目录 | 第1-6页 |
CATEGORY | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-17页 |
ABSTRACT | 第17-25页 |
前言 | 第25-30页 |
材料和方法 | 第30-63页 |
1. 实验材料 | 第30-34页 |
·主要试剂 | 第30-31页 |
·细胞株、质粒及小鼠来源 | 第31页 |
·主要仪器 | 第31-32页 |
·PCR引物 | 第32-34页 |
·TRIP干扰RNA序列 | 第34页 |
2. 实验方法 | 第34-63页 |
·试剂的配制 | 第34-36页 |
·细胞的培养,复苏与冻存 | 第36-38页 |
·RT-PCR检测相应基因表达 | 第38-42页 |
·Western blot检测蛋白水平的变化 | 第42-47页 |
·TRIP表达载体构建 | 第47-53页 |
·TRIP E3连接酶活性缺失突变体及IRF3点突变体的构建 | 第53-55页 |
·质粒及干扰RNA的转染 | 第55-57页 |
·病毒复制及滴度实验 | 第57-59页 |
·免疫共沉淀(Co-IP)实验 | 第59-60页 |
·体外泛索化实验 | 第60页 |
·双荧光素酶活性的检测及分析 | 第60-61页 |
·免疫荧光 | 第61页 |
·TBK1激酶检测试验 | 第61-63页 |
实验结果 | 第63-81页 |
一.TLR信号通路对TRIP表达的调控作用 | 第63-65页 |
1. TLR促进TRIP的表达 | 第63页 |
2. TRIP主要定位于细胞浆 | 第63页 |
3. TLR不影响TRIP在细胞内定位 | 第63-65页 |
二.TRIP负向调控TLR及RLR介导的IFN-β的产生 | 第65-69页 |
1. TRIP抑制TLR3/4介导的IFN-β产生 | 第65-67页 |
2. TRIP负向调控RLR介导的IFN-β的产生 | 第67-69页 |
三.TRIP调控IFN-β的分子机制 | 第69-79页 |
1. TRIP负向调控转录因子IRF3活性 | 第69-72页 |
2. TRIP靶点的寻找 | 第72-79页 |
·TRIP影响接头蛋白介导的IFN-P的产生 | 第72页 |
·TRIP与接头蛋白的结合 | 第72-74页 |
·TRIP对TBK1的泛素化影响 | 第74-75页 |
·TRIP对TBK1的降解 | 第75-78页 |
·TRIP对TBK1激酶活性的影响 | 第78-79页 |
四.TRIP抵抗病毒的生理意义 | 第79-81页 |
总结 | 第81-84页 |
参考文献 | 第84-90页 |
相关论文发表 | 第90-92页 |
固有免疫信号通路中与泛素化 | 第92-126页 |
參考文献 | 第107-126页 |
发表论文一 | 第126-153页 |
发表论文二 | 第153-176页 |
致谢 | 第176-177页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第177页 |