| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 目录 | 第11-13页 |
| 縮略词表 | 第13-15页 |
| 引言 | 第15-19页 |
| 参考文献 | 第17-19页 |
| 第一章 转基因体细胞核移植绒山羊体系的初步建立 | 第19-37页 |
| 前言 | 第19-20页 |
| 1 材料 | 第20-21页 |
| ·主要仪器设备和试剂 | 第20页 |
| ·实验材料 | 第20页 |
| ·试剂及耗材 | 第20页 |
| ·实验所需溶液的配制 | 第20-21页 |
| 2 方法 | 第21-27页 |
| ·阿尔巴斯绒山羊胎儿成纤维细胞(caprine fetal fibroblast cells,CFCs)以及耳尖成纤维细胞(caprine ear fibroblast cells,CEFCs)的分离培养 | 第21-22页 |
| ·阿尔巴斯绒山羊胎儿成纤维细胞的性别鉴定 | 第22-23页 |
| ·转基因阿尔巴斯绒山羊细胞的获得及鉴定 | 第23-25页 |
| ·绒山羊体细胞核移植体系的构建 | 第25-26页 |
| ·胚胎移植与产羔 | 第26-27页 |
| 3 结果 | 第27-32页 |
| ·阿尔巴斯绒山羊胎儿成纤维细胞以及耳尖成纤维细胞的分离培养 | 第27-28页 |
| ·阿尔巴斯绒山羊胎儿成纤维细胞的性别鉴定 | 第28-29页 |
| ·转基因阿尔巴斯绒山羊细胞的获得及鉴定 | 第29-30页 |
| ·绒山羊体细胞核移植技术体系的建立 | 第30-32页 |
| ·转基因克隆黑羊的产黑与管理 | 第32页 |
| 4 讨论 | 第32-34页 |
| 参考文献 | 第34-37页 |
| 第二章 供体细胞类型和受体羊条件对绒山羊体细胞核移植效率的影响 | 第37-55页 |
| 引言 | 第37-38页 |
| 1 材料与方法 | 第38-39页 |
| ·试剂及耗材 | 第38页 |
| ·绒山羊胎儿成纤维细胞(Caprine Fetal Fibroblast Cells,CFCs)与成体耳尖成纤维细胞(Caprine Ear Fibroblast Cells,CEFCs)的分离及性别鉴定 | 第38页 |
| ·绒山羊成纤维细胞的转染和筛选以及鉴定及供体细胞的准备 | 第38页 |
| ·绒山羊卵母细胞的采集,体外成熟与核移植操作 | 第38-39页 |
| ·胚胎移植与克隆羊的生产 | 第39页 |
| ·克隆效率计算 | 第39页 |
| ·数据分析 | 第39页 |
| 2 结果 | 第39-46页 |
| ·不同细胞来源对克隆效率的影响 | 第40-43页 |
| ·不同种类成纤维细胞对克隆效率的影响 | 第43页 |
| ·非转基因供体细胞与转基因供体细胞对克隆效率的影响 | 第43-44页 |
| ·性别对克隆效率的影响 | 第44-45页 |
| ·不同年份受体羊排卵点数对克隆效率的影响 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 第三章 转基因克隆绒山羊的鉴定与生产性能检测 | 第55-67页 |
| 前言 | 第55页 |
| 1 仪器设备与试剂材料 | 第55页 |
| 2 方法 | 第55-56页 |
| ·克隆羔羊基本数据的采集 | 第55-56页 |
| ·克隆羔羊耳尖成纤维细胞的采集 | 第56页 |
| ·转基因羔羊初步鉴定 | 第56页 |
| ·转基因羊生产性能检测与筛选 | 第56页 |
| 3 结果 | 第56-61页 |
| ·转基因克隆羔羊与体细胞克隆羔羊妊娠天数如初生重的对比 | 第56-58页 |
| ·克隆羔羊耳尖成纤维细胞的培养 | 第58-59页 |
| ·转基因羔羊初步鉴定 | 第59-61页 |
| ·转基因羊生产性能检测 | 第61页 |
| 4 讨论 | 第61-64页 |
| 参考文献 | 第64-67页 |
| 结论 | 第67-69页 |
| 综述部分 | 第69-87页 |
| 第一章 转基因动物研究方法 | 第69-75页 |
| 1 显微注射核酸法获得转基因动物 | 第69-71页 |
| 2. 干细胞介导获得转基因动物 | 第71-74页 |
| 3 体细胞核移植法 | 第74-75页 |
| 第二章 影响体细胞核移植的因素 | 第75-80页 |
| 1 供体细胞对体细胞核移植效率的影响 | 第76-78页 |
| 2 卵母细胞质量与克隆胚胎对克隆效率的影响 | 第78页 |
| 3 胚胎移植方法与动物后期管理对克隆效率的影响 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-87页 |
| 致谢 | 第87-89页 |
| 博士期间发表论文 | 第89-90页 |