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E3连接酶TRIP通过降解TBK1负向调控IFN-β的产生和抗病毒免疫反应

目录第1-6页
CATEGORY第6-8页
中文摘要第8-17页
ABSTRACT第17-25页
前言第25-30页
材料和方法第30-63页
 1. 实验材料第30-34页
   ·主要试剂第30-31页
   ·细胞株、质粒及小鼠来源第31页
   ·主要仪器第31-32页
   ·PCR引物第32-34页
   ·TRIP干扰RNA序列第34页
 2. 实验方法第34-63页
   ·试剂的配制第34-36页
   ·细胞的培养,复苏与冻存第36-38页
   ·RT-PCR检测相应基因表达第38-42页
   ·Western blot检测蛋白水平的变化第42-47页
   ·TRIP表达载体构建第47-53页
   ·TRIP E3连接酶活性缺失突变体及IRF3点突变体的构建第53-55页
   ·质粒及干扰RNA的转染第55-57页
   ·病毒复制及滴度实验第57-59页
   ·免疫共沉淀(Co-IP)实验第59-60页
   ·体外泛索化实验第60页
   ·双荧光素酶活性的检测及分析第60-61页
   ·免疫荧光第61页
   ·TBK1激酶检测试验第61-63页
实验结果第63-81页
 一.TLR信号通路对TRIP表达的调控作用第63-65页
  1. TLR促进TRIP的表达第63页
  2. TRIP主要定位于细胞浆第63页
  3. TLR不影响TRIP在细胞内定位第63-65页
 二.TRIP负向调控TLR及RLR介导的IFN-β的产生第65-69页
  1. TRIP抑制TLR3/4介导的IFN-β产生第65-67页
  2. TRIP负向调控RLR介导的IFN-β的产生第67-69页
 三.TRIP调控IFN-β的分子机制第69-79页
  1. TRIP负向调控转录因子IRF3活性第69-72页
  2. TRIP靶点的寻找第72-79页
   ·TRIP影响接头蛋白介导的IFN-P的产生第72页
   ·TRIP与接头蛋白的结合第72-74页
   ·TRIP对TBK1的泛素化影响第74-75页
   ·TRIP对TBK1的降解第75-78页
     ·TRIP对TBK1激酶活性的影响第78-79页
 四.TRIP抵抗病毒的生理意义第79-81页
总结第81-84页
参考文献第84-90页
相关论文发表第90-92页
固有免疫信号通路中与泛素化第92-126页
 參考文献第107-126页
发表论文一第126-153页
发表论文二第153-176页
致谢第176-177页
学位论文评阅及答辩情况表第177页

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