| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-32页 |
| ·纤维素酶的分类 | 第14-17页 |
| ·糖苷水解酶家族 | 第14-16页 |
| ·纤维素酶非催化域部分(CBM) | 第16页 |
| ·纤维素酶催化机制 | 第16页 |
| ·活性位点的拓扑结构 | 第16-17页 |
| ·可降解纤维素微生物 | 第17-22页 |
| ·耐热纤维素酶 | 第22页 |
| ·耐碱纤维素酶 | 第22-23页 |
| ·纤维素酶系统 | 第23-27页 |
| ·复合型纤维素酶系统 | 第24-25页 |
| ·非复合型纤维素酶系统 | 第25-27页 |
| ·蛋白质工程 | 第27-30页 |
| ·定向进化 | 第27-28页 |
| ·理性设计 | 第28-30页 |
| ·本文的研究意义及研究内容 | 第30-32页 |
| 第二章 高温纤维素降解菌的筛选及鉴定 | 第32-42页 |
| 引言 | 第32页 |
| ·材料与方法 | 第32-35页 |
| ·筛菌取材来源 | 第32页 |
| ·培养基 | 第32-33页 |
| ·筛菌过程 | 第33页 |
| ·纤维素酶酶活的测定 | 第33-34页 |
| ·菌种鉴定 | 第34-35页 |
| ·结果与讨论 | 第35-41页 |
| ·初筛及复筛结果 | 第35-36页 |
| ·菌株鉴定 | 第36-41页 |
| ·本章小结 | 第41-42页 |
| 第三章 Thermobifida fusca W-5产纤维素酶研究 | 第42-48页 |
| 引言 | 第42页 |
| ·材料与方法 | 第42-43页 |
| ·培养基 | 第42-43页 |
| ·粗酶液性质研究 | 第43页 |
| ·碳、氮源对菌株产酶能力的影响 | 第43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-47页 |
| ·Thermobifida fusca W-5的粗酶液最适反应pH研究 | 第43-44页 |
| ·Thermobifida fusca W-5最适反应温度研究 | 第44-45页 |
| ·Thermobifida fusca W-5的粗酶液温度稳定性 | 第45-46页 |
| ·培养基碳源、氮源对Thermobifida fusca W-5产酶的影响 | 第46-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 T.fusca W-5纤维素酶基因cel9b和cel5b的克隆及原核表达 | 第48-68页 |
| 引言 | 第48页 |
| ·材料与方法 | 第48-53页 |
| ·菌株与质粒 | 第48-49页 |
| ·工具酶与生化试剂 | 第49页 |
| ·培养基 | 第49页 |
| ·cel9b及cel5b基因的克隆 | 第49-51页 |
| ·异源表达载体的构建 | 第51页 |
| ·基因cel9b与cel5b的原核异源表达 | 第51-53页 |
| ·结果与讨论 | 第53-66页 |
| ·基因cel9b的克隆、基因分析及其表达载体的构建 | 第53-58页 |
| ·Cel9B的相关酶学性质检测 | 第58-60页 |
| ·基因cel5b的克隆、基因分析及其表达载体的构建 | 第60-64页 |
| ·Cel5B相关酶学性质检测 | 第64-66页 |
| ·本章小结 | 第66-68页 |
| 第五章 定点突变探索Cel9B及Cel5B的耐高温及耐碱机制 | 第68-94页 |
| 引言 | 第68页 |
| ·材料与方法 | 第68-72页 |
| ·菌株、质粒及培养基 | 第68-69页 |
| ·引物序列 | 第69页 |
| ·蛋白纯化所用试剂 | 第69-70页 |
| ·实验方法 | 第70-72页 |
| ·结果与讨论 | 第72-92页 |
| ·Cel9B的结构域缺失突变 | 第72-78页 |
| ·Cel9B及Cel5B同源模建及活性中心位点分析 | 第78-83页 |
| ·Cel9B定点突变研究 | 第83-87页 |
| ·Cel5B定点突变研究 | 第87-92页 |
| ·本章小结 | 第92-94页 |
| 附录 | 第94-96页 |
| 参考文献 | 第96-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第103页 |
