变方法 | 第100-101页 |
| ·诱变菌株的培养筛选及发酵液制备 | 第101页 |
| ·菌株毒力的筛选 | 第101-102页 |
| ·数据分析 | 第102页 |
| ·结果与分析 | 第102-107页 |
| ·诱变处理结果 | 第102-106页 |
| ·突变株形态特征观察结果 | 第106-107页 |
| ·结论与讨论 | 第107-109页 |
| 第九章 抑制消减杂交法分析Snef5杀线虫活性相关基因 | 第109-130页 |
| ·试验材料 | 第109-110页 |
| ·主要试剂 | 第109页 |
| ·主要仪器耗材 | 第109-110页 |
| ·试验方法 | 第110-117页 |
| ·RNA抽提 | 第110页 |
| ·SMART反转录 | 第110-111页 |
| ·cDNA纯化 | 第111-112页 |
| ·cDNA RsaI酶切 | 第112-113页 |
| ·接头连接 | 第113页 |
| ·差减杂交 | 第113-114页 |
| ·两轮差减PCR | 第114-116页 |
| ·两次差减PCR扩增产物的纯化 | 第116页 |
| ·差减文库的克隆(T载体克隆) | 第116页 |
| ·转化 | 第116页 |
| ·PCR鉴定差减文库的克隆插入片断大小 | 第116-117页 |
| ·结果与分析 | 第117-128页 |
| ·RNA质检结果 | 第117-118页 |
| ·SMART结果 | 第118-119页 |
| ·RsaI酶切质检结果 | 第119-120页 |
| ·接头验证结果 | 第120-121页 |
| ·差减验证 | 第121页 |
| ·PCR鉴定 | 第121-122页 |
| ·差异表达基因的测序及生物信息学分析 | 第122-128页 |
| ·结论与讨论 | 第128-130页 |
| 第十章 结论与展望 | 第130-136页 |
| ·结论与讨论 | 第130-134页 |
| ·菌株Snef5分类鉴定研究 | 第130-131页 |
| ·菌株Snef5杀线虫活性研究及对植物安全性评价 | 第131页 |
| ·菌株Snef5代谢产物杀线虫活性物质分离纯化研究 | 第131-132页 |
| ·菌株Snef5突变株的诱变筛选研究 | 第132-133页 |
| ·菌株Snef5杀线虫活性基因簇分析研究 | 第133-134页 |
| ·展望及有待深入研究的问题 | 第134页 |
| ·本文主要创新点 | 第134-136页 |
| 参考文献 | 第136-146页 |
| 附录 | 第146-148页 |
| 致谢 | 第148-150页 |
| 攻读博士学位期间发表论文及专利情况 | 第150-151页 |
| 论文图表统计 | 第151页 |
